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糖尿病動物造模試劑——鏈脲佐菌素 Streptozocin
別 名:N-(Methylnitrosocarbamoyl)-α-D-glucosamine
分子式:C8H15N3O7 分子量:265.22 CAS:18883-66-4
貨號:177295
價格:785/500mg; 1250/1g
◆ STREPTOZOCIN 誘發(fā)糖尿病動物模型的原理
STREPTOZOCIN對一定種屬動物的胰島β細(xì)胞有選擇性破壞作用,能誘發(fā)許多動物產(chǎn)生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造動物模型。國外有學(xué)者報道選用雄性大鼠制造模型的成模率明顯高于雌性大鼠。1型糖尿病與2型糖尿病動物模型的制備與STREPTOZOCIN注射的劑量有關(guān)系:大劑量注射時,由于直接引起胰島β細(xì)胞的廣泛破壞,可造成1型糖尿病模型;而注射較少量STREPTOZOCIN時,由于只是破壞一部分胰島β細(xì)胞的功能,造成外周組織對胰島素不敏感,同時給予高熱量飼料喂養(yǎng),兩者結(jié)合便誘導(dǎo)出病理、生理改變都接近于人類2型糖尿病的動物模型。
◆ STREPTOZOCIN 誘發(fā)糖尿病動物模型的實驗步驟和注意事項:
1.造膜前的喂養(yǎng)
Ⅰ型糖尿病模型成模比較快,通常大鼠在普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后即可開始造模
Ⅱ型糖尿病模型:高脂飲食誘導(dǎo)加小劑量STREPTOZOCIN。造模前喂以高脂(高糖)飼料,誘發(fā)出胰島素抵抗。
2.高脂(高糖)飼料
高脂(高糖)飼料成分:其中含10蔗糖,10豬油,5膽固醇
由基礎(chǔ)鼠飼料加蔗糖、煉豬油和蛋黃按比搭配制作高脂高糖飼料:其比例為豬油18 ,蔗糖20 ,蛋黃3 ,基礎(chǔ)飼料59 。
3.預(yù)實驗
實驗時STREPTOZOCIN的給藥量應(yīng)參照預(yù)實驗的結(jié)果,盡量不要盲目按照文獻(xiàn)上或他人的給藥量來直接使用,鼠均重和空腹(低糖狀態(tài))抗藥力、禁食時長、注射選時、以及之前飼養(yǎng)過程、測糖選時等都不相同,通過預(yù)實驗來確定符合自己實驗鼠的給藥計量,才是最科學(xué)的。
4.常用給藥劑量
Ⅰ型糖尿病模型:大鼠劑量為70~65mg/Kg
Ⅱ型糖尿病模型:高糖高脂喂養(yǎng)1~2 個月的大鼠,STREPTOZOCIN 劑量在25~40mg/Kg或參考文獻(xiàn)(鼠均重不同,本劑量以200克均重為例)。
5.配置STREPTOZOCIN液
檸檬酸緩沖液的配制:
檸檬酸(FW:210.14) 2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液
檸檬酸鈉(FW:294.10)2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液
鏈脲佐菌素配制液:用時將A、B液按一定比例混合(1:1.32也有按1:1的),PH計測定ph值,調(diào)節(jié)ph=4.2-4.5,即是所需配置STREPTOZOCIN的檸檬酸緩沖液。
注射時用檸檬酸緩沖液以1的濃度溶解,按空腹體重注射相應(yīng)的STREPTOZOCIN, 在30分鐘內(nèi)注射完畢! STREPTOZOCIN容易失活,快速稱取后仍要求干燥避光,推薦用干燥鋁箔(或錫箔)紙。
6.能否使用其他溶液配置緩沖液
可以。但我們推薦使用檸檬酸。例如用醋酸等溶液,也可以做出,但其PH值不好控制,而STREPTOZOCIN只有在PH4.2-4.5的時候才具有最佳藥力活性。
7.禁食和血糖的聯(lián)系
禁食12小時以上(一般過夜禁食,不禁水)。禁食的時間越長,STREPTOZOCIN對胰島β細(xì)胞的破壞力越明顯,即藥效越高。所以相對禁食時間延長,可以降低STREPTOZOCIN的用量。
腹腔注射和尾部注射的區(qū)別
尾部注射即靜脈注射,藥物利用率較高,同比腹腔注射,可以節(jié)省藥量,缺點是操作起來不如腹腔注射方便。
8.注射前有那些操作步驟
過夜禁食后稱重,按大鼠總重量比稱取STREPTOZOCIN,放一干燥滅菌瓶內(nèi),外用錫紙包好,將檸檬酸緩沖液及裝STREPTOZOCIN的瓶子置冰浴,一起帶到動物房,如果注射操作技術(shù)不熟練,應(yīng)兩組交替注射,建議分組溶解STREPTOZOCIN,比如10只或15只鼠/組。
9.注射時,推進(jìn)速度和血糖的關(guān)系
推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的速度慢,相對的危險性較低,但也不容易成模,常規(guī)操作中多要求快速注射。當(dāng)然,STREPTOZOCIN的劑量是決定血糖高低的主要因素。
10.死鼠問題的解決
鼠的個體差別和空腹(低血糖)抵抗力的差異而致死亡率的不同,開始死亡率高可能主要是血糖突然升高,鼠不適應(yīng),或發(fā)生了DKA(即酮癥酸中毒)。
首先,一定要保證足夠的飲水量(飲水量不足容易導(dǎo)致死鼠);
其次,高血糖和低血糖都會造成死鼠,避免死鼠可以通過注射胰島素或暫時補糖,兩種途徑: 1、常見為血糖過高。補胰島素法,補一些中效胰島素。例如給諾和靈n或NPH(中性魚精蛋白鋅胰島素),每次2--3個單位,過了3-5天,大鼠一般死亡率就低了;2、補糖法,禁食后的鼠,注射的時候已經(jīng)處于低血糖狀態(tài),造模4小時后腹腔注射百分之20的葡萄糖,可避免因注射時血糖過低死鼠;
再次,防止動物自相殘殺。食物缺乏和供水不足的情況下,會互相撕殺、啃食同類,所以食物和飲水要供應(yīng)充足,最好是兩路供應(yīng);
最后,防止感染。糖尿病大鼠尿量多,墊料潮濕,需要勤換墊料,所以糖尿病大鼠較其他大鼠容易出現(xiàn)感染,特別是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血測血糖等侵入性操作前后,要注意消毒工作。如每次采血測血糖后可用四環(huán)素(或金霉素眼藥膏)局部涂抹處理傷口預(yù)防感染。
模型不達(dá)標(biāo)者,三天后補注STREPTOZOCIN(以10mg-20mg/kg體重劑量腹腔注射),也很容易成模,或讓血糖恢復(fù)正常后再常規(guī)劑量注射;但要達(dá)到理想的效果,往往是恢復(fù)到正常狀態(tài)下重新造模。
◆ STREPTOZOCIN的保存方法
2-8℃,干燥避光保存。(注:本品易潮解,如需反復(fù)取量過程中,應(yīng)避免接觸其受水受潮,受潮后30分鐘后失效,這和注射時要求其快速注射是一個道理,即其水溶液不穩(wěn)定)。
◆多次稱取STREPTOZOCIN時的操作方法和注意事項
如確實需要多次稱取,要嚴(yán)格按照避免受潮的原則操作和存放。
操作方法:操作環(huán)境、盛裝容器、分裝工具都必須保證干燥。無需冰浴,分裝后用封口膜密封瓶口,用鋁箔紙(或錫箔,即避光)將瓶子包好,放入干燥罐里(干燥劑,即保持干燥狀態(tài)), 并2-8℃冷藏,可長期保存。
以上材料僅供參考,不承擔(dān)任何數(shù)據(jù)責(zé)任,也真心希望能給您帶來幫助,為糖尿病科學(xué)做些貢獻(xiàn)。
Seebio與國外S品牌產(chǎn)品比較
Item
Specifications
Seebio [177295] S
Assay(by HPLC)
≥98.5%
≥98%
α-Isomer
≥75.0%
≥75 %
Solubility
Soluble in water
Yellow ,Clear [50 mg/ml, H2O]
Moisture Content
≤1.0%
≤3.0 %[ Water (by Karl Fischer)]
Heavy ls
≤20ppm
Related substance
Single impurity
≤0.5%
Total impurity
≤1.0%
Appearance
Pale yellow crystalline powder
White to Light Yellow Powder