植物組織研磨樣品典型實(shí)驗(yàn)方法
TL系列植物組織破碎儀具有對稱的一對高速大振幅的搖臂,通過研磨珠在樣品管內(nèi)來回不規(guī)則撞擊及摩擦,在幾秒到幾分鐘內(nèi)輕松實(shí)現(xiàn)樣品的研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁。精細(xì)的研磨,最細(xì)可以達(dá)到5微米。
對于不同的的樣品,TL系列植物組織破碎儀需要用不同的條件來處理,這里面主要涉及研磨速度、研磨時(shí)間、研磨溫度和研磨珠的選擇。以下是TL系列植物組織破碎儀針對植物樣品的實(shí)驗(yàn)方法,僅供參考。
實(shí)驗(yàn)一
實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):遼寧省農(nóng)科院品種改良中心
處理材料:水稻葉片 (冰箱凍存)
1 將離心管編號,對應(yīng)編號將相應(yīng)的水稻葉片截成1cm左右的小段,每個(gè)離心管中放3段,用鑷子夾住中間位置,放入管底。
2 分裝珠子:內(nèi)側(cè)兩排裝2顆5mm珠子和5顆3mm珠子;外側(cè)兩排裝1顆5毫米珠子和6顆3mm珠子。
3 冷凍:將擺好的夾具(確定好內(nèi)外行),放到泡沫箱中,加液氮冷凍,3-5分鐘,充分冷凍夾具及管內(nèi)樣品。
4 在TL系列植物組織破碎儀上設(shè)定:1500rpm 研磨3min
5 研磨:在上夾具時(shí),要注意一是要帶上厚一點(diǎn)的手套,防止被液氮凍傷;一是要迅速,且要保證螺栓擰緊,卡上保險(xiǎn)扣。然后,啟動研磨。
6 取下夾具,使整體離心管蓋子向上,在桌面上拍一拍,使樣品粉末沉落管底,進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。
同類適合樣品:
由對水稻葉片研磨的良好效果,可以直接類推向?qū)τ衩、小麥等作物葉片的處理實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)二
實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院
處理材料:葡萄幼葉
1 用直徑6~8mm打孔器在葉片合適的部位打孔,獲取研磨材料葉圓片。
2 將5~6顆直徑為3mm研磨珠和若干(8片)葉圓片放置于2ml離心管(EP管)中。
3 將加完葉圓片和研磨珠的EP管,在適配器上擺好,開蓋,加液氮冷凍;3~5分鐘后,待葉圓片在冷凍的情況下脫去水分,及時(shí)將EP管的蓋封閉上,繼續(xù)在液氮中遇冷3分鐘。
4 迅速將適配器安置到研磨儀上。
5 在TL系列植物組織破碎儀上1500rpm條件下,研磨3分鐘,可得到細(xì)碎的葉片粉末,用于提核酸或蛋白。(研磨時(shí)間和轉(zhuǎn)速還可以進(jìn)一步優(yōu)化)
同樣的方法對凍存的葡萄葉片,研磨時(shí)加入1~2顆5mm的珠子,效果也非常好!
同類適合樣品:
以木本植物(果樹、林木等)為研究材料;需要高通量提取核酸、蛋白或是糖類等物質(zhì)來進(jìn)行遺傳或是生理生化分析研究的實(shí)驗(yàn)
TL系列植物組織破碎儀是名副其實(shí)的實(shí)驗(yàn)室樣品制備的多面手,它可以對硬性、軟性、彈性等樣品進(jìn)行快速的粉碎和均相化處理,符合理化分析實(shí)驗(yàn)室的要求,配置不同體積、不同材料的研磨罐,可以進(jìn)行干磨、濕磨及冷凍研磨,也可以進(jìn)行細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取,在生物醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、食品、檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。