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                                                              English | 中文版 | 手機版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 體內(nèi)DPSCs的成牙和成骨分化

                                                              體內(nèi)DPSCs的成牙和成骨分化

                                                              瀏覽次數(shù):1760 發(fā)布日期:2010-12-10  來源:www.pricells.com.cn
                                                                                                  體內(nèi)DPSCs的成牙和成骨分化

                                                              試劑和材料:
                                                              1. 無鎂和鈣的PBS平衡鹽溶液(PBSA);
                                                              2. MSC培養(yǎng)基:含2mmol/L 谷氨酰胺的α-MEM,添加15%胎牛血清,0.1mmol/L左旋抗壞血酸磷酸鹽,100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素;
                                                              3. 胰蛋白酶-EDTA溶液:0.05%胰蛋白酶,0.54mmol/L(0.2%)EDTA,無鎂和鈣的PBS平衡鹽溶液溶解;
                                                              4. 凍存管,1.8ml;
                                                              5. 合適的載體(羥基磷灰石/磷酸三鈣載體,HA/TCP);

                                                              實驗方法:
                                                              1. 用MSC培養(yǎng)基培養(yǎng),直到細(xì)胞到達(dá)90%匯合;
                                                              2. 用PBSA洗培養(yǎng)皿,洗3次;
                                                              3. 加足夠體積的胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃孵育;
                                                              4. 確定80%的細(xì)胞已從培養(yǎng)容器表面脫離,然后加MSC培養(yǎng)基;
                                                              5. 500g,離心6min;
                                                              6. 倒掉上清,用MSC培養(yǎng)基重懸細(xì)胞;
                                                              7. 細(xì)胞計數(shù);
                                                              8. 將重懸于MSC培養(yǎng)基的(2-4)×106個細(xì)胞和載體混合,置于1.8ml凍存管中;
                                                              9. 37℃旋轉(zhuǎn)孵育1h;
                                                              10. 無菌條件下,將混合物移植到免疫力低下的小鼠皮下。我們通常使用N1H的bg-nu/nu-xid小鼠進(jìn)行移植;
                                                              11. 在合適的時間點,收集移植物,組織學(xué)檢測。(在HA/TCP載體和bg-nu/nu-xid小鼠體系中,8周的時間足夠DPSCs和SHED形成充分的礦化基質(zhì)。收集的時間點主要決定于體系。)

                                                              來源:武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司
                                                              聯(lián)系電話:027-87490190
                                                              E-mail:[email protected]

                                                              標(biāo)簽: 原代細(xì)胞
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