本文介紹一種改良的帶冷卻裝置的浸入式垂直板電泳槽。用不會變形的有機(jī)玻璃制作固定架及控制凝膠厚度的隔條，以代替市售的可壓縮的U形橡膠套。以螺絲固定玻璃板。用醫(yī)用硅膠管密封以完全分隔正負(fù)極電泳緩沖液。經(jīng)試用于蛋白質(zhì)及核酸電泳，效果甚佳。

 

電泳是生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)分析的最常用手段之一，電泳時常要求在某一恒定溫度中進(jìn)行，雖然有各種性能不同的帶恒溫冷卻裝置的進(jìn)口電泳槽，但價格昂貴，每臺數(shù)千至萬元以上。國產(chǎn)的垂直板電泳槽雖亦有帶冷卻裝置的，但制備的膠板的厚度一般只有三種，不能隨意調(diào)整，且常常因?yàn)槭岬暮穸扰c橡膠套隔片的厚度不一致而致上樣孔內(nèi)有殘留凝膠，影響上樣及電泳效果。而且，橡膠隔片的厚度受固定兩半槽時旋轉(zhuǎn)螺絲松緊程度的影響。為此，在工作中我們參考多種現(xiàn)有垂直電泳槽的樣式，自行設(shè)計了一種浸入式垂直板電泳槽，簡單、價廉而效果良好。

 

電泳槽的式樣見附圖。整個槽由有機(jī)玻璃粘合而成，外殼為一個矩形槽，大小為90×150×230cm(可根據(jù)需要適當(dāng)縮小)，中間設(shè)置一個固定架，用以固定玻璃板并分隔電泳槽為正負(fù)極。固定架的具體構(gòu)造是：在短形槽的左右兩側(cè)壁中部的全長上，各粘合兩片寬20mm、長230arm、厚5mm以上的有機(jī)玻璃片，兩片相距20mm。前面兩片各鉆三個有羅紋的孔，后面兩片的底部由一高15mm的有機(jī)玻璃長條相連，成一整塊，呈u形，且與槽底牯合，不漏液體。

 

安裝玻琉板灌膠時，把電泳槽平臥，固定架上有孔的有機(jī)玻璃片朝上，u形架在下。在U形架的上面放一醫(yī)用硅膠管，亦使變成u形，其上放一210×150mm大小的玻璃板，板的底部伸入至電泳槽底部，板上兩側(cè)放兩片隔片，各10-15×230mm，厚度隨電泳時所需凝膠的厚度而定。隔條上再放一塊玻璃板，大小225×150mm，板的底部離電泳槽底部3mm左右。最后，在固定架的羅紋孔上放上塑料螺絲，并逐漸旋緊，此時，硅膠管逐漸被壓扁、壓緊，兩玻璃板亦被固定，整個電泳槽被分成前后兩個槽：前槽為正極，后槽為負(fù)極。兩槽分別放置玻璃彎管，通入恒溫水，即可維持電泳緩沖液及浸于其中的凝膠溫度的恒定。灌聚丙烯酰胺凝膠時，玻璃板底部用瓊脂糖凝膠封好，或用其它方法密封，然后如常灌膠，加梳。

 

浸入式垂直板電泳槽的優(yōu)點(diǎn)是緩沖液槽中裝有恒溫冷卻水裝置，使電泳緩沖液能保持在某一設(shè)定溫度，而電泳凝膠板浸在緩沖液內(nèi)，電泳時凝膠產(chǎn)生的熱量被緩沖液帶走，從而使電泳能在恒定溫度下進(jìn)行。因此電泳效果比不帶恒溫裝置的電泳槽要好。市面銷售的國產(chǎn)垂直板夾心冷卻式電泳槽雖有上述優(yōu)點(diǎn)，但因凝膠板的厚度由橡膠隔條的厚度決定，后者隨固定力量的大小而略有改變；更有甚者，橡膠隔條的厚度與所配的有齒梳的厚度常略有差別，一般是有齒梳略薄一些，這樣，灌制好的凝膠的上樣孔內(nèi)常有少量殘留凝膠，使所加樣品不整齊，嚴(yán)重影響電泳效果。有鑒于此，我們設(shè)計了上述電泳槽，灌制聚丙烯酰胺凝膠板時，凝膠厚度由有機(jī)玻璃或其他塑料做的隔條來控制，而有齒梳和隔條可用同一塊板切割而成，因此厚度均勻，上樣孔生成良好，隨意選用不同厚度的板做隔條和梳，即可制備不同厚度的凝膠板。

 

我們采用旋緊螺絲以固定并壓緊玻璃板和隔條，灌制凝膠板時不會漏液體，同時在較低的一塊玻璃板的后面三邊放置一彈性良好的硅膠管，這樣，旋緊螺絲的同時亦壓緊硅膠管而把兩緩沖液槽完全隔開并密封，電泳時不會發(fā)生短路。上述裝置，經(jīng)試用于蛋白質(zhì)電泳和DNA的單鏈構(gòu)像多態(tài)性(SSCP)分析，效果甚佳。

（生物學(xué)雜志 馮錚，曾山等）