實(shí)驗(yàn)動物體液采集方法

一、 血液的采集
常用的采血方法有割（剪）尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈（動脈）采血、股動脈（靜脈）采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈采血、后肢小靜脈采血等。

二、 尿液的采集
實(shí)驗(yàn)動物的尿液常用代謝籠采集，也可通過其他裝置來采集。

（一）、用代謝籠采集尿液

代謝籠用于收集實(shí)驗(yàn)動物自然排出的尿液，是一種特別設(shè)計(jì)的為采集實(shí)驗(yàn)動物各種排泄物的密封式飼養(yǎng)籠，有的代謝籠除可收集尿液外，又可收集糞便和動物呼出的CO2。一般簡單的代謝籠主要用來收集尿液。防在代謝籠內(nèi)飼養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)動物，可通過其特殊裝置收集尿液。

（二）、導(dǎo)尿法收集尿液

施行導(dǎo)尿術(shù)，較適宜于犬、猴等大動物。一般不需要麻醉，導(dǎo)尿時(shí)將實(shí)驗(yàn)動物仰臥固定，用甘油潤滑導(dǎo)尿管。對雄性動物，操作員用一只手握住陰莖，另一只手將陰莖包皮向下，暴露龜頭，使尿道口張開，將導(dǎo)尿管緩慢插入，導(dǎo)尿管推進(jìn)到尿道膜部時(shí)有抵抗感，此時(shí)注意動作輕柔，繼續(xù)向膀胱推進(jìn)導(dǎo)尿管，即有尿液流出。雌性動物尿道外口在陰道前庭，導(dǎo)尿時(shí)于陰道前庭腹側(cè)將導(dǎo)尿管插入陰道外口，其后操作同雄性動物導(dǎo)尿術(shù)。
用導(dǎo)尿法導(dǎo)尿可采集到?jīng)]有污染的尿液。如果嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，可收集到無菌尿液。

（三）輸尿管插管采集尿液

一般用于要求精確計(jì)量單位時(shí)間內(nèi)實(shí)驗(yàn)動物排尿量的實(shí)驗(yàn)。剖腹后，將膀胱牽拉至腹腔外，暴露膀胱底兩側(cè)的輸尿管。在兩側(cè)輸尿管近膀胱處用線分別結(jié)扎，于輸尿管結(jié)扎處上方剪一小口，向腎臟方向分別插入充滿生理鹽水的插管，用線結(jié)扎固定插管，即可見尿液從插管滴出，可以收集。采尿過程中要用38℃熱生理鹽水紗布遮蓋切口及膀胱。

（四）壓迫膀胱采集尿液

實(shí)驗(yàn)人員用手在實(shí)驗(yàn)動物下腹部加壓，手法既輕柔又有力。當(dāng)增加的壓力使實(shí)驗(yàn)動物膀胱括約肌松弛時(shí)，尿液會自動流出，即行收集。

（五）穿刺膀胱采集尿液

實(shí)驗(yàn)動物麻醉固定后，剪去下腹部恥骨聯(lián)合之上，腹正中線兩側(cè)的被毛，消毒后用注射針頭接注射器穿刺。取鈍角進(jìn)針，針頭穿過皮膚后稍微改變角度，以避免穿刺后漏尿，然后刺向膀胱方向，邊緩慢進(jìn)針邊回抽，直到抽到尿液為止。

（六）剖腹采集尿液

按上述穿刺膀胱采集尿液法做術(shù)前準(zhǔn)備，其皮膚準(zhǔn)備范圍應(yīng)更大。剖腹暴露膀胱，直視下穿刺膀胱抽取尿液。也可于穿刺前用無齒鑷夾住部分膀胱壁，從鑷子下方的膀胱壁進(jìn)針抽尿。

（七）提鼠采集尿液

鼠類被人抓住尾巴提起即出現(xiàn)排尿反射，以小鼠的這種反射最明顯�？梢岳�用這一反射收集尿液。當(dāng)鼠類被提起尾巴排尿后，尿滴掛在尿道外口附近的被毛上，不會馬上流走，操作人員應(yīng)迅速用吸管或玻璃管接住尿滴。

三、 胸水和腹水的采集

（一）胸水的采集
主要采用胸腔穿刺法收集實(shí)驗(yàn)動物的胸水，也可處死實(shí)驗(yàn)動物剖開胸腔采集胸水。

1. 穿刺點(diǎn)定位
于實(shí)驗(yàn)動物腋后線第11~12肋間隙穿刺，穿刺針緊貼肋骨上緣，否則容易損傷肋間神經(jīng)。也可在胸壁近胸骨左側(cè)緣第4~5肋間隙穿刺。

2. 穿刺方法
實(shí)驗(yàn)動物取立位或半臥位固定，局部皮膚去毛、消毒、麻醉，穿刺針頭與注射器之間接三通連接裝置，實(shí)驗(yàn)人員以左手拇指、食指繃緊局部皮膚，右手握穿刺針緊靠肋骨下緣處垂直進(jìn)針，穿刺肋間肌時(shí)產(chǎn)生一定阻力，當(dāng)阻力消失有落空感時(shí)，說明已刺入胸膜腔，用左手固定穿刺針，打開三通連接裝置，緩慢抽取胸水。

（二）腹水的采集
實(shí)驗(yàn)動物被固定于站立位。局部皮膚去毛、消毒、麻醉。用無菌止血鉗小心提起皮膚，右手持小針頭或穿刺套管針沿下腹部靠腹壁正中線處輕輕垂直刺入，注意不可刺入太深，以免損傷內(nèi)臟，針頭有落空感后，說明穿刺針已

四、 分泌液的采集

（一）陰道分泌物的采集
適于觀察陰道角質(zhì)化上皮細(xì)胞。

1. 滴管沖洗法
用消毒滴管吸取少量生理鹽水仔細(xì)、反復(fù)沖洗被檢雌性動物陰道，將沖洗液吸出滴在載波片上晾干后染色鏡檢。也可直接將沖洗液置于低倍顯微鏡下觀察，根據(jù)細(xì)胞類型變化鑒別實(shí)驗(yàn)動物動情周期中的不同時(shí)期。

2. 檫拭法
用生理鹽水將消毒棉拭子濕潤后，擠干棉拭子上的生理鹽水，輕輕插入雌性動物陰道內(nèi)，沿陰道內(nèi)壁檫拭、轉(zhuǎn)動，然后取出并作陰道涂片，進(jìn)行鏡檢。

（二）精液的采集

1. 人工陰道套采精液法
本法適用于犬、豬、羊等大動物，采用特制的人工陰道套套在實(shí)驗(yàn)動物陰莖上采集精液。采精時(shí)，一手捏住陰道套，套住雄性動物的陰莖，以完全套住雄性動物的陰莖為佳，插入陰道套后，若實(shí)驗(yàn)動物發(fā)出低叫聲，表明已經(jīng)射精。此時(shí)可取下陰道套，拆下采精瓶，取出精液，迅速做有關(guān)檢查。

2.陰道栓采精法
本法是將陰道栓涂片染色，鏡檢凝固的精液。陰道栓是雄性大、小鼠的精液和雌性陰道分泌物混合，在雌鼠陰道內(nèi)凝結(jié)而成白色稍透明、圓錐形的栓狀物，一般交配后2~4小時(shí)即可在雌鼠陰道口形成，并可在陰道停留12~24小時(shí)。

3.其他采精液法
用電流等物理方法刺激雄性動物的陰莖或其他性敏感區(qū)，使雄性動物被刺激發(fā)情，直至射精，用采精瓶采集射出的精液。

（三）乳汁的采集

用按摩擠奶收集乳汁的方法適合犬、豬、羊等大動物乳汁的采集。選用哺乳期的實(shí)驗(yàn)動物，在早上采集乳汁量最多，用手指輕輕按摩實(shí)驗(yàn)動物乳頭，使乳汁自然流出，如乳汁不能自然流出，可張開手掌從乳房基底部朝乳頭方向按摩、擠呀整個(gè)乳房，即可擠出乳汁。

五、 骨髓的采集

采集骨髓一般選擇胸骨、肋骨、髁骨、脛骨和股骨等造血功能活躍的骨組織。猴、犬、羊等大動物骨髓的采集用活體穿刺取骨髓的方法；大、小鼠等小動物骨頭小難穿刺，只能剖殺后采胸骨、股骨的骨髓。

（一）猴、犬、羊等的骨髓采集法

1. 骨髓穿刺點(diǎn)定位
（1）胸骨：穿刺部位在胸骨中線，胸骨體與胸骨柄連接處，或選胸骨上1/3部。
（2）脛骨：穿刺部位在脛骨內(nèi)側(cè)，脛骨上端的下方1厘米處。
（3）肋骨：穿刺部位在第5~7肋骨各自的中點(diǎn)上。
（4）髁骨：穿刺部位在髁前上棘后2~3厘米的髁嵴。
（5）股骨：穿刺部位在股骨內(nèi)側(cè)面，靠下端的凹面處。

2. 骨髓穿刺方法
（1）實(shí)驗(yàn)動物按要求固定，穿刺部位去毛、消毒、麻醉，要求局部麻醉范圍直達(dá)骨膜，也可作全麻。
（2）操作人員帶消毒手套，確定穿刺點(diǎn)，估計(jì)從皮膚到骨髓的距離并依此固定骨髓穿刺針長度。左手拇、食指繃緊穿刺點(diǎn)周圍皮膚，右手持穿刺針在穿刺點(diǎn)垂直進(jìn)針，小弧度左右旋轉(zhuǎn)鉆入，當(dāng)有落空感時(shí)表示針尖已進(jìn)入骨髓腔。用左手固定穿刺針，右手抽出針芯，連接注射器緩慢抽吸骨髓組織，當(dāng)注射器內(nèi)抽到少許骨髓時(shí)立即停止抽吸，取出注射器將骨髓推注到載玻片上，迅速涂片數(shù)張，以備染色鏡檢。
（3）左手壓住穿刺點(diǎn)周圍皮膚，迅速拔出穿刺針，用棉球壓迫數(shù)分鐘。如穿刺的是肋骨，除壓迫止血外，還需膠布封貼穿刺點(diǎn)，防止發(fā)生氣胸。

（二）大鼠、小鼠的骨髓采集法
將實(shí)驗(yàn)動物剖殺、固定，解剖取出股骨或胸骨，于第三胸骨節(jié)處剪斷，將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的試管內(nèi)或玻片上，繼而涂片、染色、鏡檢。