研磨動(dòng)物組織時(shí)你有遇到過(guò)這些問(wèn)題嗎?301醫(yī)院為您示范
實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院(301醫(yī)院)
試驗(yàn)樣品:幼豬心、肝、脾、肺、腎、腦6個(gè)部位的組織
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/STRONG>藥物代謝測(cè)定分析
研磨步驟:
1、取出置于-20℃冰箱內(nèi)的幼豬心、肝、脾、肺、腎、腦組織樣品略解凍,每個(gè)部位的樣品各取2份為一組對(duì)照,切成小塊后分別置于2ml離心管內(nèi),編號(hào)并放進(jìn)冰盒中。
2、每次研磨將以對(duì)照組為單位進(jìn)行。以脾臟研磨為例:將2份脾臟組織樣品分別轉(zhuǎn)移至2個(gè)鼎昊源TL1000小型組織研磨儀配套的5ml硬質(zhì)塑料研磨管中,每管各加入8mm不銹鋼珠1顆,其中一管加入1ml磷酸鹽組織液,另一管加入1ml醋酸銨組織液,蓋好管蓋,安裝上機(jī);
3、采用自動(dòng)間歇研磨方法,2000rpm,設(shè)置2個(gè)循環(huán),每個(gè)循環(huán)60s,循環(huán)間隔10s,研磨完成后用吸管轉(zhuǎn)移回之前對(duì)應(yīng)編號(hào)的2ml離心管中;
4、由于各內(nèi)臟組織樣品的韌性不同,針對(duì)肝和腦組織的研磨,采用僅一次研磨90s的方法,使研磨時(shí)間被縮短,但研磨效果仍然很好;針對(duì)心臟組織的研磨,采用了鼎昊源TL1000小型組織研磨儀配套的不銹鋼研磨罐,使研磨更加勻細(xì)。