分子生物學實驗室的構(gòu)建方案
瀏覽次數(shù):5060 發(fā)布日期:2009-9-22
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分子生物學實驗室的構(gòu)建方案
分子生物學作為基因工程的上游技術,其實驗的成果和準確性將決定下游所有的步驟和最終的實驗結(jié)果。所以構(gòu)建一個完備的分子生物學實驗室是非常重要的,以下就讓我們來看看構(gòu)建一個分子生物學實驗室需要哪些儀器。
1. 冰箱: 根據(jù)藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要,必須具備不同控溫級別的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質(zhì)樣品等。-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。0-10℃的層析冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實驗。
2. 培養(yǎng)箱:37℃恒溫箱用于細菌的平板培養(yǎng)及分子生物學實驗。
3. 恒溫培養(yǎng)搖床:用于大腸桿菌等生物工程菌種的擴增。
4. 水浴鍋:用于保溫并進行各類實驗。
25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗,各種生物化學酶反應等試驗的保溫。
含低溫的水浴槽可以用于分子生物學的質(zhì)粒與基因片段的連接等實驗及用于42度的大腸桿菌感受態(tài)的熱激。
5. 烘箱:主用于烘干實驗器皿,有些需要溫度高些,有些需要溫度低些。用于RNA方面的實驗用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進行烘干。
6. 超純水機:隨著分子生物學的飛速發(fā)展,許多實驗對水純度的要求越來越高,用自來水、蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水,磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應、組織和細胞培養(yǎng)等。
7. 蒸汽消毒鍋:分子生物學所用大部分試劑,而且實驗用具都應嚴格消毒滅菌。用于小批量物品的隨時消毒。大批實驗物品、試劑、培養(yǎng)基可使用大型消毒且定時進行消毒。
8. 濾器濾膜:不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。
9.各種天平:臺秤、精密電子分析天平,用于精確稱量各類試劑。
10.液體體積的度量:量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯、錐形瓶 等。
11.pH計:測定溶液中H+的直接電位的儀器,主要通過一對電極,在不同的pH溶液中產(chǎn)生不同的電動勢用pH值表示出來;
pH試紙:只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計。而大部分試劑的配制要求嚴格的pH值,需精確度高(小數(shù)點后兩位)的pH計。
12. 分光光度計:光密度、分光光度計是利用物質(zhì)在可見光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質(zhì)的性質(zhì)及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的方便指標之一,通過所產(chǎn)生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值,利用它可進行核酸溶液定量和純度的初步判斷。OD值也可以作為菌濃的檢測指標。
13. 高速離心機:最大轉(zhuǎn)速25000 r/m ,最大離心力89000g。有冷凍和常溫兩種,多用于制備和手收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。
14.超凈工作臺:內(nèi)有紫外燈、照明燈、還應有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設備,是一種提供局部潔凈度的設備。其原理是鼓風機驅(qū)動空氣,經(jīng)過低、中效的過濾器后,通過工作臺面,使實驗操作區(qū)域成為無菌的環(huán)境。
15.電泳系統(tǒng):電泳技術是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征,甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。
電泳系統(tǒng)分為電源和電泳槽,電源需經(jīng)穩(wěn)流通過穩(wěn)壓器,既能提供穩(wěn)定的直流電,又能輸出穩(wěn)定的電壓;水平式電泳槽:一般分為微型電泳槽和大號水平式電泳槽
16.PCR儀:Polymerase Chain Reaction儀,也稱DNA熱循環(huán)儀,基因擴增儀,它是使一對寡核苷酸引物結(jié)合到正負DNA鏈上的靶序列兩側(cè),從而酶促合成拷貝數(shù)百萬倍的靶序列DNA片段,它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進行的DNA變性,引物復性,DNA聚合酶催化的延伸反應三個過程。需要說明的是,有些實驗室可能還需要梯度PCR儀或?qū)嵤露繜晒釶CR儀來進行一些特殊的分子生物學實驗。
17.凝膠成像分析系統(tǒng):百泰克UltraPowerTM可見光凝膠投射儀是一個不錯的選擇,價格不到七千,檢測靈敏度能到pg級(紫外和EB只能到5ng),而且不用紫外和EB,更安全,操作和拍照非常方便。
18.其他設備
1. 微波爐:便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱,電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。
2. 制冰機:用于制造大多數(shù)核酸、蛋白質(zhì)的實驗操作所需的低溫環(huán)境,以減少核酸酶或蛋白質(zhì)酶的水解。
3. 層析裝置:(色譜分離)是一種分離多組分混合物的有效物理方法。
真空印記系統(tǒng),DNA合成/測序儀:這些都是對核酸進行深入研究的必備儀器。
4. 磁力攪拌器:多角度旋轉(zhuǎn)混勻器、快速振蕩混合器:用于混合儀器。
5. 組織勻漿器:超聲組織及細胞破碎器,用其進行樣品的分離提純實驗。
6. 通風櫥:很多溶劑能逸出毒氣,必備柜 ,放射性試驗還要有有機玻璃屏蔽。
7. 玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器:用于酚等有機溶劑的蒸餾。
8. Tip頭、Eppendorf管:
微管移液器tip頭(吸液尖)、Eppendorf管(微量離心管)可洗滌,硅化消毒后反復使用。對一些要求嚴格的實驗,如RNA的提取、保存等操作,應使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應備有常用規(guī)格的離心管(1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細胞培養(yǎng)塑料平板等。
9. 小型設備、用具:
定時器、濾膜、保鮮膜、防護眼鏡鴨嘴鑷、常規(guī)的玻璃或塑料器皿(包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應使用棕色試劑瓶,如飽和酚、巰基乙醇等)、記號筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)