培養(yǎng)基配制的操作程序:
1、加瓊脂和無離子水至定容量的70%左右,加熱使瓊脂溶解;
2、瓊脂溶解后,加入培養(yǎng)基母液、激素、糖等,稍加熱使糖溶解;
3、糖溶解,加無離子水至定容量;
4、充分?jǐn)嚢韬,測pH值至要求值;
5、培養(yǎng)基分裝入瓶后滅菌。
組培玻璃器皿的選擇和清洗
1、玻璃器皿的選擇
(1)試管—適合于初代培養(yǎng)、用少量培養(yǎng)基及試驗各種不同配方時選用。
(2)三角錐瓶—適用于各種培養(yǎng)(如固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、大規(guī)模培養(yǎng)或一般培養(yǎng))。
(3)L形管和T形管—為專用的旋轉(zhuǎn)式液體培養(yǎng)試管。
(4)培養(yǎng)皿—適于作單細(xì)胞的固體平板培養(yǎng)、胚和花藥培養(yǎng)和無菌發(fā)芽。
(5)角形培養(yǎng)瓶和圓形培養(yǎng)瓶—適用于液體培養(yǎng)用,如單細(xì)胞和原生質(zhì)體的淺層培養(yǎng)。
(6)果醬瓶—常用作組培苗大量繁殖用的培養(yǎng)瓶。
(7)蘭花瓶—適于蝴蝶蘭、大花蕙花等蘭花的組培苗大量繁殖用的培養(yǎng)瓶。
2、玻璃器皿的清洗
(1)清洗玻璃器皿用的洗滌劑有肥皂、洗潔精、洗衣粉、和鉻酸鉀洗滌液。
(2)清洗時先將器皿中的殘渣除去,用清水洗凈,再用熱的肥皂水或洗潔精洗凈,清水沖洗干凈后用蒸餾水沖洗一次,干后備用。
(3)洗凈的玻璃器皿應(yīng)透明發(fā)亮、內(nèi)外壁水膜均勻,不掛水珠。
組培常用設(shè)備和器材
1、高壓蒸氣滅菌鍋:用于培養(yǎng)基、蒸餾水和接種器械的滅菌消毒。
2、超菌工作臺:用于培養(yǎng)物的無菌操作。(由鼓風(fēng)機、濾板、操作臺、紫外燈和照明燈組成)
3、接種工具:包括雙筒實體顯微鏡、鑷子、剪刀、解剖刀、酒精燈或電熱滅菌器等。
4、培養(yǎng)設(shè)備:包括空調(diào)機、定時器、溫度控制器、增濕機或去濕機、培養(yǎng)架、搖床或旋轉(zhuǎn)床、日光燈、光照培養(yǎng)箱等。
5、化學(xué)實驗及分析設(shè)備:包括天平、酸度計、蒸餾水器、烘箱或玻璃儀器烘干器、電爐、藥品柜、冰箱、晾干架等。