摘要：采用國際通用的焦慮動(dòng)物模型(EPM)，從行為學(xué)角度觀察了四個(gè)不同給藥劑量酸棗仁湯對(duì)EPM大鼠的抗焦慮作用。結(jié)果顯示，酸棗仁湯確有抗焦慮作用，但此效應(yīng)不隨給藥劑量的增加而增強(qiáng)與一般化學(xué)藥物所遵循的量效關(guān)系規(guī)律不同。

酸棗仁湯是臨床治療肝血不足、虛熱內(nèi)擾之“虛勞虛煩不得眠”的著名古方，有關(guān)本方藥理實(shí)驗(yàn)方面的研究目前多局限于鎮(zhèn)靜催眠作用的初步觀察⋯。針對(duì)本方l臨床可用于治療焦虛癥的經(jīng)驗(yàn)事實(shí) ，本文采用國際上通用的焦慮動(dòng)物模型——1'Ile elevated pluS-maze test(EPM，高架十字迷宮模型)，從行為學(xué)角度觀察了酸棗仁湯的抗焦慮作用，并對(duì)其量效關(guān)系特點(diǎn)進(jìn)行了初步總結(jié)。

1 材料

1．1 動(dòng)物健康雄性Wistar大鼠90只，級(jí)別SPF／VAF，體重180±10g，許可證號(hào)：SCXK(京)2002．0003，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。所有動(dòng)物提前一周購入，本實(shí)驗(yàn)室常規(guī)飼養(yǎng)。
1．3 行為學(xué)測(cè)試儀器大鼠高架十字迷宮(EPM)：采用國際通用方法制作 。由兩個(gè)相對(duì)的開放臂(open aim，長X寬分別為50cm X 10cm)、兩個(gè)相對(duì)的封閉臂(enclosed arm，close aITI1，長X寬×高分別為50cm×10cm×40cm)、一個(gè)連接四只臂的中央平臺(tái)(central platform，10cm×10cm)(即：開放臂一中央平臺(tái)一開放臂或封閉臂一中央平臺(tái)一封閉臂，此二者互相垂直成為“十”(plus)形狀)和圍繞在開放臂邊緣的1cm高的矮擋板組成(目的是防止動(dòng)物在探究過程中不慎滑下迷宮)。本迷宮由國產(chǎn)有機(jī)玻璃制作(1cm厚)，除四個(gè)臂的底板及中央平臺(tái)為黑色外，其余部位均為無色透明。有機(jī)玻璃部分整體固定于(由黑色等長寬的“十”木架和不銹鋼可升降底座組成的)支架上，使迷宮底板調(diào)節(jié)到距實(shí)驗(yàn)室地面50cm處。

2 方法

2．1 動(dòng)物處置及分組 大鼠每籠7～8只，不限食水。光照節(jié)律12L：12D(6：00～18：00)，室溫(18±2)℃ ，保持安靜。將大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照、DZP、SZRT I、II、m、IV共6組，每組15只。其中中藥I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別按3．75g／kg／d、7．5g／kg／d、15g／kg／d、30g／kg／d給予SZRT灌胃，DZP組給予1mg／kg灌胃，空白對(duì)照組灌服等容積的生理鹽水。各組連續(xù)給藥10d，于第10d在末次給藥2h后8：o0～14：00Am做行為測(cè)試。所有動(dòng)物均提前2h進(jìn)入測(cè)試實(shí)驗(yàn)室。酸棗仁湯對(duì)高架十字迷宮大鼠行為學(xué)影響的量效關(guān)系評(píng)價(jià)

2．2 行為學(xué)測(cè)試

2．2．1 測(cè)試條件 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)光線昏暗(以1．5m距離處能區(qū)分大鼠細(xì)微活動(dòng)的最低亮度為準(zhǔn))并保持恒亮，室溫20~C左右，保持安靜。測(cè)試箱放置于實(shí)驗(yàn)室一角，周圍布以2m高黑色單調(diào)背景。實(shí)驗(yàn)過程中有一名人員搬運(yùn)動(dòng)物，2名事先經(jīng)過實(shí)驗(yàn)記錄培訓(xùn)但不熟悉分組情況的人員在距離測(cè)試箱1．5m處分別觀察記錄動(dòng)物的活動(dòng)。2．2．2 測(cè)試指標(biāo) 迷宮測(cè)試前將每只大鼠放入一個(gè)60cm×60cm×35cm塑料盒中，任其自由探究5min后迅速置于EPM的中央平臺(tái)處，使其頭部正對(duì)其中一個(gè)開放臂，釋放后即開始記錄下述指標(biāo)：

①進(jìn)入開放臂次數(shù)(open arln entry，OE)：進(jìn)入到任一開放臂的次數(shù)，以大鼠四個(gè)爪子均進(jìn)入到臂內(nèi)為準(zhǔn)，中途一個(gè)爪子從該臂中完全退出則為該次進(jìn)入活動(dòng)完成；② 進(jìn)入開放臂時(shí)間(open arln time，OT)：進(jìn)入開放臂的時(shí)間，單位：秒；③ 進(jìn)入封閉臂次數(shù)(cl0se ariB entry，CE)：進(jìn)入到任一封閉臂的次數(shù)，以大鼠四個(gè)爪子均進(jìn)入到臂內(nèi)為準(zhǔn)；④ 進(jìn)入封閉臂時(shí)間(cl0se arln time，CT)：進(jìn)入封閉臂的時(shí)間，單位：秒；⑤ 向下探究次數(shù)(head—dipping)：大鼠置身于中央平臺(tái)或開放臂時(shí)，一邊用前爪握住迷宮邊緣一邊把頭部和肩部伸出開放臂的邊緣向迷宮下面探究的行為次數(shù)；⑥ 封閉臂后腿直立次數(shù)(rearing)：大鼠在封閉臂前腿抬起以后腿支持使身體豎立的次數(shù)。由① ～④分別計(jì)算出：① 進(jìn)入開放臂和封閉臂的總次數(shù)(OE+CE)：表示大鼠的運(yùn)動(dòng)活力(1ocomotor activitv)：②進(jìn)入開放臂次數(shù)比例(OE％)：即開放臂進(jìn)入次數(shù)／(OE+CE)×100％ ；③ 開放臂停留時(shí)間比例(OT％)，即開放臂停留時(shí)間／(OT十CT)×100％。每只大鼠測(cè)試5min。中間用濕布擦拭迷宮，清除糞便，繼用干布擦凈后再進(jìn)行下一只大鼠的測(cè)試。

3 結(jié)果

本研究引入的高架十字迷宮模型，為抗焦慮研究中公認(rèn)的非條件反射模型。它利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究特性相對(duì)高懸敞開臂的恐懼心理，形成動(dòng)物的矛盾行為，實(shí)驗(yàn)指標(biāo)以進(jìn)入開放臂的百分?jǐn)?shù)(OE％)和在開放臂停留時(shí)間的百分?jǐn)?shù)(OT％)反映動(dòng)物的焦慮狀態(tài)，焦慮動(dòng)物的OE％和OT％明顯降低，經(jīng)典抗焦慮藥物則使兩者升高 ；開放臂和中央平臺(tái)區(qū)head—dipping次數(shù)則反映了在非保護(hù)區(qū)內(nèi)的探索行為，代表動(dòng)物對(duì)陌生環(huán)境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避 ，與焦慮程度有一定相關(guān)性；開放臂和封閉臂總進(jìn)入次數(shù)反映動(dòng)物總的運(yùn)動(dòng)能力，封閉臂rearing值也可用來觀察藥物有無鎮(zhèn)靜作用及鎮(zhèn)靜強(qiáng)度，但多年來關(guān)于抗焦慮藥究竟如何影響這兩個(gè)指標(biāo)一直存在爭議。