美國(guó)伯樂CFX96是一款中高端熒光定量PCR, 越來越多的被國(guó)內(nèi)使用者們采用, 下面是這臺(tái)機(jī)器的中文手冊(cè), 可以打印出來放在機(jī)器邊上方便學(xué)生使用。
CFX96 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀器的操作流程及注意事項(xiàng)
1、開始運(yùn)行儀器
1.1打開電腦
1.2打開定量PCR儀底座開關(guān)
1.3啟動(dòng)CFX Manager軟件
2、放置樣品
2.1將PCR反應(yīng)體系加入到0.2ml底緣八聯(lián)管,蓋上管蓋;或加入底緣96孔板,用光學(xué)級(jí)封膜封好。
注意,必須戴一次性塑料手套,不要讓手指接觸到反應(yīng)管表面。將反應(yīng)管按順序放入儀器的加熱孔中。
3、設(shè)置程序,運(yùn)行試驗(yàn)
3.1定量PCR軟件操作基本步驟為:
a.設(shè)置熱循環(huán)程序文件
(protocol tab)
b.設(shè)置反應(yīng)板文件(plate tab)。
c.點(diǎn)擊"start run"鍵,運(yùn)行程序。
3.2熱循環(huán)程序文件(protocol tab)設(shè)置指南:點(diǎn)擊edit(編輯)或create new(創(chuàng)建新程序)
3.3反應(yīng)板設(shè)置文件(plate tab)設(shè)置指南:選擇本次試驗(yàn)所需要使用的熒光染料種類;單機(jī)樣品類型;如要某些反應(yīng)孔第一熒光染料對(duì)應(yīng)的樣品類型為標(biāo)準(zhǔn)品(standard),點(diǎn)擊‘dilution series’鍵可設(shè)置其標(biāo)準(zhǔn)品濃度及稀釋倍數(shù)。
3.4點(diǎn)擊‘start run’鍵。單擊open lid(打開熱蓋)或close lid(關(guān)閉熱蓋)放置樣品;單擊start run,保存文件,開始運(yùn)行程序。
4、結(jié)果分析
4.1PCR反應(yīng)結(jié)束后,軟件會(huì)自動(dòng)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線和CT值等。
4.2如需進(jìn)行表達(dá)量分析、等位基因分析等,在軟件窗口選擇相應(yīng)分析功能。
4.3點(diǎn)擊右上方的“Report”鍵,還可輸出結(jié)果報(bào)告單。
5、關(guān)閉運(yùn)行儀器
5.1實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取出反應(yīng)管,順序關(guān)閉CFX Manager軟件、定量PCR儀電源,關(guān)閉電腦。
注意!CFX儀器上蓋部分為全自動(dòng)控制,在通電狀態(tài),嚴(yán)禁任何人為干涉上蓋開啟或關(guān)閉的行為,此類行為會(huì)導(dǎo)致上蓋故障,危及儀器使用