氯霉素ELISA檢測(cè)試劑盒
瀏覽次數(shù):1687 發(fā)布日期:2010-8-6
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1 概述
氯霉素ELISA免疫檢測(cè)方法用于定量或定性檢測(cè)受污染樣品中氯霉素的含量。如果需要陽(yáng)性樣品可以通過(guò)HPLC, GC/MS其它的傳統(tǒng)方法來(lái)驗(yàn)證。
2 安全性指導(dǎo)
試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)含有少量的氯霉素。底物中含有TMB。終止液中含有稀硫酸。避免終止液與皮膚和粘膜接觸,如果不小心接觸了請(qǐng)用大量的水沖洗。
3 儲(chǔ)存和穩(wěn)定性
氯霉素ELISA試劑盒應(yīng)該保存在4–8°C。在使用前一定要回復(fù)到室溫(20-25°C)。試劑盒在有效期內(nèi)都可以使用。供應(yīng)的抗體是低壓凍干的(3管)。在做檢測(cè)之前抗體需要用合適的稀釋液稀釋。每次稀釋都要根據(jù)每次測(cè)量的樣品數(shù)定,不要稀釋的太多,因?yàn)橄♂尯笤诒渲袃H能保存1周。
4 原理
原理是直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法。通過(guò)克氯霉素特異性抗體來(lái)識(shí)別氯霉素。樣品中的氯霉素和氯霉素酶結(jié)合物競(jìng)爭(zhēng)與鼠抗氯霉素抗體的結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。氯霉素抗體和包被在微孔板上的羊抗鼠二抗結(jié)合。經(jīng)過(guò)一個(gè)洗滌步驟加入底物溶液,發(fā)生顯色反應(yīng)(產(chǎn)生藍(lán)色)。藍(lán)色的強(qiáng)度和樣品中氯霉素的含量成反比。經(jīng)過(guò)一個(gè)特定的時(shí)間顯色反應(yīng)被終止。用酶標(biāo)儀測(cè)定。通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中氯霉素的含量。
5 試劑盒的限制和干擾因素
樣品中經(jīng)常出現(xiàn)的多種有機(jī)物和無(wú)機(jī)物已近作過(guò)檢測(cè)對(duì)此試劑盒的檢測(cè)結(jié)果并無(wú)干擾。由于化合物的易變質(zhì)性由基質(zhì)反應(yīng)引起的干擾是不可能完全避免的。操作不當(dāng)可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果錯(cuò)誤,比如:試劑盒保存條件不對(duì)、錯(cuò)誤的加液順序、試劑的量沒(méi)有加準(zhǔn)確、孵育的時(shí)間太長(zhǎng)或太短、孵育的溫度太高或太低(低于10°C,高于30°C)。Abraxis氯霉素ELISA試劑盒提供一個(gè)初步檢測(cè)結(jié)果,和其它檢測(cè)方法一樣對(duì)陽(yáng)性結(jié)果要求通過(guò)其它傳統(tǒng)的方法來(lái)驗(yàn)證。
重要性
食物中抗生素對(duì)人類(lèi)的健康有很大的威脅。由于氯霉素的成本低,而且是一種光譜抗生素,發(fā)現(xiàn)最早在發(fā)展中國(guó)家被應(yīng)用。在發(fā)達(dá)國(guó)家氯霉素僅限制用于治療眼病。因?yàn)槁让顾乜梢試?yán)重的損害骨髓,是致命性的。
口服氯霉素治療適當(dāng)?shù)挠糜谥委烳RSA或其它抗體耐藥性感染。氯霉素普遍用做獸藥治療小哺乳動(dòng)物和兩棲動(dòng)物。一種真菌疾病在過(guò)去的30年時(shí)青蛙的數(shù)量減少了三分之一。因?yàn)樵偕系K性貧血、變態(tài)反應(yīng)、促進(jìn)抗藥性的產(chǎn)生的作用,包括歐洲、美國(guó)、加拿大等很多國(guó)家都禁止在動(dòng)物飼料中添加氯霉素。這些國(guó)家也頒布法令凡進(jìn)口的食物都要檢測(cè)氯霉素殘留。確保人們的健康。氯霉素檢測(cè)試劑盒在做一次重復(fù)的情況下可以檢測(cè)40份樣品。在2小時(shí)內(nèi)可以檢測(cè)完。
性能數(shù)據(jù)
敏感性:0.023 ng/mL
重復(fù)性:標(biāo)準(zhǔn)的變異系數(shù)(CVs) <10%,;樣品的變異系數(shù)(CVs) <15%。
選擇性:這個(gè)試劑盒可以檢測(cè)氯霉素以及其他相關(guān)的化合物(檢測(cè)程度不同)。
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