近年來,隨著基因組和蛋白質(zhì)組計劃的實施,對不同蛋白質(zhì)的快速分析,定性以及定量的需求更大,反相液相色譜以其快速簡便,靈敏度高,重復(fù)性好,分辨率高等優(yōu)勢受到人們的重視,已成為一種常備的不可缺少的分析手段,并用于多肽藥物分離中。反相液相色譜與各種質(zhì)譜技術(shù)的結(jié)合也已成為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的重要手段和發(fā)展方向。
Chrom-Matrix公司所研發(fā)的InnovationTM 300Å C18依靠七大創(chuàng)新特點,確定了其在應(yīng)用中的優(yōu)勢地位。
第一, InnovationTM 300Å C18色譜柱在100%水流動相中的穩(wěn)定性,生物分離實際應(yīng)用中經(jīng)常遇見非常極性多肽。如果只有極性多肽, 可以使用InnovationTM HP Amide親水色譜進行分離, 但是實際應(yīng)用中經(jīng)常是極性多肽和不同疏水性多肽混合物。特別是全盲條件下肽圖譜, 希望線性梯度能從100%水流動相開始, 從而最大限度地獲取酶切后不同極性肽的信息, Chrom-Matrix公司研發(fā)的InnovationTM 300Å C18色譜柱能100%在水流動相中穩(wěn)定性非常好。
第二,堿性多肽在InnovationTM 300Å C18色譜柱上有對稱峰形,InnovationTM 300Å C18通過成熟的超臨界流體封端技術(shù), 最大程度了消除硅醇基的酸性效應(yīng), 因此變成"名符其實"高品質(zhì)的純粹反相機理的高效液相色譜柱。因此所有的多肽,包括困難的多肽都能夠獲得對稱峰形。相反, 許多堿性多肽在主要競爭對手色譜柱上峰嚴重拖尾甚至不出來。
第三,在InnovationTM 300Å C18(C8或C5)色譜柱上多肽LC-MS分析無需使用三氟乙酸,在多肽或蛋白質(zhì)反相高效液相色譜分離純化或分析中,三氟乙酸經(jīng)常被使用作為離子對試劑維持峰形。如果只使用紫外檢測,雖然沒有問題,但是,隨著液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)變得越來越流行,生命現(xiàn)象中許多問題越來越依賴液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)痕量分析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和組成的變化(蛋白質(zhì)組學(xué)), 科學(xué)家迫切需要在多肽或蛋白質(zhì)LC-MS分析中避免使用三氟乙酸, 因為三氟乙酸嚴重降低了質(zhì)譜檢測靈敏度。InnovationTM 300Å C18(C8或C5)通過成熟的超臨界流體封端技術(shù), 最大程度了消除硅醇基的酸性效應(yīng), 因此變成"名符其實"高品質(zhì)的純粹反相機理的高效液相色譜柱,在InnovationTM 300Å C18(C8或C5)色譜柱上多肽LC-MS分析無需使用三氟乙酸。
第四, InnovationTM 300Å C18色譜柱在LC - MS分析中沒有泄漏,生命現(xiàn)象中許多問題越來越依賴液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)痕量分析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和組成的變化(蛋白質(zhì)組學(xué))。如果色譜柱在LC - MS分析中有泄漏, 將嚴重干擾分析結(jié)果。InnovationTM 300Å C18色譜柱在LC - MS分析中沒有泄漏, 這在LC - MS分析尤其是蛋白質(zhì)組學(xué)中非常重要!
第五,肽圖譜分辨率,肽圖譜是蛋白質(zhì)化學(xué)一個最經(jīng)典的和最有效的分析方法。InnovationTM 300Å C18色譜柱使用單功能單層高密度鍵合,然后通過超臨界流體封端,因此所有的多肽都能夠獲得良好的保留和對稱的峰形。結(jié)果肽圖譜分辨率最高,從而最大限度地獲取蛋白質(zhì)序列,結(jié)構(gòu)和純度的信息。
第六,色譜柱壽命長,多肽分離純化經(jīng)常使用三氟乙酸。固相多肽合成后經(jīng)常使用HF或三氟乙酸將多肽來切來。殘留的酸經(jīng)常損傷柱壽命。InnovationTM 300Å C18色譜柱使用單功能單層高密度鍵合, 然后通過超臨界流體封端, 使色譜柱極穩(wěn)定,也使色譜柱壽命更長。
第七, InnovationTM 300Å C18色譜柱批次之間的重復(fù)性,以蛋白質(zhì)為代表的生物制藥是一個比小分子制藥復(fù)雜許多的過程。每一步進程和最終產(chǎn)品的質(zhì)量控制不能離開蛋白質(zhì)(多肽)高效反相色譜產(chǎn)品。生物制藥批次之間的重復(fù)性比較差。高效反相色譜產(chǎn)品色譜柱批次之間的重復(fù)性必須確保, 否則會帶來額外的不確定因素, 使本來已經(jīng)復(fù)雜的質(zhì)量控制進一步復(fù)雜化。而InnovationTM 300Å C18色譜柱生產(chǎn)批次之間的差別小于1%。
Chrom-Matrix公司創(chuàng)新研發(fā)的Innovation
TM 300Å C18,正是基于企業(yè)研發(fā)隊伍多年來對于客戶應(yīng)用的深入研究,這樣更好的發(fā)揮出反相液相色譜有效分離各種多肽混合物,特別適用于分子量不大的蛋白質(zhì)和多肽物質(zhì)的分離、純化和鑒定,在蛋白質(zhì)及多肽研究中已得到了廣泛的應(yīng)用,有效的滿足了生命科學(xué)研究中的分離純化需求。