微量熱泳動(dòng)儀MST用戶清華大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院柴繼杰教授研究組、中科院遺傳與發(fā)育研究所楊維才研究員研究組合作在《Nature》上發(fā)表《植物肽激素phytosulfokine受體的別構(gòu)激活機(jī)制》（Allosteric receptor activation by the plant peptide hormone phytosulfokine）研究論文（Nature 2015, 525, 265-268），揭示了植物重要肽類激素phytosulfokine (PSK) 的識(shí)別和受體激活分子機(jī)理。

植物肽類激素，同植物經(jīng)典激素一樣，對(duì)植物體的生長(zhǎng)發(fā)育等生理活動(dòng)具有重要的調(diào)控作用。PSK是較早被發(fā)現(xiàn)和研究的一種含兩個(gè)酪氨酸磺化修飾的五肽激素，在植物的生長(zhǎng)發(fā)育、抗逆和先天免疫等方面有廣泛調(diào)控作用。PSK發(fā)揮活性是通過與細(xì)胞膜上的受體激酶PSKR結(jié)合來發(fā)揮功能。但PSK被受體PSKR識(shí)別的分子機(jī)理以及后續(xù)的受體激活機(jī)制還需闡明。

柴繼杰研究組通過解析PSKR胞外區(qū)結(jié)合PSK的復(fù)合物結(jié)構(gòu)，闡明了PSKR胞外區(qū)通過其島區(qū)來識(shí)別PSK的分子機(jī)理。深入的結(jié)構(gòu)分析提示SERK家族成員可能作為共受體參與PSKR的受體激活，體外生化實(shí)驗(yàn)初步證實(shí)了這一假設(shè)，同時(shí)通過與中科院遺傳與發(fā)育研究所楊維才研究員研究組合作，利用植物體內(nèi)生化和遺傳學(xué)的方法最終證明了這一假設(shè)。這也是通過結(jié)構(gòu)生物學(xué)提示找到PSK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上的新成份。通過解析和對(duì)比分析PSKR/PSK/SERK三元復(fù)合物結(jié)構(gòu)和單獨(dú)的PSKR結(jié)構(gòu)，揭示了PSK通過誘導(dǎo)原本無序的受體PSKR島區(qū)產(chǎn)生與共受體SERK結(jié)合的新界面通過

Nanotemper公司的微量熱泳動(dòng)儀（MST）研究人員測(cè)量出PSKR與PSK的親和能力（Kd：1.55 µM）明顯強(qiáng)于無磺化修飾的dPSK（Kd：41.5 µM)，與體內(nèi)數(shù)據(jù)一致(圖 a)。此外研究人員還使用MST確定了PSKR上多個(gè)對(duì)識(shí)別PSK至關(guān)重要的氨基酸(圖 b)。

相關(guān)產(chǎn)品: 最新的分子間相互作用分析技術(shù)微量熱泳動(dòng)儀---MST

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