單細(xì)胞凝膠電泳（彗星實驗）作為評估DNA損傷的實驗方法一直受到廣泛關(guān)注。從傳統(tǒng)的院校和科研機構(gòu)，到相關(guān)的醫(yī)藥企業(yè)，越來越多的研究者表現(xiàn)了對彗星實驗濃厚的興趣。例如制藥企業(yè)中遺傳毒性藥物的篩選等。

 

任何方式的彗星實驗，都要經(jīng)歷以上幾個實驗步驟。然而，樣品通量低、操作流程費勁是限制該實驗應(yīng)用的主要因素。傳統(tǒng)彗星實驗中，每次一個一個的來測定50個細(xì)胞的DNA損傷程度，相當(dāng)?shù)暮臅r。為了進(jìn)行大批量樣品的DNA損傷檢測，Cleaver Scientific公司與Leicester大學(xué)氧化應(yīng)激小組共同合作研發(fā)的一款新型高通量彗星電泳系統(tǒng)COMPAC-50。Leicester大學(xué)氧化應(yīng)激小組在Scientific Report發(fā)表的一篇文獻(xiàn)中詳細(xì)描述了這種彗星實驗裝置的升級過程，提到新型高通量載玻架和高通量電泳槽對于實驗的極大作用。并表示這種升級極大的提高了待分析樣品的數(shù)量，節(jié)約了實驗時間，減少了操作步驟，降低了試劑需求量和載玻片破損的風(fēng)險。電泳槽設(shè)計緊湊的特點對于工作臺空間不大的實驗室來說是非常有用的。

 

利用一種聚甲醛載物架可以實現(xiàn)同時處理25個彗星試驗載玻片，這種載物架被稱為高通量載玻架（Figure 2A）。這種載玻架可以縱向固定載玻片，并在垂直方向進(jìn)行電泳。較早之前Leicester大學(xué)氧化應(yīng)激小組定制了一臺電泳槽（高通量電泳槽1；Figure 2B），適合用來演示實驗原理，但是要將高通量載玻架縮短才能適應(yīng)電泳槽。電泳槽重新設(shè)計改進(jìn)以后可以容納兩個高通量載玻架（高通量電泳槽2，由英國Cleaver Scientific公司制造生產(chǎn)），并且可以用于后續(xù)其他實驗（Figure 2C，右）。

Figure 2 (A)可以容納25個載玻片的高通量載玻架圖例。染色盒可以用來完成裂解、中和、染色以及所有與清洗有關(guān)的步驟。（B）高通量電泳槽-1和高通量載玻架。高通量電泳槽-1最初是用來演示實驗原理。（C）傳統(tǒng)彗星實驗裝置（左）和新型高通量電泳槽-2（右）的差別圖，圖中兩個裝置共用了一臺電源。

 

該文獻(xiàn)還研究了在高通量載玻架上垂直放置的載玻片電泳對彗星形狀的影響，緩沖液體積對于電泳槽電壓電流的影響以及高通量彗星實驗的濃度應(yīng)激性和重復(fù)性等問題。

結(jié)果表明，利用升級版的高通量彗星電泳系統(tǒng)得到的結(jié)果與傳統(tǒng)ACA實驗沒有明顯的差異性，但是花費的時間節(jié)約了60%，而且凝膠被破壞的風(fēng)險明顯降低了很多。在電源裝置的匹配上，Cleaver Scientific公司生產(chǎn)的電源（型號：CS-300V）在電流電壓配置上也十分適用于這套高通量彗星實驗裝置。

在后來的產(chǎn)品開發(fā)中，Cleaver Scientific公司又進(jìn)一步改進(jìn)實驗裝置，設(shè)計了懸浮的載玻架（Figure 3A），并在整套高通量彗星電泳實驗裝置中配備了染色托盤，用來批量處理載玻片，同時還開發(fā)了陶瓷冷卻底座（Figure 3B）和冷卻包，保證最佳的電泳緩沖液溫度，提高電泳效率。

 

Figure 3 懸浮設(shè)計的載玻架和陶瓷冷卻底座裝置

 

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