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BIOG細(xì)胞RNA抽提試劑盒使用說明書

瀏覽次數(shù):4283 發(fā)布日期:2016-3-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

運輸條件:常溫運輸

    :51021: 50次反應(yīng)

          51022: 100次反應(yīng)   

產(chǎn)品特點  

◎操作簡便快速,可在半小時內(nèi)完成操作;

◎提取RNA純度高,無抑制劑,A260/A280為1.8-2.0;◎產(chǎn)率高,同樣的樣本量提取的RNA更多;

◎標(biāo)本范圍寬,適合于各種培養(yǎng)細(xì)胞、針刺吸取物、尿沉渣細(xì)胞等細(xì)胞離散標(biāo)本;

◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑,安全無毒。

試劑盒組成                    

組分

50

100

吸附柱和收集管

各50個

各100個

裂解液

12 mL

24mL

析出液

4.5 mL

9 mL

洗滌液

9 mL

18 mL

洗脫液

12mL

24 mL

消化液

1.2 mL

2.4 mL

說明書

1份

1份

 

 

 

 

產(chǎn)品介紹  

BIOG RNA Cell Kit是我公司研發(fā)的專門用于從各種細(xì)胞樣本中提取基因組RNA的試劑盒。提取的樣本范圍包括各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、針刺吸取物、尿沉渣細(xì)胞等細(xì)胞離散標(biāo)本。BIOG RNA Cell Kit采用復(fù)合消化液消化細(xì)胞中的蛋白質(zhì),使細(xì)胞RNA更容易釋放出來,因而本試劑盒RNA提取產(chǎn)率較高。BIOG RNA Cell Kit采用了最新的離子膜技術(shù)并反復(fù)優(yōu)化了裂解液和洗脫液配方,提取得到的RNA純度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂類等雜質(zhì)污染,可以直接應(yīng)用于Northern 雜交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文庫構(gòu)建、體外翻譯等各種常規(guī)分子生物學(xué)實驗。

操作步驟:

1.請自行準(zhǔn)備:無水乙醇、PBS及無RNA酶的1.5mL離心管。

2.取出析出液和洗滌液,按以下操作:

a) 析出液:4.5mL加入25.5mL無水乙醇;9mL加入51mL無水乙醇。

b) 洗滌液:9mL加入21mL無水乙醇;18mL加入42mL無水乙醇。

c) 配制好的析出液如出現(xiàn)沉淀,可在37℃溶解,搖勻后使用。

3.細(xì)胞處理:a) 培養(yǎng)板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞,棄培養(yǎng)基,PBS清洗一遍,棄PBS;

b) 培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞應(yīng)先用胰酶消化,處理為細(xì)胞懸液, 1,000 rpm 離心 5分鐘,徹底棄去上清,加入100μL PBS振蕩至細(xì)胞懸;

c) 培養(yǎng)的細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,1,000 rpm 離心 5分鐘,徹底棄去上清,加入100μL PBS振蕩至細(xì)胞懸浮。

4.加入200μL裂解液,20 μL 消化液,充分振蕩混勻,56℃水浴10 分鐘至細(xì)胞完全裂解。

5.加入500μL析出液,輕輕顛倒混勻,如有半透明懸浮物,不影響RNA的提取與后續(xù)實驗。

6.將吸附柱放入收集管內(nèi),將上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi),靜置2 分鐘,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。

7.將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL 洗滌液至吸附柱內(nèi),12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液。

8.將吸附柱放回收集管內(nèi),12,000 rpm 4℃離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液。

9.取出吸附柱,放入新的無RNA酶的1.5 mL 離心管內(nèi),加入50-200μL 洗脫液,靜置3 分鐘,12,000 rpm 4℃ 離心2 分鐘,收集RNA溶液。

10.-70℃保存,或直接用于下一步實驗。

注意事項

  1. 為防RNA酶污染,實驗過程中最好戴一次性干凈手套、口罩,使用處理過的無RNA酶的容器和無RNA酶的超純水。
  2. 析出液、洗滌液均含有刺激性化學(xué)物質(zhì),請做好防護(hù)措施,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛,請立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時請就醫(yī)。
  3. 細(xì)胞量建議不高于107。
  4. 裂解液如有白色絮狀物析出屬正常現(xiàn)象,置于37℃水浴中溶解即可。

儲存、運輸和有效期

 

本試劑盒可常溫運輸,室溫(15-25℃)保存,有效期為12個月,消化液請于-20℃存放,避免反復(fù)凍融。

質(zhì)量控制

本產(chǎn)品經(jīng)嚴(yán)格的質(zhì)量檢驗證明,無生物污染

注意 本產(chǎn)品僅用于科研實驗

常州百代生物科技有限公司

 

地址:常州市東方東路51號新東方物流園   電話: 0519-88050392    傳真: 0519-83382790

 

來源:常州百代生物科技有限公司
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標(biāo)簽: 細(xì)胞RNA提取
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