志賀氏菌檢測(cè)新國(guó)標(biāo)厭氧條件增菌的解決方案

新頒國(guó)標(biāo)

2012年5月17日，中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒GB 4789.5-2012《食品安全國(guó)家

標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 志賀氏菌檢驗(yàn)方法》，于2012年7月17日起實(shí)施。
該標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施之日起，原GB/T4789.5-2003標(biāo)準(zhǔn)作廢。 

解讀GB4789.5-2012
為了提高食品中志賀氏菌檢出率，降低操作者的操作要求，增菌過程的調(diào)整是本次新標(biāo)準(zhǔn)最大的變動(dòng)之處。 
兩份國(guó)標(biāo)方法之間增菌部分的主要區(qū)別如下表所示： 

	GB4789.5-2003	GB4789.5-2012
增菌培養(yǎng)基	GN增菌肉湯	志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素
取樣操作	無菌均質(zhì)器或研缽	無菌均質(zhì)器或拍擊式均質(zhì)器
增菌培養(yǎng)條件	37℃，有氧培養(yǎng)6~8小時(shí)	41.5℃，厭氧培養(yǎng)16~20小時(shí)
……	……	……

更改增菌培養(yǎng)方式的最終目的是最大程度消除食物樣品中的雜菌背景對(duì)于檢測(cè)培養(yǎng)的影響。 
1、厭氧環(huán)境41.5℃培養(yǎng)，可排除需氧菌和大部分不耐熱的厭氧菌與兼性厭氧菌干擾；
2、使用志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素進(jìn)行增菌，可排除革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性腸桿菌（如變形桿菌等）的干擾； 
減少雜菌背景的同時(shí)，也降低了雜菌在增菌過程中對(duì)于數(shù)量很少的志賀氏菌的競(jìng)爭(zhēng)抑制作用，可有效地提高志賀氏菌的擴(kuò)增量，有助于進(jìn)一步的分離與鑒定。

厭氧增菌的解決方案
不同于常規(guī)厭氧培養(yǎng)，本標(biāo)準(zhǔn)中的增菌培養(yǎng)是在無菌三角燒瓶或無菌勻質(zhì)袋中進(jìn)行，故厭氧袋因容積限制而無法使用，因此推薦以下專業(yè)解決方案：

解決方案一：每日樣品檢測(cè)量30~50份的實(shí)驗(yàn)室，建議配備AG300型厭氧工作站。
型號(hào)           AG300
最大培養(yǎng)容量： 50只（250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶）
              30只（500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶）
傳輸艙容量：   2只（250/500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶）
（* 三角燒瓶底徑需小于100mm，高度小于200mm）
 
解決方案二：
每日樣品檢測(cè)量極少（≤30份）的實(shí)驗(yàn)室，A30厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)，此方案需要將厭氧罐放入生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
型號(hào)           A30厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)配20L培養(yǎng)罐
最大培養(yǎng)容量：  20只（250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶）