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                                                              English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 正常角膜緣干細(xì)胞的免疫染色

                                                              正常角膜緣干細(xì)胞的免疫染色

                                                              瀏覽次數(shù):2089 發(fā)布日期:2010-11-5  來源:www.pricells.com.cn
                                                              正常角膜緣干細(xì)胞的免疫染色

                                                              試劑和材料:
                                                              1. 一抗:
                                                              (1) ABCG2-----------------小鼠單克隆BXP-21---------1:100
                                                              (2) 連接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100
                                                              (3) 細(xì)胞角蛋白3(K3)-----小鼠單克隆AE5----------- 1:500
                                                              (4) 細(xì)胞角蛋白12(K12)---兔多克隆J7-------------- 1:200
                                                              2. 二抗;
                                                              (1) 抗小鼠IgG-------------Alexa-488----------------1:2500
                                                              (2) 抗兔IgG---------------Alexa-546----------------1:1500
                                                              3. 封閉抗體:PBSA配制的10%熱滅活羊血清;
                                                              4. Trion X-100;
                                                              5. PBSA;
                                                              6. 多聚甲醛(PFA),將16%原液用PBSA現(xiàn)配成4%的工作濃度;
                                                              7. Immu-Mount防褪色封片劑;
                                                              8. 載玻片和#1蓋玻片;
                                                              9. 共聚焦顯微鏡;

                                                              實(shí)驗(yàn)方法:
                                                              1. 培養(yǎng)在塑料平皿或羊膜上的細(xì)胞;
                                                              2. CMF-Saline G洗一遍;
                                                              3. 用新鮮配制的4% PFA室溫固定15min;
                                                              4. PBSA洗一遍;
                                                              5. 0.1% Triton X-100破膜10min;
                                                              6. 樣本與一抗室溫孵育1h;
                                                              7. PBSA洗2遍;
                                                              8. 加入二抗室溫孵育1h;
                                                              9. 用PBSA洗2遍;
                                                              10. #1蓋玻片,用最小體積的防褪色的封片劑封片;
                                                              11. 在熒光或共聚焦顯微鏡下用40×油鏡對(duì)樣本進(jìn)行觀察;

                                                              來源:武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司
                                                              聯(lián)系電話:027-87490190
                                                              E-mail:[email protected]

                                                              標(biāo)簽: 原代細(xì)胞
                                                              用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊(cè) 忘記密碼
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