(1)溶劑必須“干凈”,在使用前需經(jīng)過(guò)濾板除去顆粒雜質(zhì),必要時(shí),在進(jìn)樣口再加有塊濾 板,以除去可能由泵帶來(lái)的顆粒
(2)必須控制吸附色譜中溶劑的含水量,過(guò)量水會(huì)使吸附劑活性降低,溶質(zhì)保留值下降
(3)如需在一定PH值下操作,須定期測(cè)定流動(dòng)相的PH值,大氣中的CO2溶解在流動(dòng)相內(nèi)將引起PH值的改變,特別是貯液瓶密閉不嚴(yán)時(shí)這種影響可能更大
(4)軟質(zhì)或半軟質(zhì)填料的溶脹率隨溶劑極性的變化而變化,使用新柱時(shí)應(yīng)先用25~30倍柱容積的合適流動(dòng)相平衡;更換流動(dòng)相時(shí),如果兩種流動(dòng)相不互溶,需采用過(guò)濾溶劑使前一種流動(dòng)相逐步溶解除去(例如,2、2、4-三甲基戊烷換成甲醇時(shí),必須用乙酸已酯或其他溶劑過(guò)渡,直到標(biāo)準(zhǔn)物保留值達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài))
(5)為延長(zhǎng)不易裝填、價(jià)格昂貴的高效柱壽命,可在進(jìn)樣器和色譜柱之間安裝預(yù)柱(預(yù)柱應(yīng)有足夠的雜質(zhì)容量),對(duì)流動(dòng)相和樣品中的顆粒和雜質(zhì)進(jìn)行最后的過(guò)濾;在填充和連接預(yù)柱時(shí),不應(yīng)有額外造成譜帶變寬、分離度下降的死體積;預(yù)柱與色譜柱的體積之比應(yīng)保持為1:15至1:25,以減少譜帶變寬 |
(1)每次開(kāi)機(jī)時(shí),流速和柱壓要逐漸增加,突然迅速增加,會(huì)使柱床受到?jīng)_擊,引起紊亂,產(chǎn)生空隙
(2)在進(jìn)樣前使色譜系統(tǒng)充分平衡,是否平衡可由基線加以判斷
(3)在進(jìn)樣前,檢查色譜系統(tǒng)的各個(gè)接頭,通常由此能發(fā)現(xiàn)是否有漏液現(xiàn)象。如有漏液,空氣會(huì)從漏縫進(jìn)入系統(tǒng)引起基線漂移,影響峰高和峰面積的重復(fù)性
(4)不要把柱接頭上得太緊,否則易損壞接頭螺紋,引起滲漏
(5)不要把柱子放在有氣流的地方或直接放到陽(yáng)光下,氣流和陽(yáng)光都會(huì)使柱子產(chǎn)生溫度梯度造成基線漂移;如果懷疑基線漂移是由溫度梯度引起的,可以設(shè)法使柱子恒溫
(6)若儀器用做常規(guī)分析,樣品種類(lèi)有限,但分析次數(shù)很多,則不妨為每一類(lèi)常規(guī)分析配置一根專(zhuān)用柱,這樣有助于延長(zhǎng)柱壽命
(7)如果懷疑樣品會(huì)污染色譜柱,可以用合適的溶劑(幾百毫升)慢慢沖洗柱子過(guò)夜,第二天早晨再用流動(dòng)相重新平衡柱子(約3min)
(8)在因裝卸、更換、貯存等而挪動(dòng)柱子時(shí),動(dòng)作要輕,不要使其受到碰撞,以免柱床因震動(dòng)產(chǎn)生空隙或通道
(9)柱要加標(biāo)簽,新舊分開(kāi),不要放在溫度變化很大的地方
(10)柱子不用或貯藏時(shí),應(yīng)封閉并貯存在惰性溶劑中(見(jiàn)表1-4) |
固定相 |
硅膠、氧化鋁、正相鍵合相 |
反相色譜填料 |
離子交換填料 |
封存溶劑
禁用溶劑 |
2、2、4-三甲基戊烷
二氯代烷烴、酸、堿性溶劑 |
甲醇
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水
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