志賀氏菌檢測(cè)新國(guó)標(biāo)厭氧條件增菌的解決方案
瀏覽次數(shù):3818 發(fā)布日期:2012-7-9
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2012年5月17日,中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒布GB 4789.5-2012《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 志賀氏菌檢驗(yàn)方法》,新國(guó)標(biāo)將于2012年7月17日起實(shí)施。
該標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施之日起,原GB/T4789.5-2003標(biāo)準(zhǔn)作廢。
解讀新國(guó)標(biāo)GB4789.5-2012
為了提高食品中志賀氏菌檢出率,降低操作者的操作要求,增菌過程的調(diào)整是本次新標(biāo)準(zhǔn)最大的變動(dòng)之處。
兩份國(guó)標(biāo)方法之間增菌部分的主要區(qū)別如下表所示:
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GB4789.5-2003 |
GB4789.5-2012 |
增菌培養(yǎng)基 |
GN增菌肉湯 |
志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素 |
取樣操作 |
無菌均質(zhì)器或研缽 |
無菌均質(zhì)器或拍擊式均質(zhì)器 |
增菌培養(yǎng)條件 |
37℃,有氧培養(yǎng)6~8小時(shí) |
41.5℃,厭氧培養(yǎng)16~20小時(shí) |
…… |
…… |
…… |
更改增菌培養(yǎng)方式的最終目的是最大程度消除食物樣品中的雜菌背景對(duì)于檢測(cè)培養(yǎng)的影響。
1、厭氧環(huán)境41.5℃培養(yǎng),可排除需氧菌和大部分不耐熱的厭氧菌與兼性厭氧菌干擾;
2、使用志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素進(jìn)行增菌,可排除革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性腸桿菌(如變形桿菌等)的干擾;
減少雜菌背景的同時(shí),也降低了雜菌在增菌過程中對(duì)于數(shù)量很少的志賀氏菌的競(jìng)爭(zhēng)抑制作用,可有效地提高志賀氏菌的擴(kuò)增量,有助于進(jìn)一步的分離與鑒定。
厭氧增菌的解決方案
不同于常規(guī)厭氧培養(yǎng),新國(guó)標(biāo)中的增菌培養(yǎng)是在無菌三角燒瓶或無菌勻質(zhì)袋中進(jìn)行,故厭氧袋因容積限制而無法使用,故我們推薦如下解決方案:
解決方案一:
每日樣品檢測(cè)量80-120份的實(shí)驗(yàn)室,建議配備AW500SG/TG全能型厭氧工作站。
型號(hào) AW500SG/TG
最大培養(yǎng)容量: 120只(250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
80 只(500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
傳輸艙容量: 6只(250/500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
解決方案二:
每日樣品檢測(cè)量70~90份的實(shí)驗(yàn)室,建議配備AW400SG/TG全能型厭氧工作站。
型號(hào) AW400SG/TG
最大培養(yǎng)容量: 90只(250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
70只(500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
傳輸艙容量: 6只(250/500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
解決方案三:
每日樣品檢測(cè)量60~70份的實(shí)驗(yàn)室,建議配備AW300SG通用型厭氧工作站。
型號(hào) AW300SG
最大培養(yǎng)容量: 70只(250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
60只(500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
傳輸艙容量: 1只(250/500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
(* 三角燒瓶底徑需小于100mm,高度小于200mm)
解決方案四:
每日樣品檢測(cè)量30~50份的實(shí)驗(yàn)室,建議配備AW200SG迷你型厭氧工作站。
型號(hào) AW200SG
最大培養(yǎng)容量: 50只(250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
30只(500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
傳輸艙容量: 1只(250/500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
(* 三角燒瓶底徑需小于100mm,高度小于200mm)
解決方案五:
每日樣品檢測(cè)量極少(≤5份)的實(shí)驗(yàn)室,建議配備large 、standard 或crystal厭氧罐,此方案需要將厭氧罐放入生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
型號(hào) large 厭氧罐(不銹鋼)
最大培養(yǎng)容量: 2只(250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
1只(500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
型號(hào) standard 厭氧罐(不銹鋼)
最大培養(yǎng)容量: 1只(250/500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)
型號(hào) crystal 厭氧罐(透明,聚碳酸酯)
最大培養(yǎng)容量: 1只(250/500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶)