一、代謝組學(xué)與中醫(yī)宏觀整體觀共性探討

代謝組學(xué)與有著幾千年歷史的中醫(yī)學(xué)在許多方面有相近的屬性，應(yīng)用代謝組學(xué)和全面性系統(tǒng)策略來理解疾病過程，與中醫(yī)的整體觀念和辨證論治思維方式不謀而合。代謝組學(xué)是從整體的“生化表型”來把握生物體的整體功能狀態(tài)。中醫(yī)證候是從生物體的外在表現(xiàn)及對生物體內(nèi)在聯(lián)系的整合歸納，根據(jù)“司外揣內(nèi)”的思想方法了解生物體的整體功能狀態(tài)，二者的指導(dǎo)思想具有內(nèi)在相通性。中醫(yī)藥的整體和系統(tǒng)思想局限在宏觀層面，帶有明顯的原生態(tài)特點(diǎn)，而系統(tǒng)生物學(xué)是在全局分析、還原基礎(chǔ)上的再整合。

因而，以代謝組學(xué)為主體的系統(tǒng)生物學(xué)研究方法是認(rèn)識中醫(yī)藥抽象整體觀思想的根本途徑之一。以中醫(yī)藥整體觀思想對于系統(tǒng)生物學(xué)研究再整合過程中的宏觀指導(dǎo)意義為基礎(chǔ)，將兩種學(xué)術(shù)思想方法進(jìn)行融合、互動(dòng)與滲透，才能促生最為科學(xué)、合理的現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)模式。代謝組學(xué)是生物體整體功能狀態(tài)的 “生化表型”，具有“終點(diǎn)放大”的特征，這些特質(zhì)使得代謝組學(xué)在中醫(yī)證候研究中具有突出優(yōu)勢。中醫(yī)理論的整體觀與“組學(xué)”強(qiáng)調(diào)的從整體角度研究生物體的功能水平高度一致。

二、代謝組學(xué)與中醫(yī)證候研究策略

“司外揣內(nèi)”是中醫(yī)診斷的基本原理之一，通過外在臨床表現(xiàn)，認(rèn)識內(nèi)在本質(zhì)。而內(nèi)在本質(zhì)又包括很多方面，如DNA、RNA、蛋白、小分子物質(zhì)等。如何為證候提供客觀的評判科學(xué)依據(jù)、如何用內(nèi)在的變化客觀的表征外在表現(xiàn)等問題已成為中醫(yī)藥領(lǐng)域的一個(gè)研究熱點(diǎn)。內(nèi)在基因、蛋白質(zhì)的改變，直接影響代謝物變化比例、濃度等，由此或許代謝物更能體現(xiàn)證的生物學(xué)本質(zhì)。因此，代謝組學(xué)或許會成為研究證候生物學(xué)本質(zhì)的得力工具。采用代謝組學(xué)技術(shù)進(jìn)行中醫(yī)證候研究應(yīng)注意以下策略：

基于中醫(yī)理論研究證候內(nèi)涵

中醫(yī)理論，博大精深，蘊(yùn)含著豐富的理論指導(dǎo)。例如，“同病異證”“異病同證”理論，可以首先通過“同病異證”祛除所研究證候以外的證候信息，再通過“異病同證”篩選不同疾病中同一證候的差異物交集來尋找不同疾病中相同證候的共性物質(zhì)基礎(chǔ)。例如，基于“同病異證”理論，對慢性乙型肝炎患者中實(shí)證和虛證患者尿液代謝物進(jìn)行非靶向檢測，通過統(tǒng)計(jì)分析共篩選39個(gè)差異代謝物，進(jìn)行ROC分析，發(fā)現(xiàn)吡喃木糖苷、核糖酸、尿酸、d-核糖、環(huán)己酮五種物質(zhì)的ROC面積達(dá)到0.7-0.92。基于“異病同證”理論，對慢乙肝和脂肪肝中的濕熱證與非濕熱進(jìn)行“異病同證”研究，發(fā)現(xiàn)濕熱證患者中能量代謝、氨基酸代謝、脂質(zhì)代謝等通路發(fā)生異常。最終通過生物信息學(xué)分析，初步探討了濕熱證的生物學(xué)內(nèi)涵，如圖3。

結(jié)合“同病異證”與“異病同證”理論研究證候，與單獨(dú)根據(jù)“同病異證”或“異病同證”相比，前者更具有特異性，適用于特異性診斷指標(biāo)的研究，后者涵蓋的證候物質(zhì)基礎(chǔ)更廣泛。之外，還有體質(zhì)學(xué)說、氣血津液學(xué)說等等，均可為證候的物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供理論指導(dǎo)。

通過家系研究證候內(nèi)涵

由于家系具有遺傳背景相近，生活環(huán)境近似的特點(diǎn)，所以生物學(xué)差異較小，從家系證候研究中尋找證候的特異標(biāo)志物或許為中醫(yī)證候的研究開辟新的途徑。例如對雙生子糖尿病腎虛證的時(shí)間差進(jìn)行研究，即研究不是同時(shí)出現(xiàn)糖尿病腎虛者，或者病理進(jìn)程不同，某一時(shí)間點(diǎn)雙生子中的一個(gè)是糖尿病腎虛證，另一個(gè)是糖尿病非腎虛證。通過篩選兩者之間的差異代謝物，挖掘糖尿病腎虛證的物質(zhì)基礎(chǔ)，為揭示發(fā)病機(jī)制提供證據(jù)。

利用亞健康狀態(tài)研究證候內(nèi)涵

在構(gòu)建腎陰虛證的cDNA文庫研究中，發(fā)現(xiàn)不同病種腎陰虛證的消減文庫存在明顯差異，而亞健康腎陰虛證的消減文庫受到的干擾最小，可能是因?yàn)閬喗】凳墙橛诮】岛图膊≈�間的中間狀態(tài)，屬于功能性改變，也說明亞健康對于中醫(yī)證候本質(zhì)研究有著重要的意義。

三、中醫(yī)證候代謝組學(xué)面臨的挑戰(zhàn)

證候是對機(jī)體某一時(shí)刻生理病理狀態(tài)的綜合反映，既包含了內(nèi)在因素的變化，如氣血陰陽失調(diào)，又包含了外在因素的影響，如邪氣性質(zhì)，入侵途徑。因此，證候信息的多樣性、復(fù)雜性將證候研究推向一個(gè)至高的難度。首先體現(xiàn)在證是逐漸發(fā)展和轉(zhuǎn)化的，其次證候辨證與醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)以及分析概括水平有關(guān)，最后證不能夠精確定量、定位。進(jìn)行證候代謝組學(xué)研究時(shí)應(yīng)該注意以下問題：

1. 選擇典型病例。入選病例嚴(yán)格按照疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)和中醫(yī)證候辨證標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。建立癥狀體征積分表，保證辨證中的客觀化、標(biāo)準(zhǔn)化。選擇典型證進(jìn)行研究，排除兼雜證的干擾。
2. 大樣本、多中心。為盡可能減少系統(tǒng)誤差，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)采集大樣本量，且在多個(gè)中心收集病例。原則上研究的樣本量是癥狀體征總和的5-10倍。
3. 多組學(xué)相結(jié)合。多組學(xué)相互結(jié)合、相互印證，結(jié)合生物信息學(xué)對研究成果整合分析，共同探索證候物質(zhì)內(nèi)涵。
4. 分子生物學(xué)驗(yàn)證。對研究結(jié)論進(jìn)行分子生物學(xué)驗(yàn)證，充分論證研究結(jié)果。

盡管證候的現(xiàn)代化研究存在很多挑戰(zhàn)，但基于代謝組學(xué)證候研究，已初步顯現(xiàn)出了明顯的優(yōu)勢。目前代謝組學(xué)在寒熱證、腎陽虛與腎陰虛、血瘀證、脾虛證等方面都展開了探索性研究，但是研究深度還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。

隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，代謝組學(xué)勢必將對中醫(yī)藥的現(xiàn)代化研究起到推波助瀾的作用，對推進(jìn)未來中醫(yī)藥現(xiàn)代化的進(jìn)程具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

參考文獻(xiàn)：

1. 王廣基, 查偉斌, 郝海平,等. 代謝組學(xué)技術(shù)在中醫(yī)藥關(guān)鍵科學(xué)問題研究中的應(yīng)用前景分析[J]. Chinese Journal of Natural Medicines中國天然藥物, 2008, 6(2):89-97.
2. Sun S, Dai J, Fang J, Gou X, Cao H, Zheng N, Wang Y, Zhang W, Zhang Y, Jia W, Hu Y. Differences of excess and deficiency zheng in patients with chronichepatitis B by urinary metabonomics. Evid Based Complement Alternat Med.2013;2013:738245. doi: 10.1155/2013/738245. Epub 2013 Apr 24.
3. Dai J, Sun S, Cao J, Zhao Y, Cao H, Zheng N, Fang J, Wang Y, Zhang W, Zhang Y,Hu Y, Cao Z. Similar connotation in chronic hepatitis B and nonalcoholic Fattyliver patients with dampness-heat syndrome. Evid Based Complement Alternat Med.2013;2013:793820. doi: 10.1155/2013/793820. Epub 2013 Apr 8.