孔洞實(shí)驗(yàn)/孔板實(shí)驗(yàn)/洞板實(shí)驗(yàn)(the holeboard test)
一.基本原理
孔板實(shí)驗(yàn)是Boissiex和Simon1962年首次建立的,此后被廣泛用于藥效研究。該實(shí)驗(yàn)是利用新奇(curiosity)和恐懼(fear)兩個(gè)因素來(lái)控制動(dòng)物在新環(huán)境下的行為,用逃避(escapes) 來(lái)反映這兩個(gè)因素的作用結(jié)果。動(dòng)物反復(fù)鉆頭(head一dipping)反映其新奇感和對(duì)逃避的渴望。一般認(rèn)為,藥物在不影響動(dòng)物運(yùn)動(dòng)活性的劑量下,增加鉆頭次數(shù)和時(shí)間,表現(xiàn)為抗焦慮作用,減少鉆頭次數(shù)和時(shí)間則為致焦慮作用。
二.操作步驟
大鼠和小鼠的實(shí)驗(yàn)裝置有所不同。大鼠裝置為一個(gè)66cm x 56cm x 47cm的木箱,底板有4個(gè)直徑為3 . 8cm、深1 cm的等大圓孔,其中兩孔離最近壁14cm,另兩孔17cm,孔板水平抬高12em;小鼠木箱為44cm x 40cm x 27cm , 4個(gè)孔的孔徑均為3cm,厚1. 8cm,每孔中心離最近壁的距離為l0cm。 80年代之后,孔板箱壁及每一孔周邊都裝有紅外光電管,并與微機(jī)相聯(lián),這樣可同時(shí)自動(dòng)記錄動(dòng)物的鉆頭次數(shù)和鉆頭時(shí)間、運(yùn)動(dòng)活性及站立數(shù)等多項(xiàng)指標(biāo),既提高了工作效率,又增加了實(shí)驗(yàn)的可靠性。實(shí)驗(yàn)用雄性成年的大鼠或小鼠。將動(dòng)物置于孔板中央,背朝觀察者。動(dòng)物兩眼消失在洞中為一次鉆頭(a head一dip),記錄5-10min的鉆頭次數(shù)及鉆頭持續(xù)時(shí)間。
三.注意事項(xiàng)與評(píng)價(jià)
(1)對(duì)孔板箱的形狀和大小沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),但常采用方型,其邊長(zhǎng)在大鼠一般60cm,小鼠為40c m左右。
(2)孔的數(shù)量早期多為16孔,現(xiàn)在通常采用4孔板。
(3)動(dòng)物在上午的鉆頭數(shù)往往比下午多。因此,應(yīng)盡量在每天固定的時(shí)間內(nèi)做實(shí)驗(yàn)。
(4)本實(shí)驗(yàn)對(duì)致焦慮藥(如BDZ受體反相激動(dòng)劑)引起探究性鉆頭的特異性降低結(jié)果較為一致,而某些缺乏抗焦慮作用的藥物(如BDZ受體拮抗劑氟馬西尼)反可使探究性鉆頭增加。故在篩選未知藥物時(shí)應(yīng)結(jié)合其它焦慮模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。