細(xì)胞介紹
該細(xì)胞系由發(fā)表該細(xì)胞文章的第一作者命名，這個細(xì)胞又叫Lieming Xu-2，這是一個永生化的細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1）?來源：女性，肝。
2）?形態(tài)：星狀細(xì)胞
3）?含量：>1x106
4）?污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5）?規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式
（1）干冰運(yùn)輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇；
（2）存活細(xì)胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
（3）收到細(xì)胞后請拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。
細(xì)胞接收后的處理：
1） 收到細(xì)胞后，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2） 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時，最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度�？醇�(xì)胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細(xì)胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3） 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4） 貼壁細(xì)胞：在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）。
5） 懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基）。
6）
備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。??收到細(xì)胞后第一次傳代建議1：2傳代 。
細(xì)胞用途：
僅供科研使用。??
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）
?準(zhǔn)備1640培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）?
培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）?凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．?細(xì)胞處理：
1）?復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）?細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.?棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.?加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.?輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4 . 收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
下面T25瓶為類；
1，細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

廈門逸漠生物科技有限公司(Xiamen Immocell Biotechnology Co.,Ltd.)坐落于廈門國家留學(xué)創(chuàng)業(yè)園(翔安)產(chǎn)業(yè)園，是一家專注于細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域新產(chǎn)品、新技術(shù)開發(fā)的高新技術(shù)企業(yè)。
公司擁有一支具有深厚造詣和豐富經(jīng)驗(yàn)的高端技術(shù)人才，建設(shè)了高規(guī)格的研發(fā)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)車間，建立了規(guī)范的研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、客服管理體系。
公司與國內(nèi)外多家醫(yī)院、高等院校、科研院所、生物醫(yī)藥公司建立了良好的合作關(guān)系，贏得了良好的市場聲譽(yù)和廣泛的客戶認(rèn)可，將努力成為生命科學(xué)界可靠的合作伙伴和堅強(qiáng)的技術(shù)后盾。
企業(yè)文化我們的使命：
深耕細(xì)胞技術(shù)，共筑人類健康從細(xì)胞技術(shù)著手，深入地、多維度地進(jìn)行探索與積累,發(fā)展新產(chǎn)品與、新技術(shù)服務(wù)于生命科技探索以及人類疾病診療、人類健康發(fā)展事業(yè)。
我們的愿景：
成為生命科學(xué)領(lǐng)域被認(rèn)可與喜歡的公司我們旨在構(gòu)建細(xì)胞資源與應(yīng)用中心。我們追求為客戶提供靠譜的產(chǎn)品與技術(shù)，讓他們能夠省心省力的專注于自己的科研工作。我們的愿景是讓客戶獲得成功的同時。成為他們的心中認(rèn)可與喜歡的公司。
我們的經(jīng)營理念：
1.精益求精、開拓創(chuàng)新把成熟的產(chǎn)品做到非凡，把創(chuàng)新的產(chǎn)品做到超乎想象。
2.專業(yè)高效、合作共贏專業(yè)就是力量，專業(yè)才能高效;合作就會發(fā)展、合作才能共贏。我們秉持這種理念，以我們專業(yè)的產(chǎn)品和服務(wù)，與廣大合作伙伴共同應(yīng)對挑戰(zhàn),共同發(fā)展進(jìn)步。
我們的價值觀：
1.勇于探索逸漠的精髓基于勇敢地探索，于逆境中的自我激勵、奮然而起，于順境中自我挑戰(zhàn)、自我超越。逸漠人選擇創(chuàng)造更多的價值，選擇擁有精彩的人生。
2.團(tuán)結(jié)奮進(jìn)面對神奇的世界、美好的未來，我們心懷敬畏與謙卑。我們改變自己,適應(yīng)時代，我們團(tuán)結(jié)一致、凝聚力量，努力學(xué)習(xí)、不斷進(jìn)步，一起展現(xiàn)我們的創(chuàng)造力與影響力。
3.守護(hù)誠信逸漠發(fā)展的過程就是不斷被別人認(rèn)可的過程。我們忠誠于自己的事業(yè)，守信于他人的事務(wù)，這是我們的寶貴的財富、強(qiáng)大的基石。我們建立誠信、珍惜誠信，可以讓我們更加專注于處理自己的事情，也讓事情處理起來更加簡單、高效。
4.關(guān)愛生命尊重與關(guān)愛生命，是我們職責(zé)，也是我們的發(fā)展動力。我們守護(hù)自己與家人，快樂工作，享受生活;我們珍視生存的世界，崇尚和諧、友善的人際關(guān)系;熱愛優(yōu)美、多彩的人居環(huán)境。