細(xì)胞技術(shù)專題：大鼠肝星狀細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
| 選用Wistar大鼠經(jīng)消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC，通過觀察其自發(fā)熒光及其顯著特征性結(jié)構(gòu)的脂肪染色、細(xì)胞免疫化學(xué)染色等方法鑒定。 | |
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一、討論 進(jìn)一步鑒別需要做免疫組化：Desmin 和α-SMA；后者在細(xì)胞激活后才表達(dá)。也采用過無須原位消化的方案，完全可行，只不過消化時(shí)間更難控制！實(shí)驗(yàn)采用原代培養(yǎng)的或傳代后9代內(nèi)的細(xì)胞(最好5 代以內(nèi))。 二、文獻(xiàn) 1. 袁桃霞，張錦生，張?jiān)露穑? 大鼠肝 Ito 細(xì)胞的體外培養(yǎng)及肝素對其抑制作用的觀察. 上海醫(yī)科大學(xué) 學(xué)報(bào),1996,23(2):90-93.
2. Huang GC, Zhang JS, Tang QQ. Involvement of C/EBP-α gene in in vitro activation of rat hepatic stellate cells. Biochem Biophys Res Commun,2004,324(4):1309-1318. |
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