運輸條件:常溫運輸
貨 號:51037: 50次反應(yīng)
51038: 100次反應(yīng)
產(chǎn)品特點
◎提取DNA純度高,無抑制劑,A260/A280
為1.7-1.9;
◎產(chǎn)率高,同樣的樣本量提取的DNA更多;
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑,安全無毒;
◎?qū)τ诟锾m氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌有較好的提取效果。
試劑盒組成
組分 |
50次 |
100次 |
吸附柱和收集管 |
各50個 |
各100個 |
裂解液I |
12 mL |
24mL |
裂解液Ⅱ |
12 mL |
24mL |
析出液 |
4.5 mL |
9 mL |
洗滌液 |
9 mL |
18 mL |
洗脫液 |
12mL |
24 mL |
消化液 |
1.2 mL |
2.4 mL |
說明書 |
1份 |
1份 |
產(chǎn)品介紹
BIOG DNA Bacteria Kit適用于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌。對于細(xì)菌壁較厚的革蘭氏陽性菌、真菌、細(xì)菌芽孢等須首先破壁處理。BIOG DNA Bacteria Kit采用復(fù)合消化液消化菌體中的蛋白質(zhì),使細(xì)胞DNA更容易釋放出來,因而本試劑盒DNA提取產(chǎn)率較高。BIOG DNA Bacteria Kit采用了最新的離子膜技術(shù)并反復(fù)優(yōu)化了裂解液和洗脫液配方,提取得到的DNA純度更高,最大限度地去除了蛋白、脂類等雜質(zhì)污染,可以直接應(yīng)用于PCR、熒光定量PCR和各種酶切試驗等。
操作步驟:
1.請自行準(zhǔn)備:無水乙醇、PBS水及1.5mL離心管。
2.取出析出液和洗滌液,按以下操作:
a) 析出液:4.5mL加入25.5mL無水乙醇;9mL加入51mL無水乙醇。
b) 洗滌液:9mL加入21mL無水乙醇;18mL加入42mL無水乙醇。
c) 配制好的析出液如出現(xiàn)沉淀,可在37℃溶解,搖勻后使用。
3.細(xì)菌處理:將收集的細(xì)菌5,000 rpm離心3分鐘,棄上清,加入200μLPBS,振蕩混勻,5,000 rpm離心3分鐘,徹底棄上清。
4.a) 對于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌,加入200μL裂解液Ⅰ,懸浮沉淀,37℃放置30分鐘。
b) 對于細(xì)菌壁較厚的革蘭氏陽性菌、真菌、細(xì)菌芽孢等須首先自行進(jìn)行破壁處理,處理結(jié)束后進(jìn)行步驟5操作。
5.加入200 μL 裂解液Ⅱ,20μL消化液,充分振蕩混勻,56℃水浴10 分鐘。
6.加入600μL析出液,輕輕顛倒混勻,如有半透明懸浮物,不影響DNA的提取與后續(xù)實驗。
7.將吸附柱放入收集管內(nèi),取上述溶液600μL轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi),靜置2 分鐘,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。
8.將剩余400μL液體轉(zhuǎn)入上述吸附柱內(nèi),重復(fù)操作步驟7。
9.將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL 洗滌液至吸附柱內(nèi),12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。
10.將吸附柱放回收集管內(nèi),12,000 rpm 4℃離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液。
11.取出吸附柱,放入新的1.5 mL 離心管內(nèi),加入50-200 μL 洗脫液,靜置3分鐘,12,000 rpm 4℃ 離心2分鐘,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存。
注意事項:
儲存、運輸和有效期
本試劑盒可常溫運輸,室溫(15-25℃)保存,有效期為12個月,消化液請于-20℃存放,避免反復(fù)凍融,裂解液Ⅰ請于4℃存放。
質(zhì)量控制
本產(chǎn)品經(jīng)嚴(yán)格的質(zhì)量檢驗證明,無生物污染
注意 本產(chǎn)品僅用于科研
常州百代生物科技有限公司
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