等密度離心法去除紅細(xì)胞和死細(xì)胞                                                         

器材和試劑： 
所有直接接觸細(xì)胞的用品和試劑必須無菌。
1. 標(biāo)注體積刻度的試管（圓錐形底）；
2. 巴斯德吸管（短型和長(zhǎng)型）；
3. 10ml刻度吸管和洗耳球或移液裝置；
4. 臺(tái)式離心機(jī)；
5. 淋巴細(xì)胞分離液或類似試劑；
6. 培養(yǎng)基；

實(shí)驗(yàn)方法：
1. 重懸細(xì)胞使之達(dá)到5×10⁶—10⁷個(gè)/ml的高濃度。在一個(gè)離心管中加入10ml淋巴細(xì)胞分離液，用巴斯德吸管或10ml移液管小心將5ml的原代細(xì)胞懸液加于淋巴細(xì)胞分離液面上。將容器傾斜一個(gè)角度，沿容器壁慢慢地將細(xì)胞懸液滴下，而不是直接滴到淋巴細(xì)胞分離液表面。目的是在兩種液體之間得到一個(gè)清晰的界面，以便更好地分離；
2. 不制動(dòng)1000r/min離心試管20min（注：離心時(shí)緩慢地減速可使淋巴細(xì)胞分離液與培養(yǎng)基之間形成清晰的界面）；
3. 從離心機(jī)中小心地取出容器，觀察兩液面之間的界面，可見一乳狀黃色細(xì)胞帶。紅細(xì)胞和死細(xì)胞形成沉淀沉于容器底部；
4. 用一個(gè)巴斯德吸管吸出界面可見的細(xì)胞層，轉(zhuǎn)入一個(gè)離心管；
5. 向收集的細(xì)胞中加入新鮮培養(yǎng)基并混勻。1000r/min離心5min，重復(fù)兩次，洗去細(xì)胞表面的淋巴細(xì)胞分離液；
6. 將細(xì)胞重懸于已知體積的培養(yǎng)基中，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力測(cè)定；