(一)凈化工作臺(tái)(Clean Bench)
凈化工作臺(tái)是一種局部層流裝置,能在局部形成高潔度的工作環(huán)境。它由工作臺(tái)、過濾器、風(fēng)機(jī)、靜壓箱和支撐體等組成,采用過濾空氣使工作臺(tái)操作區(qū)達(dá)到凈化除菌的目的。室內(nèi)空氣經(jīng)預(yù)過濾器和高效過濾除塵后以垂直或水平層流狀態(tài)通過工作臺(tái)的操作區(qū),由于空氣沒有渦流,所以,任何一點(diǎn)灰塵或附著在灰塵上的雜菌都能被排除,不易向別處擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。因此,可使操作區(qū)保持無(wú)菌狀態(tài)。
與無(wú)菌室和接種箱比較,使用凈化工作臺(tái)具有工作條件好、操作方便、無(wú)菌效果可靠、無(wú)消毒藥劑對(duì)人體危害、占用面積小且可移動(dòng)等優(yōu)點(diǎn)。如果放在無(wú)菌室內(nèi)使用,無(wú)菌效果更好。其缺點(diǎn)是價(jià)格昂貴,預(yù)過濾器和高效過濾器還需要定期清洗和更換。
(二)微生物發(fā)酵罐(Microbial fermentor)進(jìn)行微生物深層培養(yǎng)的設(shè)備統(tǒng)稱發(fā)酵罐。一個(gè)優(yōu)良的發(fā)酵裝置應(yīng)具有嚴(yán)密的結(jié)構(gòu),良好的液體混和性能,較高的傳質(zhì)、傳熱速率,同時(shí)還應(yīng)具有配套而又可靠的檢測(cè)及控制儀表。由于微生物有好氧與厭氧之分,所以其培養(yǎng)裝置也相應(yīng)地分為好氧發(fā)酵設(shè)備與厭氧發(fā)酵設(shè)備。對(duì)于好氧微生物,發(fā)酵罐通常采用通氣和攪拌來(lái)增加氧的溶解,以滿足其代謝需要。根據(jù)攪拌方式的不同,好氧發(fā)酵設(shè)備又可分為機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐和通風(fēng)攪拌式發(fā)酵罐。
機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐是發(fā)酵工廠常用類型之一。它是利用機(jī)械攪拌器的作用,使空氣和發(fā)酵液充分混合,促進(jìn)氧的溶解,以保證供給微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝所需的溶解氧。比較典型的是通用式發(fā)酵罐和自吸式發(fā)酵罐。
(三)高壓蒸汽滅菌鍋(High-Pressure Steam Sterilization Pot)
高壓蒸汽滅菌鍋是一個(gè)密閉的、可以耐受一定壓力的雙層金屬鍋。鍋底或夾層內(nèi)盛水,當(dāng)水在鍋內(nèi)沸騰時(shí)由于蒸汽不能逸出,使鍋內(nèi)壓力逐漸升高,水的沸點(diǎn)和溫度可隨之升高,從而達(dá)到高溫滅菌的目的。一般在0.11MPa的壓力下,121℃滅菌20~30min,包括芽孢在內(nèi)的所有微生物均可被殺死。如果滅菌物品體積較大,蒸汽穿透困難,可以適當(dāng)提高蒸汽壓力或延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。
高壓滅菌鍋有臥式、立式、手提式等多種類型,在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,最為常用的是手提式和立式高壓蒸汽滅菌鍋。和常壓滅菌鍋相比,高壓滅菌鍋的優(yōu)點(diǎn)是滅菌所需的時(shí)間短、節(jié)約燃料、滅菌徹底等。其缺點(diǎn)是價(jià)格昂貴,滅菌容量較小。
(四)培養(yǎng)箱(CultureBox)
培養(yǎng)箱是培養(yǎng)微生物的專用設(shè)備。制熱式培養(yǎng)箱是由電爐絲和溫度控制儀合成的固定體積的恒溫培養(yǎng)裝置,大小規(guī)格不一。微生物實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)箱工作容積有450×450×350mm3或650×500×500mm3,適用于室溫至60℃之間的各類微生物培養(yǎng)。目前,隨著科學(xué)水平的發(fā)展,培養(yǎng)箱設(shè)備的完善程度和價(jià)格有很大差別。有各種結(jié)構(gòu)合理、功能齊全的培養(yǎng)箱,如恒溫培養(yǎng)箱、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、低溫培養(yǎng)箱、微生物多用培養(yǎng)箱和二氧化碳培養(yǎng)箱等。有的用計(jì)算機(jī)控制,可選擇多條時(shí)間線變換溫差,從而克服了環(huán)境溫度的影響,一年四季均能達(dá)到培養(yǎng)要求的溫度。
微生物多用培養(yǎng)箱是集加熱、制冷和振蕩于一體的微生物液體發(fā)酵裝置。工作室的溫度在15~50℃范圍內(nèi)任意選定,選定后經(jīng)溫控儀自動(dòng)控制,保持工作室內(nèi)恒溫。同時(shí)設(shè)有可控硅調(diào)速系統(tǒng),振蕩機(jī)轉(zhuǎn)速可在1~220rpm范圍內(nèi)任意調(diào)控。
(五)干燥箱(DryingBox)
干燥箱是用于除去潮濕物料內(nèi)及器皿內(nèi)外水分或其它揮發(fā)性溶液的設(shè)備。類型很多,有箱式、滾筒式、套間式、回轉(zhuǎn)式等。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室多用箱式干燥箱,大小規(guī)格不一。工作室內(nèi)配有可活動(dòng)的鐵絲網(wǎng)板,便于放置被干燥的物品。制熱升溫式干燥箱也是有電爐絲和溫度控制儀組成,可調(diào)節(jié)溫度從室溫至300℃任意選擇。有的干燥箱采用導(dǎo)電溫度計(jì)為敏感元件,配合晶體管和繼電器組成自動(dòng)控制系統(tǒng),克服了金屬管型熱膨脹控制的缺點(diǎn)。
此外,還有真空干燥箱(配有真空泵和氣壓表),可在常壓或減壓下操作。
(六)搖床(ShakingBed)
搖床又稱搖瓶機(jī),它是培養(yǎng)好氣性微生物的小型試驗(yàn)設(shè)備或作為種子擴(kuò)大培養(yǎng)之用,常用的搖床有往復(fù)式和旋轉(zhuǎn)式兩種。往復(fù)式搖床的往復(fù)頻率一般在80~140次/min,沖程一般為5~14cm,如頻率過快、沖程過大或瓶?jī)?nèi)液體裝量過多,在搖動(dòng)時(shí)液體會(huì)濺到包扎瓶口的紗布或棉塞上,導(dǎo)致雜菌污染,特別是啟動(dòng)時(shí)更容易發(fā)生這種情況。
旋轉(zhuǎn)式搖床的偏心距一般在3~6cm之間,旋轉(zhuǎn)次數(shù)為60~300rpm。
放在搖床上的培養(yǎng)瓶(一般為三角瓶)中的發(fā)酵液所需要的氧是由空氣經(jīng)瓶口包扎的紗布(一般8層)或棉塞通入的,所以氧的傳遞與瓶口的大小、瓶口的幾何形狀、棉塞或紗布的厚度和密度有關(guān)。在通常情況下,搖瓶的氧吸收系數(shù)取決于搖床的特性和三角瓶的裝樣量。
往復(fù)式搖床是利用曲柄原理帶動(dòng)搖床作往復(fù)運(yùn)動(dòng),機(jī)身為鐵制或木制的長(zhǎng)方框子,有一層至三層托盤,托盤上有圓孔備放培養(yǎng)瓶,孔中凸出一個(gè)三角形橡皮,用以固定培養(yǎng)瓶并減少瓶的振動(dòng),傳動(dòng)機(jī)構(gòu)一般采用二級(jí)皮帶輪減速,調(diào)換調(diào)速皮帶輪可改變往復(fù)頻率。偏心輪上開有不同的偏心孔,以便調(diào)節(jié)偏心距。往復(fù)式搖床的頻率和偏心距的大小對(duì)氧的吸收有明顯的影響。
旋轉(zhuǎn)式搖床是利用旋轉(zhuǎn)的偏心軸使托盤擺動(dòng),托盤有一層或兩層,可用不銹鋼板、鋁板或木制板制造。在三個(gè)偏心軸上裝有螺栓可調(diào)節(jié)上下,使托盤保持水平。這種搖床結(jié)構(gòu)復(fù)雜,造價(jià)高。其優(yōu)點(diǎn)是氧的傳遞較好、功率消耗小、培養(yǎng)基不會(huì)濺到瓶口的紗布上。
(七)顯微鏡(Microscope)
微生物個(gè)體微小,必須借助顯微鏡才能觀察清楚它們的個(gè)體形態(tài)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)。因此,在微生物學(xué)的各項(xiàng)研究中,顯微鏡就成為不可缺少的工具。
顯微鏡的種類很多,根據(jù)其結(jié)構(gòu),可以分為光學(xué)顯微鏡和非光學(xué)顯微鏡兩大類。光學(xué)顯微鏡又可分為單式顯微鏡和復(fù)式顯微鏡。最簡(jiǎn)單的單式顯微鏡即放大鏡(放大倍數(shù)常在10倍左右),構(gòu)造復(fù)雜的單式顯微鏡為解剖顯微鏡(放大倍數(shù)在200左右)。在微生物學(xué)的研究中,主要是復(fù)式顯微鏡。其中以普通光學(xué)顯微鏡(明視野顯微鏡)最為常用。此外,還有暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡、偏光顯微鏡、紫外光顯微鏡和倒置顯微鏡等。非光學(xué)顯微鏡為電子顯微鏡。
(八)接種箱(Clean Box)
接種箱分為固體菌種接種箱和液體菌種接種箱兩種。固體菌種接種箱是一個(gè)用木料和玻璃制成或由有機(jī)玻璃焊接而成的密閉小箱。又分為雙人和單人操作箱。箱體可大可小,一般箱體長(zhǎng)約143cm,寬86cm,總高154cm,支架76cm。箱的上部左右兩側(cè)各裝有兩扇能啟閉的玻璃推拉門,方便菌種進(jìn)出。窗的下部分別設(shè)有兩個(gè)直徑約13cm的圓洞,兩洞的中心距離為52cm(同肩寬),洞口裝有帶松緊帶的袖套,以防雙手在箱內(nèi)操作時(shí),外界空氣進(jìn)入箱內(nèi)造成污染。操作時(shí)兩人相對(duì)而坐,雙手通過袖套伸入箱內(nèi)。箱兩側(cè)最好也裝上玻璃,箱頂部為木板或玻璃。箱內(nèi)頂部裝有紫外線殺菌燈和照明用日光燈各一支。箱體安裝木板或玻璃均可,但要注意密封。
液體菌種接種箱是專為移接液體菌種而設(shè)計(jì)的。比固體菌種箱窄長(zhǎng),單側(cè)兩人操作。內(nèi)設(shè)軌道和紫外線燈,箱兩端開有高25cm,寬10cm的長(zhǎng)方形出口,方便菌種進(jìn)出,洞口設(shè)有小推門。進(jìn)出口下處設(shè)蒸汽源,接種時(shí)用蒸汽封住進(jìn)出口,以防雜菌進(jìn)入箱內(nèi)。箱背面設(shè)有液體菌種移接管能進(jìn)入的小孔。
接種箱滅菌時(shí),用紫外線照射30min。如果沒有紫外線燈,可用甲醛和高錳酸鉀(甲醛10~14mL/m3+高錳酸鉀5~7g/m3空間)熏蒸30min以上。使用時(shí),先將所需物品和工具放入接種箱內(nèi),然后進(jìn)行藥劑熏蒸和紫外線滅菌,再按無(wú)菌操作進(jìn)行接種。
接種箱的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,造價(jià)低廉,易消毒滅菌,操作方便,而且人在箱外操作,氣溫較高時(shí)也能作業(yè)。缺點(diǎn)是進(jìn)出培養(yǎng)基費(fèi)工費(fèi)時(shí),每次接種前都需要進(jìn)行滅菌。
(九)冰箱
微生物實(shí)驗(yàn)室的冰箱主要有兩種:普通冰箱和低溫冷凍冰箱。普通冰箱一般都具有兩個(gè)柜子,即鮮藏柜和冷藏柜,溫度分別為4℃和-20℃;低溫冷凍冰箱溫度一般控制在-40~-80℃。它們都可以用于微生物菌種保藏。鮮藏柜常用于保存斜面菌種,保藏時(shí)間在3個(gè)月左右。超過3個(gè)月,斜面就會(huì)變干,因此需要轉(zhuǎn)接菌種。如果要長(zhǎng)時(shí)間保存菌種,則需要經(jīng)過處理后,貯藏于普通冰箱的冷藏柜或低溫冷凍冰箱中,它們的保藏時(shí)間較長(zhǎng),一般都在1年以上。