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真假魚翅分析解決方案—RephiLe

瀏覽次數(shù):3121 發(fā)布日期:2013-1-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
2013年1月8日,CCTV央視新聞播出了記者臥底暗訪假魚翅真相的報道,其中曝光了不少飯店所售魚翅實為明膠制作的“贗品”,這些所謂的魚翅不過是用“魚翅精”調(diào)制而成的。
 
魚翅作為中國傳統(tǒng)的名貴食材之一,廣泛為東亞各國所接收。魚翅以鯊魚的鰭制成,有機成分主要有多種蛋白如軟骨粘蛋白、膠原和軟骨硬蛋白等。魚翅軟骨含膠原較多,干品含蛋白質(zhì)高達83.5%,但缺少色氨酸,屬不完全蛋白質(zhì)。烹調(diào)中魚翅必須要加配料以賦味,一般禽畜肉和蝦、蟹等,都含有較多色氨酸,與魚翅相配既賦予鮮美之味,又可彌補缺少色氨酸的缺憾。
 
魚翅價格不菲,一些黑心商戶,盯著其中高額的利潤空間,打起了黑算盤,以至于饕餮盛宴中彰顯尊貴的魚翅也中槍了。調(diào)查指出,目前國內(nèi)市場上人工合成的魚翅主要是用明膠、海藻酸鈉,及少許氯化鈣合成,其營養(yǎng)價值為零。不少假魚翅還人工添加有硫酸軟骨素,以混淆食用時的口感,讓人難辨真?zhèn)。為驗證真假魚翅的味覺差異,浙江省消保委與杭城某酒店共同完成了一次魚翅消費實驗。實驗結果表明,添加高湯以后,人工合成魚翅和真魚翅不僅沒有多少味覺差異,形狀也難以辨識。
 
其實,真假魚翅是可以區(qū)分的,最權威的方法就是檢測魚翅中的鯊魚源DNA。 RephiLe 的技術人員查找了相關文獻,整理出魚翅鯊魚源DNA檢測方法,供相關人員參考。方法如下:
1.    樣品DNA提取
將0.1g魚翅研磨成粉,使用動物基因組DNA提取試劑盒提取樣品DNA,用核酸含量測定儀測定DNA濃度,-20℃保存。
2.    PCR擴增
采用巢式PCR反應。
第一輪PCR:
1×PCR buffer,Mg2+,2.5mmol/L; taq酶,1U;dNTPs,200μmol/L;引物(5’-TCTGCCCTATCAACTTTCGATGGTA-3’與5’-AATTTGCGCGCCTGCTGCCTTCCTT-3’),100nmol/L;DNA模版,50-100ng;反應體系 25μL。
反應條件:94℃變性3min;94℃ 20s,54℃ 40s,72℃ 40s,40個循環(huán)。
第二輪PCR:
12.5μL SYBR Green Pre Mix,1μL引物1(5’-CACCTTTAGGCAAACCAGCAC-3’)(5μM),1μL引物2(5’-GGGCCAGGGTCGAATCTCT -3’) (5μM),8.5μL無菌超純水,2μL DNA模版,反應體系 25μL。
反應條件:95℃變性10min;95℃ 30s,64℃ 40s,72℃ 45s,35個循環(huán)。95℃ 15s,64℃ 30s,99℃,15s。
3.    PCR結果檢測
將PCR產(chǎn)物通過瓊脂糖凝膠電泳檢測,真正的魚翅的產(chǎn)物會出現(xiàn)在180 bp的位置。
圖1 鯊魚DNA特異性檢測電泳圖
注:M為DL2000,1為陽性對照,2為陰性對照,3為魚翅樣品,4為空白對照
該PCR方法同樣適用于Realtime PCR,可以更好地確定鯊魚源DNA的含量。
4.    結果分析
如果180 bp處未出現(xiàn)相應條帶,則視為陰性結果,即魚翅中不含鯊魚源DNA。
為了防止或假陰性結果的出現(xiàn),我們特別地在樣本中加入對照。如果依然出現(xiàn)陰性結果,建議重新進行樣本的DNA提取及PCR擴增。
 
特別指出,生命科學實驗中有多處需要使用純水。在核酸提取過程中需要使用去除熱原的無菌超純水,防止核酸酶降解核酸以及微生物的代謝物產(chǎn)生污染。實驗室二級純水可以很好地滿足緩沖液的要求。同時,PCR對于水的要求非常嚴格,水中的金屬離子如Fe、Cd、Zn會干擾酶,有機分子會與DNA締合或與Mg2+絡合影響反應,細菌及熱原的影響也要避免。電泳用水最重要的要求是生物活性物質(zhì)諸如內(nèi)毒素(通常小于0.005 IU/ml)、核糖核酸酶和蛋白酶(不可測定)的去除;最好用電阻率18.2 MΩ·cm,TOC 小于 10 ppb,超濾以及細菌含量低于1 CFU/ml的超純水作為供水。
 
RephiLe為用戶特別推薦Direct-Pure EDI + PURIST UV組合型純水處理系統(tǒng),可以同時提供二級純水及超純水,全方位滿足生命科學實驗室用水需求。Direct-Pure EDI二級純水系統(tǒng)選用Siemens公司的EDI,以自來水為進水,提供穩(wěn)定優(yōu)質(zhì)的高純水,產(chǎn)品達到同類產(chǎn)品先進水平。設計簡潔的PURIST系列超純水系統(tǒng)以純水為進水,生產(chǎn)超純水,水質(zhì)超過或達到GB以及ASTM、CAP、CLSI的一級水標準。終端配置超濾器,可以控制細菌 < 0.1 cfu/ml,熱原 < 0.001 Eu/ml,滿足生命科學的特別要求。該組合套裝,可以保證用戶在使用中用水無憂,讓用戶在使用高品質(zhì)產(chǎn)品的同時,享受到專業(yè)周到的服務。另外,RephiLe還可提供Direct-Pure UP超純水加RO水一體機,該純水儀以自來水為進水,同時制備反滲透RO水和高品質(zhì)的超純水,一機兩水,以供不同需求客戶的選擇。
 
魚翅在中國飲食文化里代表奢華,用魚翅款待客人象征正身份和地位,殊不知,由于鯊魚的體形大,處于食物鏈的頂端,重金屬元素──水銀會在其體內(nèi)富集。野生救援發(fā)布的調(diào)查報告就顯示,在鯊魚魚翅湯內(nèi)含有高濃度的水銀,魚翅被水銀污染的程度高達70%,含有可被人體吸收的水銀比率觸目驚心, 已超出正常允許含量的42倍! 由于人類的過度捕撈,科學家指出,至少有17%的已知鯊魚物種瀕臨滅絕。為了我們自身的安全,也為了保護野生海洋動物,維護海洋食物鏈的完整性,Rephile 提醒廣大用戶積極響應環(huán)保組織提出的拒食魚翅的號召,為保護環(huán)境做出自己的一份貢獻!
 
沒有買賣就沒有殺戮!
 
RephiLe 祝廣大用戶用水無憂!健康無憂! 
更多純化,分析產(chǎn)品,請查詢RephiLe 官方網(wǎng)站:www. rephile. com
來源:上海樂楓生物科技有限公司
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