細胞周期與凋亡檢測試劑盒產品原理:本產品檢測原理基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析細胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料,其嵌入雙鏈DNA中可以產生熒光,并且熒光的強度和雙鏈DNA的量成正比。
在細胞周期中,G0和G期細胞有一套染色體,G2和M期細胞有兩套染色體,S期介于兩者之間。經過碘化丙啶染色后,處在不同細胞周期中的細胞的熒光強度是不一樣的。假定G0和G期的細胞熒光強度為,那么G2和M期的細胞的熒光強度為2,S期的細胞介于和2之間。
細胞凋亡時,由于細胞核皺縮和DNA片段化,染色時DNA片段會從打孔的細胞膜處丟失,流式細胞儀檢測時,熒光強度小于,即Sub-G峰或者凋亡細胞峰。
細胞凋亡也可以用流式細胞儀觀察細胞光散射的變化來檢測。凋亡前期,染色質皺縮,細胞密度增加,前向角光散色顯著降低。凋亡后期,細胞產生凋亡小體,前向角光散射和側向角光散色都顯著降低。
產品適用:本試劑盒可用于培養(yǎng)的貼壁細胞或者懸浮細胞檢測,也可用于組織細胞檢測。
保存條件:-20°避光條件下,保存年以上,4°避光條件下,可以保存2個月。
以下是細胞生物學試劑詳細說明:
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測?蓪⒁让赶蠹毎谋4嬖诤2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經凋亡誘導處理的細胞作為對照,進行熒光補償的調節(jié)。
產品特點:
.離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好?朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應。
3.獨特的溶膠液/結合液配方,將溶膠和結合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產物清潔純化、酶切產物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用,
4.溶膠液/結合液調制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結合范圍內。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Mn(III)TBAP (25 mg) Mn(III)tetrakis(4benzoic acid) porphyrin chloride; Mn(III)TBAP
Trans (±)2Phenylcyclopropanamine, Hemisulfate; SKF trans355; 2PCPA Tranylcypromine Hemisulfate
CAY0408 (0 mg) 9oxo。alpha。,Rdihydroxycyclobutyl5Z,Edienoic acid; CAY0408
SNC 80 (5 mg) NIH 08; 4[(R)[(2S,5R)2,5dimethyl4(2propenyl)piperazinyl](3methoxyphenyl)methyl]N,Ndiethylbenzamide
WP066 ( mg) 3(6bromo2pyridinyl)2cyanoN[(S)phenylethyl]2Epropenamide; STAT Inhibitor III; WP066
Glycine,N,N’[[3’,6’bis(acetyloxy)3oxospiro[isobenzofuran(3H),9’[9H]xanthene]2’,7’diyl]bis(methylene)]bis[N[2[(acetyloxy)methoxy]2oxoethyl],bis[(acetyloxy)methyl] ester; Calcein acetoxyme Calcein AM
寶石紅蛋白染色試劑,英文名或英文縮寫:SYPRO red protein stain,級別:高,%,規(guī)格:500克
9032果膠酶(+4℃)Pectinase
美康唑,英文名或英文縮寫:Miconazole nitnate,級別:000~000,液體,6條帶,規(guī)格:克
知母皂苷A Timosaponin A (HPLC,≥%) 2004 0MG 標準品
拂青務菊酯 FLUCYTHRINcTq 702
MaleicHydrazide青鮮素克USP級,%
過硼醋內四水合物 wo7ium pqrborctq tqtrchydrctq 06007
4xy7noxy3nitnopxenylboronic acid pinacol ester 09084
N,N'二苯基聯(lián) N,N'Diphenylbenzidine,97% 53 5G 通用試劑
FMOCD絲酸/N芴甲氧羰基D絲酸/FmocDSerOH 特,98% 、5、25克 國產/進口
小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-BB ELISA Kit
小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA檢測試劑盒MousePepsinELISAKit 96T/48T
人激素敏感性脂肪酶(HSL)免疫試劑盒 Human hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit
Ratcalcium/calmodulin-dependeproteinkinase-Ⅱ,CAMK2ELISAKit大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
0%Formalin固著液50毫升
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA試劑盒小鼠腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠S00鈣結合蛋白A6(S00A6)ELISA試劑盒 ,英文名: S00A6 ELISA Kit
人糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T
細胞周期與凋亡檢測試劑盒大鼠和肽素(copeptin)免疫試劑盒 Rat Copeptin ELISA kit
英文名稱Rat5-lipoxygenaseELISAKit大鼠5-脂加氧酶(5-LO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰氨基卞啶同(AMAC)熒光輔助糖蛋白電泳(FACE)檢測試劑盒5次
vaspin人內臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑規(guī)格:48T/96T
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上海莼試生物技術有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology Co. Ltd. 專業(yè)服務于生命科學領域,擁有分子生物學、醫(yī)學、藥學、化學等方面的科研技術團隊,經營科研生化試劑、分析試劑、實驗耗材,推出技術先進、質量穩(wěn)定的科研產品。為全國乃至于世界各地科研機構、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領域的客戶,提供系統(tǒng)的產品資源及配套技術服務。推出十幾個種類產品線,部分產品接受定制服務!
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