幫助使用者快速尋找樣品和調(diào)節(jié)焦距

高速成像所帶來的第一個好處就是尋找樣品更加方便。在相機的成像速度還很緩慢的“舊ccd時代”，為了快速調(diào)節(jié)焦平面位置和尋找合適拍攝的樣品，實驗人員必須直接在目鏡下進行觀察。對于明場成像來說這并不困難，但是一些熒光信號可能弱到在目鏡下無法直接觀察，這就給實驗人員帶來了操作上的不便。

flash4.0的高靈敏度使得在弱熒光下相機仍然能用低曝光時間對樣品進行成像，實驗人員可以在顯示屏上直接觀察鏡下樣品，無“延遲”地調(diào)節(jié)載物臺位置和圖像焦距，在合理的情況下大幅度降低激發(fā)的熒光功率，使光毒性降到最低。

這種特性使其在一些特殊應(yīng)用中發(fā)揮著獨特的作用。例如膜片鉗這種需要盡可能避免機械震動的應(yīng)用，高速相機使得在顯示屏上實時用玻璃電極對神經(jīng)元進行顯微操作成為可能（以避免肉眼在目鏡下觀察所帶來的震動）。

應(yīng)用條件：無延遲的實時顯示需要30fps以上的相機

產(chǎn)品型號推薦： flash4.0 lt+/flash4.0 lt

捕捉高速運動的生物樣品 

一些生物樣品在觀察的過程中會發(fā)生快速的位移變化，有時需要對這些快速位移的樣品進行細節(jié)上的記錄，這時相機能夠達到的幀速越快，對這些位移細節(jié)的刻畫就越清晰。

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小鼠心肌細胞搏動高速成像 100幀/秒   原速

應(yīng)用條件：明場高速成像只需要高速的scmos相機，心臟相關(guān)的成像速度一般在100fps以上。

產(chǎn)品型號推薦：  flash4.0 lt+ / flash4.0 lt

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斑馬魚血管高速熒光成像 400幀/秒 放慢20倍    

應(yīng)用條件：熒光高速成像需要高靈敏和高速同時具備的scmos相機，快速流動的熒光標記物的觀察需要200fps以上，且相機qe需80%以上。

產(chǎn)品型號推薦： flash4.0 v3

捕捉熒光信號的快速變化 

很多生理生化過程伴隨著熒光信號的快速變化。對于這些快速變化的信號，有時單憑肉眼都無法辨別，此時通過flash4.0的高速成像卻能夠很好的捕捉到這些信息。

神經(jīng)元膜電位的超高速熒光成像

應(yīng)用條件：膜電位高速成像作為一種特殊應(yīng)用，只能用sCMOS相機，快速流動的熒光標記物的觀察需要200fps以上，且相機QE需80%以上

產(chǎn)品型號推薦：  Flash4.0 V3

在上圖中，肉眼是看不到神經(jīng)元胞體因膜電位變化而產(chǎn)生的熒光信號變化的；但是在高速成像下經(jīng)過對圖片灰度的時間分析，就能看到1ms時間尺度內(nèi)熒光的快速變化了。

另外一些肉眼可以觀察到的變化，通過高速成像則能夠更好的研究其信號隨時間的變化過程。例如鈣離子熒光染料或熒光蛋白（fluo-4、gcamp等），其熒光強度會隨鈣離子濃度的升高而升高。

心肌細胞鈣離子濃度隨時間的變化 200幀/秒 放慢10倍

應(yīng)用條件： 熒光高速成像需要高靈敏和高速同時具備的scmos相機，鈣波與鈣火花的觀察需要200fps以上，且相機qe需80%以上。

產(chǎn)品型號推薦：  flash4.0 v3 / flash4.0 lt+                                              

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與下游效應(yīng)記錄 

flash4.0的高速還能夠在毫秒級別以下記錄到生物信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)與細胞產(chǎn)生的下游效應(yīng)。

例如在下面的例子中，對細胞鈣離子信號和細胞收縮舒張的明場相差進行同步成像后，定量分析圖像的灰度變化可以得到兩個事件的時間信息。比較兩個時間曲線我們能夠看到，鈣離子信號先發(fā)生變化，之后細胞才發(fā)生收縮形變，兩者之間的時間差即為鈣離子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)時間。

ips誘導(dǎo)分化的類心肌細胞搏動與鈣信號變化

應(yīng)用條件： 熒光高速成像配合明場進行同步成像，需要高靈敏和高速同時具備的scmos相機，并搭配雙色分光器組件，機需要200fps以上，相機qe需80%以上。

產(chǎn)品型號推薦：  flash4.0 v3/ flash4.0 lt+   +  w-view gemini                         

配合高端成像方法的應(yīng)用

迅速發(fā)展的顯微成像技術(shù)正對光探測器的性能不斷提出新的要求。在對厚樣品的深度成像或是對亞細胞結(jié)構(gòu)的超分辨成像中，flash4.0相機都以其優(yōu)越的性能在成像探測器領(lǐng)域占有一席之地。

1、light-sheet光片照明因其可與激光共聚焦相媲美的z軸分辨率和比激光共聚焦更快的成像速度在一些模式動物器官和胚胎的活體成像中的具有顯著優(yōu)勢。flash4.0相機的高幀速成像能力配合片狀光的掃描能夠?qū)崿F(xiàn)迅速對厚樣品進行z-stack掃描成像，并重建其3d結(jié)構(gòu)。這種方法特別適合拍攝組織器官高速變化的情況（如心臟跳動）。

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2、spinning disk共聚焦作為一種很成熟的共聚焦成像手段，能夠提供點掃描共聚焦無法比擬的高速成像能力。這一高速成像能力除了要歸功于nipkow轉(zhuǎn)盤帶來的多針孔外，還需要scmos的高速拍攝性能相配合，從而在video-rate下得到與點掃描共聚焦相當?shù)母叻直鎴D片。

3、超分辨成像技術(shù)近幾年取得的極大突破使得人類打破可見光的衍射極限，將可見光波段的細胞亞顯微結(jié)構(gòu)分辨率提高到了與電鏡相當?shù)乃�平�?/P>

在各類超分辨技術(shù)中，flash4.0的高速和高分辨率芯片很適合用于一大類稱為smsn(single-molecular switching nanoscopy) 的超分辨成像中（包括我們熟知的strom和palm）。通過短時間內(nèi)的隨機單分子熒光開-關(guān)，最終在毫秒級的時間尺度下形成一幅超分辨圖像。而正是flash4.0的高速和高靈敏度，能使得實驗者使用更高的頻率來隨機激發(fā)單分子熒光開關(guān)，從而縮短整個系統(tǒng)的成像時間。

附：flash4.0相機的幀速與roi大小的關(guān)系

好了~flash 4.0相機君的講解就到這里了，因為平臺視頻限制原因，可能會有，想看原視頻的小伙伴，可以掃描二維碼看原文哈~