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                                                              English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 混合劑技術(shù)純化人外周血單核細(xì)胞

                                                              混合劑技術(shù)純化人外周血單核細(xì)胞

                                                              瀏覽次數(shù):1986 發(fā)布日期:2011-1-17  來源:www.pricells.com.cn
                                                                    混合劑技術(shù)純化人外周血單核細(xì)胞                         

                                                              試劑和器材: 
                                                              1. 抗凝血劑:100mmol/L 乙二胺四乙酸或38g/L檸檬酸鈉;
                                                              2. Hepes緩沖生理鹽水(HBS):8.5g/L NaCl、10mmol/L Hepes-NaOH,pH7.4;
                                                              3. OptiPrepTM;
                                                              4. 臺式低速離心機(jī);
                                                              5. 巴斯德吸管(短型和長型);

                                                              實驗方法:
                                                              1. 用乙二胺四乙酸(2mmol/L終濃度)或檸檬酸鈉(38g/L終濃度)作為抗凝劑來收集靜脈血;
                                                              2. 在合適的帶帽離心管(可容納5—10ml樣品的15ml管)中,全血與OptiPrepTM(分別為10倍體積和1.25倍體積)輕柔但徹底地混合(反復(fù)顛倒幾下);
                                                              3. 在頂端加入約0.5ml Hepes緩沖生理鹽水,并且在20℃,1500g下離心30min;
                                                              4. 用緩慢減速程序或不制動的方法使轉(zhuǎn)子減速;
                                                              5. 從凹液面向下吸取外周血單核細(xì)胞直至距細(xì)胞沉淀約1cm處;
                                                              6. 用2倍體積的Hepes緩沖生理鹽水稀釋收集到的外周血單核細(xì)胞,再在250g—500g離心5—10min以沉淀細(xì)胞;

                                                              來源:武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司
                                                              聯(lián)系電話:027-87490190
                                                              E-mail:[email protected]

                                                              標(biāo)簽: 原代細(xì)胞
                                                              用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
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