標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用案例 (RXS-200 標(biāo)樣稀釋儀)(EL系列多功能液體操作儀)
標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用案例
簡(jiǎn)介
標(biāo)準(zhǔn)曲線法是一種簡(jiǎn)便、快捷的定量方法。它是將標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列,在與待測(cè)組分相同的檢測(cè)條件下,等體積準(zhǔn)確進(jìn)樣,然后獲得檢測(cè)數(shù)據(jù)。一般做法為,以標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度為X坐標(biāo),以儀器(如:分光光度計(jì)等)的檢測(cè)數(shù)據(jù)為Y坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(通常為直線)。在實(shí)驗(yàn)中,常用該方法進(jìn)行樣品定量分析,一般要求標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合度R達(dá)到0.999。
RXS-200標(biāo)樣稀釋儀、EL系列多功能液體操作儀-確保標(biāo)準(zhǔn)曲線的高可靠性、重復(fù)性和高精度
案例1----重金屬檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簷z測(cè)樣品中的重金屬(Cu2+、Cr3+)的含量
應(yīng)用行業(yè):紡織行業(yè)等
實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 按照下表(表一、二)要求分別將300ppm的Cu2+溶液和Cr3+溶液稀釋成濃度為3ppm、15ppm、30ppm、120ppm、210ppm和30ppm的序列標(biāo)準(zhǔn)液:
表一 Cu2+溶液序列標(biāo)準(zhǔn)液
樣品杯號(hào) |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
母液 |
Cu2+溶液(300ppm) |
100ul |
500ul |
1000ul |
4000ul |
7000ul |
稀釋液 |
蒸餾水 |
9900ul |
9500ul |
9000ul |
6000ul |
3000ul |
濃度(300ppm) |
3ppm |
15ppm |
30ppm |
120ppm |
210ppm |
稀釋比 |
1% |
5% |
10% |
40% |
70% |
表二 Cr3+溶液序列標(biāo)準(zhǔn)液
樣品杯號(hào) |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
母液 |
Cr3+溶液(300ppm) |
100ul |
500ul |
1000ul |
4000ul |
7000ul |
稀釋液 |
蒸餾水 |
9900ul |
9500ul |
9000ul |
6000ul |
3000ul |
濃度(300ppm) |
3ppm |
15ppm |
30ppm |
120ppm |
210ppm |
稀釋比 |
1% |
5% |
10% |
40% |
70% |
2. 用熒光光譜儀檢測(cè)序列標(biāo)準(zhǔn)液,分別繪制Cu2+及Cr3+標(biāo)準(zhǔn)曲線;
3. 用熒光光譜儀檢測(cè)未知樣品并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中Cu2+或Cr3+的濃度。
案例2------甲醛檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簷z測(cè)樣品中甲醛的含量
應(yīng)用行業(yè):環(huán)保、建筑業(yè)等
實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 按照下表(表三)要求配置甲醛系列標(biāo)準(zhǔn)液;
表三 甲醛序列標(biāo)準(zhǔn)液
管號(hào) |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
標(biāo)準(zhǔn)溶液(ml) |
0 |
0.1 |
0.2 |
0.4 |
0.6 |
0.8 |
1 |
1.5 |
2 |
吸收液(ml) |
5 |
4.9 |
4.8 |
4.6 |
4.4 |
4.2 |
4 |
3.5 |
3 |
甲醛含量(ug) |
0 |
0.1 |
0.2 |
0.4 |
0.6 |
0.8 |
1 |
1.5 |
2 |
2. 添加硫酸鐵銨溶液:
向各序列標(biāo)準(zhǔn)液中添加400ul 1%硫酸鐵銨溶液,搖勻,放置15min,待測(cè);
3. 用紫外分光光度計(jì)測(cè)定各序列標(biāo)準(zhǔn)液在波長(zhǎng)630um的吸收值;
4. 以各序列標(biāo)準(zhǔn)液中甲醛的含量為橫坐標(biāo),吸收值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算擬合曲線的R2和R值;
5. 用紫外分光光度計(jì)測(cè)定待測(cè)樣品在波長(zhǎng)630um的吸收值;
6. 計(jì)算待測(cè)樣品的甲醛含量。
案例3------蛋白質(zhì)檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康;檢測(cè)樣品中蛋白質(zhì)的含量
應(yīng)用行業(yè):醫(yī)藥、生命科學(xué)等領(lǐng)域
實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)母液:
將蛋白母液(如:SP4)稀釋50倍,作為標(biāo)準(zhǔn)母液待用;
2. 制備序列標(biāo)準(zhǔn)液:
將標(biāo)準(zhǔn)母液依次稀釋至原濃度的10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%和80%,
稀釋后各序列標(biāo)準(zhǔn)液的總體積為1ml;
3. 用紫外分光光度計(jì)測(cè)試各序列標(biāo)準(zhǔn)液在波長(zhǎng)280nm的吸收值;
4. 以序列標(biāo)準(zhǔn)液稀釋度為橫坐標(biāo),吸收值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算擬合曲線R2和R的值;
5. 同樣用紫外分光光度計(jì)測(cè)試各序列標(biāo)準(zhǔn)液在波長(zhǎng)280nm的吸收值;
6. 計(jì)算待測(cè)樣品中蛋白含量。
案例4-氨檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簶悠分邪钡暮?/DIV>
應(yīng)用行業(yè):環(huán)保、建筑行業(yè)等
實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 按照下表(表四)要求配置氨序列標(biāo)準(zhǔn)液:
表四
管號(hào) |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
標(biāo)準(zhǔn)溶液(ml) |
0 |
0.5 |
1 |
3 |
5 |
7 |
10 |
吸收液(ml) |
10 |
9.5 |
9 |
7 |
5 |
3 |
0 |
氨含量(ug) |
0 |
0.5 |
1 |
3 |
5 |
7 |
10 |
2. 在各序列標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入500ul水楊酸溶液,100ul亞硝基鐵氰化鈉溶液和100ul次氯酸鈉溶液,混勻液體,放置室溫1h,待測(cè);
3. 用紫外分光光度計(jì)測(cè)試各序列標(biāo)準(zhǔn)液在波長(zhǎng)697.5nm的吸收值;
4. 以序列標(biāo)準(zhǔn)液的氨含量為橫坐標(biāo),吸收值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算擬合曲線R2和R的值;
5. 用紫外分光光度計(jì)測(cè)定待測(cè)樣品在波長(zhǎng)697.5nm的吸收值;
6. 計(jì)算待測(cè)樣品中氨含量。
相關(guān)產(chǎn)品鏈接: