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BIOG細(xì)菌DNA提取試劑盒使用說明書

瀏覽次數(shù):4463 發(fā)布日期:2016-3-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

運輸條件:常溫運輸

    :51037: 50次反應(yīng)

          51038: 100次反應(yīng)

產(chǎn)品特點

◎提取DNA純度高,無抑制劑,A260/A280

為1.7-1.9;

◎產(chǎn)率高,同樣的樣本量提取的DNA更多;

◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑,安全無毒;

◎?qū)τ诟锾m氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌有較好的提取效果。

試劑盒組成  

組分

50

100

吸附柱和收集管

各50個

各100個

裂解液I

12 mL

24mL

裂解液Ⅱ

12 mL

24mL

析出液

4.5 mL

9 mL

洗滌液

9 mL

18 mL

洗脫液

12mL

24 mL

消化液

1.2 mL

2.4 mL

說明書

1份

1份

產(chǎn)品介紹 

BIOG DNA Bacteria Kit適用于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌。對于細(xì)菌壁較厚的革蘭氏陽性菌、真菌、細(xì)菌芽孢等須首先破壁處理。BIOG DNA Bacteria Kit采用復(fù)合消化液消化菌體中的蛋白質(zhì),使細(xì)胞DNA更容易釋放出來,因而本試劑盒DNA提取產(chǎn)率較高。BIOG DNA Bacteria Kit采用了最新的離子膜技術(shù)并反復(fù)優(yōu)化了裂解液和洗脫液配方,提取得到的DNA純度更高,最大限度地去除了蛋白、脂類等雜質(zhì)污染,可以直接應(yīng)用于PCR、熒光定量PCR和各種酶切試驗等。

操作步驟:

1.請自行準(zhǔn)備:無水乙醇、PBS水及1.5mL離心管。

2.取出析出液和洗滌液,按以下操作:

a) 析出液:4.5mL加入25.5mL無水乙醇;9mL加入51mL無水乙醇。

b) 洗滌液:9mL加入21mL無水乙醇;18mL加入42mL無水乙醇。

c) 配制好的析出液如出現(xiàn)沉淀,可在37℃溶解,搖勻后使用。

3.細(xì)菌處理:將收集的細(xì)菌5,000 rpm離心3分鐘,棄上清,加入200μLPBS,振蕩混勻,5,000 rpm離心3分鐘,徹底棄上清。

4.a) 對于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌,加入200μL裂解液Ⅰ,懸浮沉淀,37℃放置30分鐘。

b) 對于細(xì)菌壁較厚的革蘭氏陽性菌、真菌、細(xì)菌芽孢等須首先自行進(jìn)行破壁處理,處理結(jié)束后進(jìn)行步驟5操作。

5.加入200 μL 裂解液Ⅱ,20μL消化液,充分振蕩混勻,56℃水浴10 分鐘。

6.加入600μL析出液,輕輕顛倒混勻,如有半透明懸浮物,不影響DNA的提取與后續(xù)實驗。

7.將吸附柱放入收集管內(nèi),取上述溶液600μL轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi),靜置2 分鐘,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。

8.將剩余400μL液體轉(zhuǎn)入上述吸附柱內(nèi),重復(fù)操作步驟7。

9.將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL 洗滌液至吸附柱內(nèi),12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。

10.將吸附柱放回收集管內(nèi),12,000 rpm 4℃離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液。

11.取出吸附柱,放入新的1.5 mL 離心管內(nèi),加入50-200 μL 洗脫液,靜置3分鐘,12,000 rpm  4℃ 離心2分鐘,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存。

注意事項:

  1. 析出液、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì),操作過程請做好防護(hù)措施,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛,請立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時請就醫(yī)。
  2. 細(xì)菌量建議不高于107。
  3. 裂解液Ⅱ如有白色絮狀物析出屬正常現(xiàn)象,置于37℃水浴中溶解即可。

儲存、運輸和有效期

本試劑盒可常溫運輸,室溫(15-25℃)保存,有效期為12個月,消化液請于-20℃存放,避免反復(fù)凍融,裂解液Ⅰ請于4℃存放。

質(zhì)量控制

本產(chǎn)品經(jīng)嚴(yán)格的質(zhì)量檢驗證明,無生物污染

注意 本產(chǎn)品僅用于科研

常州百代生物科技有限公司

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