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如何有效分離提取cfDNA用于檢測?

瀏覽次數(shù):10231 發(fā)布日期:2016-5-26 

說起腫瘤、癌癥,已經(jīng)不再像多年前一樣讓談癌色變,但仍舊為人們所恐懼。成功治療腫瘤還是以早發(fā)現(xiàn)早治療為主。那么盡早檢測和發(fā)現(xiàn)腫瘤便是首當(dāng)其沖的核心。液體活檢(Liquid biopsy)的檢測方法,可以捕獲到進(jìn)入血液的其它細(xì)胞或DNA,從而替代了疾病的診斷,例如腫瘤。最近比較火熱的液體活檢有:cfDNA(Circulating cell-free DNA)、CTC和外泌體的檢測。

對于CTC和外泌體的信息,我們已發(fā)表過2篇文章描述,欲知詳情,請瀏覽:

游離循環(huán)DNA(cfDNA)存在于血液,包含雙鏈DNA片段,絕大多數(shù)是短鏈,而且通常濃度很低。在健康人體中,血漿cfDNA被認(rèn)為來自于正常的造血細(xì)胞。cfDNA的循環(huán)半衰期很短,這提示它需要在細(xì)胞凋亡時(shí)被持續(xù)的釋放。在特定的生理?xiàng)l件或疾病過程中,有相當(dāng)一部分cfDNA會與在健康的時(shí)候不同,基于這一結(jié)果,近年來cfDNA已被用于無創(chuàng)性診斷。在孕婦中,約有10%-15%的cfDNA來自于胎盤滋養(yǎng)層,現(xiàn)在cfDNA多用于在高危孕婦中篩查胎兒的遺傳缺陷,這就是是當(dāng)前火熱的無創(chuàng)唐氏篩查的基礎(chǔ)!在腫瘤病人中,通過cfDNA的量化突變來檢測腫瘤已被越來越多的人認(rèn)可。而在移植方面,移植排斥反應(yīng)也與供體移植器官中的cfDNA水平相關(guān)。

Figure.2 血液中的復(fù)雜組分

而循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)是來源于腫瘤細(xì)胞的cfDNA,屬于cfDNA的一種類型。兩者為包含關(guān)系,ctDNA僅為cfDNA很小的一部分。ctDNA來自腫瘤細(xì)胞的體細(xì)胞突變,不同于遺傳突變的是其存在于體內(nèi)每個(gè)細(xì)胞。往往在提到循環(huán)腫瘤DNA的時(shí)候,大家往往簡單的將它認(rèn)為是腫瘤患者外周血中游離的DNA。其實(shí)不然,雖然ctDNA所占cfDNA的比例波動范圍非常大,約0.01%~90%,但實(shí)際上,大多數(shù)ctDNA在cfDNA中的占比約為0.2%。

如何有效分離提取cfDNA(ctDNA)用于檢測,已成為科研工作者必須突破的問題!

作為全球領(lǐng)先的創(chuàng)新技術(shù)和表觀遺傳學(xué)相關(guān)研究產(chǎn)品的開發(fā)商和供應(yīng)商,Epigentek公司為此潛心研發(fā),終推出市場上罕有的游離循環(huán)DNA分離提取試劑盒:EpiQuik Circulating Cell-Free DNA Isolation Kit (貨號:P-1064),助您在腫瘤研究領(lǐng)域快人一步!

本試劑盒利用基于磁珠的分級篩選專利技術(shù),從血清/血漿樣品中分離出單核小體和二核小體復(fù)合體,通過消化使其釋放DNA,從而提取游離循環(huán)DNA(cfDNA)。

產(chǎn)品名稱及描述 品牌 貨號 產(chǎn)品說明
EpiQuik Circulating Cell-Free DNA Isolation Kit Epigentek P-1064 詳情

*本試劑盒需配套磁力板,推薦的配套產(chǎn)品為:Q10002-1

試劑盒卓越的優(yōu)勢:

  • 利用基于磁珠的分級篩選專利技術(shù),確保cfDNA的有效提取,片段長度主要在170bp
  • 快速直接的實(shí)驗(yàn)流程,全程僅需2小時(shí)。同時(shí)無需跑膠,過柱或者離心操作
  • 產(chǎn)品純度高,有效避免了蛋白質(zhì)、鹽、核酸酶、PCR抑制因子以及其它雜志
  • 靈敏而高效的DNA捕獲技術(shù),確保最低80%的DNA提取效率
  • 靈活的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需求,可適用于高通量研究

 

Figure.3 簡便的實(shí)驗(yàn)流程 & 可靠的提取效果

Epigentek集團(tuán)公司是全球領(lǐng)先的創(chuàng)新技術(shù)和表觀遺傳學(xué)相關(guān)研究產(chǎn)品的開發(fā)商和供應(yīng)商。公司開發(fā)了包括400多個(gè)專利產(chǎn)品的全面的產(chǎn)品組合,為表觀遺傳學(xué)方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案。作為Epigentek集團(tuán)中國區(qū)域的總代理,艾美捷將其引入中國,作為其中國區(qū)域代理,將為客戶提供完整的表觀遺傳解決方案,產(chǎn)品包括表觀遺傳研究用分析試劑盒抗體以及相關(guān)的抑制劑/拮抗劑等產(chǎn)品。同時(shí)我們作為多家國際知名品牌的的中國代理或區(qū)域代理,艾美捷能為您提供系列的實(shí)驗(yàn)室解決方案。如果您對上述產(chǎn)品感興趣,請致電免費(fèi)客戶專線400-6800-868艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案。

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