無需染色的細胞活力檢測介紹
瀏覽次數(shù):2126 發(fā)布日期:2015-7-3
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細胞活力是總細胞中活細胞所占的百分比,其中臺盼藍染色方法最常見。臺盼藍可穿透變性的細胞膜,與解體的DNA結(jié)合,使其著色,而活細胞能阻止染料進入細胞內(nèi),故可以鑒別死細胞與活細胞。
激光全息細胞成像及分析系統(tǒng)可以實時監(jiān)測細胞死亡過程,以及通過圖像進行記錄。 全息技術(shù)無需熒光和染料標記就可以得到細胞形態(tài)學數(shù)據(jù)。Khmaladze A. et al(2012) 和Pavillion N. et al(2012)使用DHM研究細胞死亡過程,觀察到死亡過程中細胞體積顯著減小。Kuhn et al(2013)使用DHM研究活/死細胞特點時得到實驗結(jié)果和和基于熒光標記方法結(jié)果相一致。他們使用PI和Hoechst標記細胞。
鼠成纖維細胞L929接種在μ-slide 上,腫瘤藥物依托泊苷etoposide(100μM)處理細胞,使用激光全息細胞分析系統(tǒng)(M3)分析細胞的死亡,并與臺盼藍染色法進行比較。圖1中左圖為臺盼藍染色結(jié)果,右圖為全息結(jié)果,細胞越白,細胞越厚。死細胞是圓的,薄的。兩種方法得到的結(jié)果是一樣的。
使用激光全息細胞成像用來分析細胞活力,無需不同時間點進行細胞臺盼藍染色,就可以實時得到細胞活力數(shù)據(jù)。