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Barnes迷宮--學(xué)習(xí)記憶的行為學(xué)研究方法(4)

瀏覽次數(shù):2409 發(fā)布日期:2011-6-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
巴恩斯迷宮(Barnes maze)是美國學(xué)者Carol A Barnes1979年發(fā)明的用于檢測動(dòng)物空間記憶的模型。與水迷宮和放射臂迷宮類似,巴恩斯迷宮利用嚙齒類動(dòng)物避光喜暗且愛探究的特性而建立的。動(dòng)物獲得的強(qiáng)化是從一個(gè)光亮、敞開的平臺(tái)上面逃往位于平臺(tái)下面的一個(gè)黑暗、狹小的箱里。該箱稱為目標(biāo)箱。經(jīng)過訓(xùn)練,動(dòng)物學(xué)習(xí)并記憶目標(biāo)箱的位置。該模型對動(dòng)物的應(yīng)激性刺激較小,既不像放射臂迷宮那樣需要禁食,也不像水迷宮那樣應(yīng)激性強(qiáng)。因此,在記憶研究中較為常用。尤其適用于與應(yīng)激相關(guān)的記憶研究以及基因敲除小鼠的行為表型研究。
(一)   實(shí)驗(yàn)設(shè)備  不同廠家生產(chǎn)的巴恩斯迷宮大體相同。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司研發(fā)的巴恩斯迷宮。它是由加強(qiáng)的醫(yī)用有機(jī)板成的一個(gè)圓形平臺(tái),可旋轉(zhuǎn),直徑122cm。平臺(tái)周邊有18個(gè)或40個(gè)等距離圓洞,分別用于大鼠和小鼠;洞的直徑分別為10cm和5cm。其中一個(gè)洞(稱為目標(biāo)洞)與一暗箱(即目標(biāo)箱)相聯(lián)。其他圓洞則為空洞,不與任何物體相聯(lián)。暗箱設(shè)置成抽屜式,便于從中取出動(dòng)物。從平臺(tái)表面看不見目標(biāo)箱。迷宮抬高140cm。動(dòng)物通過目標(biāo)洞可逃至目標(biāo)箱內(nèi)。對于小鼠巴恩斯迷宮的設(shè)置,也有不同的考慮。例如,有的將迷宮直徑縮短(如88cm),洞的數(shù)目也減少(例如12個(gè)),洞的直徑則與上述相當(dāng)。據(jù)認(rèn)為,這樣的設(shè)置有利于增加小鼠獲得比率。但不管用哪種設(shè)置,實(shí)驗(yàn)操作都類似。通過訓(xùn)練,動(dòng)物獲得對目標(biāo)洞的空間定位。
Barnes迷宮(上海欣軟制造)
(二)   實(shí)驗(yàn)方法
1.  實(shí)驗(yàn)開始前一天,將動(dòng)物單個(gè)從目標(biāo)洞置于目標(biāo)箱內(nèi)適應(yīng)4min。
2.  將動(dòng)物置于迷宮中央的塑料圓桶(直徑20cm,高27cm)內(nèi)限制活動(dòng)5s。
3.  移開圓桶,啟動(dòng)計(jì)時(shí)器,實(shí)驗(yàn)者在擋簾后進(jìn)行觀察。動(dòng)物四肢均進(jìn)入目標(biāo)箱,則計(jì)為一次逃避(escape),并讓動(dòng)物在箱內(nèi)停留30s。每一動(dòng)物一次最多觀察4min。在此期間如果動(dòng)物仍然找不到目標(biāo)箱,則將動(dòng)物從迷宮移開,放入目標(biāo)箱內(nèi)并停留30s。利用這一間隙清潔迷宮。動(dòng)物每天訓(xùn)練兩次,連續(xù)5~6d。
4.  從第二次訓(xùn)練開始,每次訓(xùn)練之前將迷宮隨機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)一至數(shù)個(gè)洞的位置,但目標(biāo)箱始終固定在同一方位。這樣做的目的是防止動(dòng)物依靠氣味、而非憑借記憶來確定目標(biāo)洞的位置。
實(shí)驗(yàn)記錄以下參數(shù):探究任何一個(gè)洞的潛伏期、到達(dá)目標(biāo)箱的潛伏期和每只動(dòng)物的錯(cuò)誤次數(shù)(一次錯(cuò)誤定義為動(dòng)物把頭伸向或探究任何一個(gè)非目標(biāo)洞,包括專注于探究同一個(gè)非目標(biāo)洞)。
(三)   注意事項(xiàng)
1.  動(dòng)物記憶力減弱,主要表現(xiàn)為動(dòng)物成功獲得一次逃避之前的錯(cuò)誤次數(shù)比對照組增多,其次到達(dá)目標(biāo)箱的潛伏期延長;探究任意洞的潛伏期可以延長,也可沒有明顯變化。記憶力增強(qiáng)則表現(xiàn)相反,即錯(cuò)誤次數(shù)減少,到達(dá)目標(biāo)箱的潛伏期縮短。
2.  動(dòng)物在迷宮遺留的氣味對下一只動(dòng)物的迷宮操作影響很大。因此,除在兩次訓(xùn)練之間旋轉(zhuǎn)迷宮外,還要用70%酒精清潔迷宮,以消除殘留氣味對下一只動(dòng)物的導(dǎo)向作用。
3.  巴恩斯迷宮平臺(tái)類似一個(gè)大敞箱(open field),任何影響敞箱行為(自發(fā)活動(dòng))的因素(例如藥物處理或基因改變)均可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4.  品系差異   小鼠的愛探究特性使其成為巴恩斯迷宮研究的理想動(dòng)物,但不同品系的小鼠在該實(shí)驗(yàn)中的行為表現(xiàn)差別很大。例如,129S6小鼠在巴恩斯迷宮中很少有探究行為,因而很難找到目標(biāo)洞。而C57BL/6J小鼠則有相當(dāng)多的探究行為,適合于巴恩斯迷宮實(shí)驗(yàn)。這一點(diǎn)在基因改變小鼠的記憶研究中尤其要注意。

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