大鼠神經(jīng)功能缺損的詳細(xì)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
1.神經(jīng)行為評(píng)分
在梗死后24 h,按照Masao Shmi izu-Sasamata的方法[3]對(duì)所有大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為評(píng)分,評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)包括:①自主活動(dòng)的程度,②左前肢偏癱,③提尾時(shí)左前肢伸不直,④抗側(cè)推能力,⑤向左傾斜度,⑥向左環(huán)行度,⑦對(duì)觸須的反應(yīng)。以上指標(biāo)無(wú)異常為0分,中等異常為1分,嚴(yán)重異常為2分,將各項(xiàng)評(píng)分相加,總分為0~14分。
2.動(dòng)物行為學(xué)評(píng)定
①0分:無(wú)神經(jīng)損傷癥狀;
②1分:不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪;
③2分:向癱瘓側(cè)轉(zhuǎn)圈;
④3分:向?qū)?cè)傾倒;
⑤4分:不能自發(fā)行走,意識(shí)喪失。
3.大鼠神經(jīng)損傷嚴(yán)重缺損評(píng)分(Neurological Severity Scores,NSS):
0分:神經(jīng)功能正常;
1分:輕度神經(jīng)功能缺損(提尾時(shí)左前肢屈曲);
2分:中度神經(jīng)功能缺損(行走時(shí)向左側(cè)轉(zhuǎn)圈);
3分:中度神經(jīng)功能缺損(向左側(cè)傾斜);
4分:無(wú)自發(fā)行走,意識(shí)減退;
5分:與缺血有關(guān)的死亡。
4. 平衡木試驗(yàn)(Beam Balance Test, BBT):
把大鼠置于一寬1.5cm的木條上。木條一端懸空,另一端固定于一塊40x40cm的平板中心,以防止大鼠從木條上爬到桌面上使實(shí)驗(yàn)失敗。木條下備有軟墊以防大鼠掉下時(shí)跌傷。根據(jù)2分鐘內(nèi)大鼠的平衡能力行神經(jīng)學(xué)評(píng)分。正常大鼠的平衡能力在1-2分鐘。
平衡試驗(yàn)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):
1 在木條上站穩(wěn),無(wú)搖晃,持續(xù)2分鐘
2 在木條上站穩(wěn),左右搖晃,未滑下,持續(xù)2分鐘
3 在木條上站立,下滑至一側(cè),未掉下,持續(xù)2分鐘
4 在木條上站立不到2分鐘即從木條上掉下
5 試圖在木條上站穩(wěn)、但在數(shù)秒鐘即掉下
6 無(wú)任何站立能力
5. 抬高身體搖擺試驗(yàn)(Elevated Body Swing Test, EBST):
用于測(cè)量運(yùn)動(dòng)不對(duì)稱,EBST測(cè)量時(shí)首先用手提起大鼠的尾根部,大鼠頭部懸垂距平面5cm左右,這時(shí)大鼠頭部會(huì)向左側(cè)或右側(cè)旋轉(zhuǎn),向單測(cè)旋轉(zhuǎn)的角度大于100時(shí)為計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn),記錄旋轉(zhuǎn)的方向和角度,一次試驗(yàn)后讓大鼠休息1min,再進(jìn)行下一次實(shí)驗(yàn),重復(fù)試驗(yàn)20次,記錄總的次數(shù)和方向。
6. 一次性被動(dòng)回避平臺(tái)試驗(yàn)(Step-down Passive Avoidance Test, SDPAT)是一種用于研究記憶的簡(jiǎn)單行為模型,主要適用于研究記憶的鞏固( memory consolidation)和記憶的保持(memory retention)。該模型含有一定的空間記憶成份,試驗(yàn)箱是一個(gè)長(zhǎng)方形的封閉空間,高為60cm,箱內(nèi)有一較小的平臺(tái)9 cm X 9 cm, 高出底面約2 cm,動(dòng)物只能不十分舒服地堅(jiān)持在平臺(tái)上,如跑下平臺(tái)(銅棒,通電,30 V)即遭到電擊。訓(xùn)練過(guò)程是這樣的:首先把動(dòng)物放在平臺(tái)上,大鼠一般在平臺(tái)上只能停留幾分鐘,就會(huì)跑下來(lái),但由于底面的金屬條是通電的,大鼠在尋找一段時(shí)間后,能夠找回平臺(tái)。這時(shí)第一次試驗(yàn)結(jié)束,24 h后,再次把大鼠放在平臺(tái)上,這時(shí)底面的金屬條并不通電,記錄大鼠在平臺(tái)上滯留的時(shí)間,根據(jù)測(cè)試間隔時(shí)間的長(zhǎng)短和在平臺(tái)上滯留時(shí)間的多少來(lái)判定大鼠對(duì)上次電擊的記憶保持能力。
7. 水迷宮試驗(yàn)(Water Maze Test, WMT):
用于測(cè)量大鼠空間學(xué)習(xí)能力。每組于移植后的第7周進(jìn)行。在相同室溫(25±2)0C和象限條件下,將3組動(dòng)物連續(xù)訓(xùn)練4d,2 次/d,每次限定時(shí)間為120s,超過(guò)120s 仍找不到平臺(tái)者記為未找到平臺(tái),2 次間隔為10min,第5天測(cè)試。