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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)及其飼育環(huán)境的技術(shù)指標(biāo)

瀏覽次數(shù):24864 發(fā)布日期:2010-12-29  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)及其飼育環(huán)境的技術(shù)指標(biāo)
 
      按照《GB 14925-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境及設(shè)施國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是指經(jīng)人工飼育,對(duì)其攜帶微生物實(shí)行控制,遺傳背景明確或者來(lái)源清楚的用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定以及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。在微生物控制方面,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四個(gè)等級(jí):
      一級(jí) 普通動(dòng)物(conventional animal: CV)
      普通動(dòng)物不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病的病原。
      二級(jí) 清潔動(dòng)物(clean animal: CL)
      清潔動(dòng)物除要求必須不帶有人獸共患病原和烈性傳染病病原及常見(jiàn)傳染病病原之外,還要求排除對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究干擾大的病原體的動(dòng)物。清潔級(jí)動(dòng)物已是我國(guó)目前主要使用的質(zhì)量控制等級(jí)的動(dòng)物,已被廣泛地應(yīng)用于生命科學(xué)研究、新藥研制和安全評(píng)價(jià)等領(lǐng)域的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之中,發(fā)揮了清潔級(jí)動(dòng)物,易于質(zhì)量控制,非實(shí)驗(yàn)因素干擾少,有較好的敏感性和可重復(fù)性的優(yōu)點(diǎn)。
      三級(jí) 無(wú)特定病原體動(dòng)物(specific pathogen free animal: SPF)
      無(wú)特定病原體動(dòng)物是指機(jī)體內(nèi)無(wú)特定的微生物和寄生蟲(chóng)存在的動(dòng)物,但非特定的微生物和寄生蟲(chóng)是容許存在的。故實(shí)際上是指無(wú)傳染病的健康動(dòng)物。這類(lèi)動(dòng)物是目前國(guó)外使用最廣泛的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,它的來(lái)源,既可來(lái)自無(wú)菌動(dòng)物繁育的后裔,亦可經(jīng)剖胎取后,在隔離屏障設(shè)施的環(huán)境中,由SPF親代動(dòng)物撫育。它不帶有對(duì)人或動(dòng)物本身致病的微生物,但不能排除可經(jīng)胎盤(pán)屏障垂直傳播的微生物。
      四級(jí) 無(wú)菌動(dòng)物(germ free animal: GF)和悉生動(dòng)物(Gnotobiotic animal: GN)
      無(wú)菌動(dòng)物是指除清潔動(dòng)物應(yīng)排除的病原外,不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原。無(wú)菌動(dòng)物是在無(wú)菌屏障系統(tǒng)中,剖腹取出胎兒,飼養(yǎng)繁育在無(wú)菌隔離器中,飼料、飲水經(jīng)過(guò)消毒,定期檢驗(yàn),證明動(dòng)物體內(nèi)外均無(wú)一切微生物和寄生蟲(chóng)(包括大部分病毒)的動(dòng)物。無(wú)菌動(dòng)物的“菌”主要是指細(xì)菌,而嚴(yán)格來(lái)說(shuō),還包括真菌、立克次氏體、支原體和病毒等微生物及各種寄生蟲(chóng)。而所謂“無(wú)”卻不是絕對(duì)的,不過(guò)是根據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)知識(shí)和檢查方法在一定時(shí)期內(nèi)不能檢出已知的微生物和寄生蟲(chóng)而已。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,現(xiàn)在認(rèn)為是無(wú)菌的動(dòng)物或許將來(lái)可以檢出微生物和寄生蟲(chóng)而不是無(wú)菌動(dòng)物,因?yàn)檫@個(gè)“無(wú)”是相對(duì)而言的。到目前為至,尚未確立無(wú)菌動(dòng)物的微生物檢定法,因此,研究者的檢定方法各式各樣,其中病毒和立克氏體的檢查尚有相當(dāng)多的問(wèn)題。例如,在無(wú)菌動(dòng)物中供實(shí)驗(yàn)室使用最多的無(wú)菌小鼠,用電子顯微鏡檢查證明,胸腺細(xì)胞中仍有存在白血病病毒的例子,因而,現(xiàn)在的所謂無(wú)菌動(dòng)物,指動(dòng)物體內(nèi)外未能檢出細(xì)菌、真菌、原蟲(chóng)、內(nèi)外寄生蟲(chóng)的動(dòng)物較妥當(dāng)。悉生動(dòng)物也稱(chēng)已知菌動(dòng)物或已知菌叢動(dòng)物(Anima with Known Bacterial Flora),是指用與無(wú)菌動(dòng)物相同的方法取得飼養(yǎng)(剖腹取胎,在隔離器內(nèi)飼養(yǎng))、但明確的物體內(nèi)所給予的已知微生物的動(dòng)物,即凡含有已知的單菌(Monoxenie)、雙菌(Dixenie)、三菌(Trixenie)或多菌(Polyxenie)的動(dòng)物。由于悉生動(dòng)物和無(wú)菌動(dòng)物一樣是放在無(wú)菌隔離器內(nèi)飼養(yǎng)的,因此選用此種動(dòng)物作實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性是很高的,可排除動(dòng)物體內(nèi)帶有的各種不明確的微生物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,常用于研究微生物和宿主動(dòng)物之間的關(guān)系,并可按研究目的來(lái)選擇某種微生物。
 
      不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物需要在不同等級(jí)的環(huán)境和設(shè)施中飼育,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼育環(huán)境分為三類(lèi),即普通環(huán)境、屏障環(huán)境、隔離環(huán)境。每類(lèi)環(huán)境都有嚴(yán)格的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),詳見(jiàn)表1和表2。普通環(huán)境:該環(huán)境設(shè)施符合動(dòng)物居住的基本要求,不能完全控制傳染因子,適用于飼育教學(xué)等用途的普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。屏障環(huán)境:該環(huán)境設(shè)施適用于飼育CL實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。進(jìn)入屏障的人、動(dòng)物和物品必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的微生物控制。空氣經(jīng)低效、中效、高效過(guò)濾器進(jìn)入屏障系統(tǒng),結(jié)凈度達(dá)到10000級(jí),利用空調(diào)送風(fēng)系統(tǒng)形成清潔走廊、動(dòng)物房、污染走廊、室外的靜壓差梯度,以防止空氣逆向形成的污染?諝、人、動(dòng)物、物品的走向采用單向流通路線。工作人員工作時(shí)要在淋浴后穿著無(wú)菌工作服、口罩、帽子以盡量減少和動(dòng)物的直接接觸。 隔離環(huán)境:該環(huán)境設(shè)施采用無(wú)菌隔離裝置以保存無(wú)菌或無(wú)外來(lái)污染動(dòng)物。隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備均為無(wú)菌,動(dòng)物和物料的動(dòng)態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng),該系統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對(duì)隔離,又能滿足轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)物時(shí)保持內(nèi)環(huán)境一致。該環(huán)境設(shè)施適用于飼育SPF、悉生(Gnotobiotic)及無(wú)菌(germ free)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。工作人員只能通過(guò)隔離裝置上的橡膠手套來(lái)進(jìn)行飼養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。物品是通過(guò)包裝消毒后,由滅菌渡艙或傳遞窗傳入;動(dòng)物是經(jīng)由無(wú)菌剖腹產(chǎn)的方法進(jìn)入;進(jìn)入隔離裝置的空氣,應(yīng)經(jīng)高效過(guò)濾,保證隔離裝置內(nèi)空氣潔凈度達(dá)100級(jí),無(wú)菌并維持正壓狀態(tài)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要也可維持負(fù)壓狀態(tài),但需要配置空氣排放裝置,保證空氣排放符合標(biāo)準(zhǔn)。
表1  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育、生產(chǎn)設(shè)施環(huán)境指標(biāo)(靜態(tài))
項(xiàng) 目
指 標(biāo)
小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠
犬、猴、貓、兔、小型豬
普通環(huán)境
屏障環(huán)境
隔離環(huán)境
普通環(huán)境
屏障環(huán)境
隔離環(huán)境
屏障環(huán)境
溫度,℃
18~29
20~26
16-28
20-26
16-28
日溫差,℃≤
-
4
-
4
4
相對(duì)溫度,%
40-70
換氣次數(shù),次/h
8-10
10-201
20-50*
8-10
10-201
20-501
10-202
氣流速度,m/s
0.1-0.2
壓強(qiáng)梯度,Pa
-
20-502
100-150
-
20-502
100-150
20-502
空氣潔凈度,級(jí)
-
10000
100
-
10000
100
10000
菌數(shù),個(gè)/皿≤
30
3
無(wú)檢出
30
3
無(wú)檢出
3
氨濃度 mg/m3
14
噪聲dB ≤
60
照度,lx
工作照度
150-300
動(dòng)物照度
15-20
100-200
5-10
晝夜明暗交替時(shí)間,h
12/12或10/14
注:表中氨濃度指標(biāo)為動(dòng)態(tài)指標(biāo)。
1一般采用全新風(fēng),保證動(dòng)物室有足夠的新鮮空氣。如果先期去除了粉塵顆粒物和有毒有害氣體,不排除使用循環(huán)空氣的可能,但再循環(huán)空氣僅限于同一單元,新鮮空氣不得少于50%。并保證供風(fēng)的溫、濕度參數(shù)。
2單走廊設(shè)施必須保證飼育室、實(shí)驗(yàn)室壓強(qiáng)最高。
 
表2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施(設(shè)備3)環(huán)境指標(biāo)(靜態(tài))
項(xiàng) 目
指 標(biāo)
小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠
犬、猴、貓、兔、小型豬
普通環(huán)境
屏障環(huán)境
隔離環(huán)境
普通環(huán)境
屏障環(huán)境
隔離環(huán)境
屏障環(huán)境
溫度,℃
19-26
20-25
 
16-26
18-22
 
16-26
日溫差,℃ ≤
4
3
 
4
3
 
3
相對(duì)濕度,%
40-70
換氣次數(shù),次/h
8-10
10-201
20-501
8-10
10-201
20-501
20-501
氣流速度,m/s
0.1-0.2
壓強(qiáng)梯度,Pa
-
20-502
100-150
-
20-502
100-1502
100-150
空氣潔凈度,級(jí)
-
10000
100
-
10000
100
100
落下菌數(shù),個(gè)/皿 ≤
30
3
無(wú)檢出
30
3
無(wú)檢出
無(wú)檢出
氨濃度 mg/m3 ≤
14
噪聲 dB ≤
60
照度,lx
工作照度
150-300
動(dòng)物照度
15-20
100-200
5-10
晝夜明暗交替時(shí)間,h
12/12或10/14
注:表中氨濃度指標(biāo)為動(dòng)態(tài)指標(biāo)。
1一般采用全新風(fēng),保證動(dòng)物房有足夠的新鮮空氣。如果先期去除了粉塵顆粒物和有毒有害氣體,不排除使用循環(huán)空氣的可能,但再循環(huán)空氣應(yīng)取自于無(wú)污染區(qū)域或同一單元,新鮮空氣不得少于50%,并保證供風(fēng)的溫、濕度參數(shù)。
2單走廊設(shè)施必須保證飼育室、實(shí)驗(yàn)室壓強(qiáng)最高。
3此處動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備系指動(dòng)物飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)時(shí),保障動(dòng)物所處的局部環(huán)境應(yīng)達(dá)到本環(huán)境指標(biāo)的設(shè)備。
 
參考文獻(xiàn)
1、中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 14925-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境及設(shè)施

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