小鼠單抗Ig類/亞類鑒定用ELISA試劑盒使用說明書
您好!感謝您選擇了我們的產(chǎn)品,請您在讀完此說明書后再開始您的實驗,這對您順利完成實驗很有幫助。
一、試劑原理:本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類(可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA)。采用小鼠抗體共有位點的二抗包被微孔板,與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合,再加入HRP標記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應,最后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止,再通過酶標儀檢測吸光度來判斷被測單克隆抗體的類或亞類。本試劑盒具有極高的分辨率,是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。
二、組成成分:
酶標板 含自封袋1個 |
192孔 |
標本稀釋液 |
30ml |
通用陽性對照 內(nèi)含小鼠 Ig(G1\G2a\G2b\G3\M\A) |
2ml |
顯色劑A |
20ml |
酶標二抗 6種 |
6×4ml |
顯色劑B |
20ml |
20×清洗液 |
50mL |
反應終止液 |
20ml |
封板膜 |
4張 |
說明書和加樣圖 |
各1份 |
三、使用范圍:用于小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。
四、使用方法:
1、首先將試劑盒恢復室溫(大約30分),然后用純水把清洗液配成工作濃度(一份濃縮清洗液加19份純水)。
2、取出酶標板。每個標本需要6孔,陽性對照6孔。多余的用自封袋保存,記得放入干燥劑。
3、將細胞培養(yǎng)上清(或特異親和純化的抗體)50μl加入酶標微孔板,每個標本加6孔,陽性對照也是加6孔每孔50μl。然后每孔再加入50μl標本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
4、棄去板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。再在每個標本的6孔中分別加入6種酶標二抗各100μl,通用陽性對照的6孔也一樣。在加樣圖上或酶標板上做好標記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
5、吸棄板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl,換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。
6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果,看顯色藍的那個孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類。更可將反應終止液(每孔50μl)終止反應后用酶標儀450nm測定波長,630nm參考波長雙波長測定結(jié)果,參看高值孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類。陽性對照0D小于0.5實驗無效,需要重做。
五、產(chǎn)品特點:高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定。當然您如果覺得很多試劑自己可以準備想省一筆費用,那您可以登陸網(wǎng)站選擇我們?yōu)槟鷾蕚涞暮喲b抗體鑒定產(chǎn)品C030215。當然您也可以下次把標本交給我們來做并且不會增加太多費用!!
六、保存條件:2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過于頻繁開啟使用有可能因此使效期縮短。
七、注意事項:
1、雖然本試劑盒過期后很久還有使用價值但還是請您在有效期內(nèi)使用。
2、在檢測腹水類單抗時要稀釋到1/5萬,雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復雜,有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的C030215抗體鑒定試劑。它會給您帶來滿意的結(jié)果。
3、手洗板子時一定要把孔加滿,停留10秒然后棄盡,最后要拍干凈。特別是在酶標二抗溫育后洗板時一定要把酶吸出而不是甩出,要吸凈。這個在手工洗板時對結(jié)果很重要。
4、一次沒用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好,隨盒存放。
5、拿放板子時不要劇烈抖動,以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯誤結(jié)果。
6、出現(xiàn)異常結(jié)果請隨時咨詢我們。
特別提示:不具備ELISA基礎(chǔ)知識和操作的人員不要完成此實驗或類似實驗,因為這可能會給您帶來錯誤的結(jié)果和不必要的損失