生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室日夜奮斗的小伙伴們,IKA為您們帶來好消息啦!熱激法轉(zhuǎn)化大腸桿菌,大家一定不陌生:
大腸桿菌在0℃ CaCl2低滲溶液中,菌細(xì)胞膨脹成球形,轉(zhuǎn)化混合物中的DNA形成抗DNase的羥基-鈣磷酸復(fù)合物粘附于細(xì)胞表面,經(jīng)42℃短時(shí)間熱沖擊處理,促進(jìn)細(xì)胞吸收DNA復(fù)合物,在豐富培養(yǎng)基上生長數(shù)小時(shí)后,球狀細(xì)胞復(fù)原并分裂增殖。在被轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中,重組子基因得到表達(dá),在選擇性培養(yǎng)基平板上可挑選所需的轉(zhuǎn)化子。