1．學(xué)習(xí)緩沖紙色譜的基本操作技術(shù)，并能根據(jù)色譜結(jié)果，設(shè)計(jì)液液萃取法分離混合物的實(shí)驗(yàn)方案。

2．掌握PH梯度法的原理及操作技術(shù)。

3．通過(guò)磷酸氫鈣柱色譜分離大黃酚及大黃素甲醚的試驗(yàn)，進(jìn)一步熟悉柱色譜操作技術(shù)。

4．學(xué)習(xí)蒽醌類化合物鑒定方法。

 

1．大黃總蒽醌苷元的提取

 

注意：①大黃中的蒽醌類成分大部分與糖結(jié)合，以蒽醌的形式存在于植物組織中。所以要用酸水解使其生成苷元。蒽醌苷元可溶于氯仿、苯及乙醚等有機(jī)溶劑，用苯時(shí)應(yīng)注意苯蒸氣的揮發(fā)，嚴(yán)防中毒；②所得的氯仿液中如帶有酸水液，應(yīng)該用分液漏斗分出棄去，并用蒸餾水回洗一次除去酸性以免影響梯度萃取。氯仿提取液放置中如有沉淀析出，可濾取之，該沉淀多為大黃素，余液進(jìn)行下一步分離試驗(yàn)用。

 

2．總蒽醌苷元分離方案的設(shè)計(jì)

1)大黃總蒽醌苷元的紙色譜

2) 蒽醌類成分的緩沖紙色譜試驗(yàn)

3)最佳萃取劑及其用量的確定

4)蒽醌類成分各種萃取劑用量的確定

5)新分離方法的設(shè)計(jì)

 

3．蒽醌類成分的分離與精制

①大黃酸的分離與精制

將含有總游離蒽醌的氯仿液450ml移至1000ml的大分液漏斗中，加PH8緩沖液275ml振搖萃取，靜置至徹底分層，放出氯仿液后，到出堿水液至置250ml燒杯中，加HCl酸化至PH=3，待黃色沉淀析出完全后，過(guò)濾、干燥，干燥后的樣品加冰醋酸10ml加熱使溶，趁熱過(guò)濾，濾液靜置，析出黃色針晶為大黃酸，過(guò)濾即得純品。

 

②大黃素的分離與精制

將提過(guò)大黃酸的氯仿液繼續(xù)移至分液漏斗中，用PH9.9緩沖液275ml振搖萃取，徹底分層后，分出堿水層，并用HCl酸化至PH=3，析出棕黃色沉淀，過(guò)濾，沉淀經(jīng)干燥后，用10ml冰醋酸加熱使溶，趁熱過(guò)濾，析出橙色大針晶，過(guò)濾后，即得大黃素純品。

 

③蘆薈大黃素的分離和精制

余下氯仿液移至分液漏斗后，加5%NaCO3:5%NaOH (9:1) 堿水液540ml或用0.5%KOH540ml振搖萃取，堿水液加HCl酸化，析出的沉淀過(guò)濾干燥，用10ml乙酸乙酯重結(jié)晶，得黃色針晶的蘆薈大黃素純品。

 

④ 大黃酚和大黃素甲醚的分離--磷酸氫鈣柱色譜

 

4．蒽醌類成分的鑒定

1) 紙色譜鑒定

2) IR光譜解析

 

1) pH梯度萃取的原理及注意事項(xiàng)。

2) 如何設(shè)計(jì)萃取分離方案的程序與方法。

3) 蒽醌化合物紅外光譜的特點(diǎn)。

4) 分離萃取時(shí)一定注意乳化層的分出，不要混入，并且每步最好用新鮮CHCl3，回洗堿水液。

5) 緩沖液的配制和堿液的配制要準(zhǔn)確，嚴(yán)格注意檢查。

6)每步萃取時(shí)，利用紙色譜檢查跟蹤萃取效果，如未達(dá)到預(yù)想效果應(yīng)及時(shí)糾正。