HBV離心分離方法(之一)
瀏覽次數(shù):2635 發(fā)布日期:2006-3-24
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設備:日立CS150GXL超速離心機
S55A 固定角式轉頭
10PC厚壁管(不加蓋實際容量7.3ml,最高轉速55,000rpm)
樣品:HBV陽性血,低速離心后,含HBV血漿
梯度:10pc管 底部:含HBV血漿+KBr 配成ρ=1.32,(約36%w/w),4ml
中部:32.3%(w/w),KBr ρ=1.28, 1ml
上部:1M Nacl ρ=1.06, 2ml
離心參數(shù):50,000rpm(215,000xg),20℃,加速“5”,減速“5”,8小時
離心后:Ⅰ. HBV 帶在中部稍偏上
Ⅱ. 終密度:近離心管表面 ρ=1.12
近離心管底部 ρ=1.29—1.30
全管ρ分布為凸指數(shù)曲線
Ⅲ. O.D.280: 近表面為25,在HBV帶附近突升至130,近管底約140
Ⅳ. RPHA:離心前底部4ml為300,離心后HBV界面處≥4000,有小平臺
結果點評:比較簡單的階梯梯度,很好的分離效果.
作者:余興明 電話:13764301893,