中文名稱:
PKH67細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:~3天
PKH67細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒熒光染料PKH67 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞,通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。對細(xì)胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。
在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67的熒光強(qiáng)度會隨著細(xì)胞的分裂而逐級遞減,標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測出未分裂細(xì)胞,分裂一次(/2的熒光強(qiáng)度),二次(/4的熒光強(qiáng)度),三次(/8的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。
除了用于細(xì)胞增殖檢測,PKH67 還可以用于細(xì)胞的體外盒體內(nèi)示蹤,標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定,陽性標(biāo)記率達(dá)98%以上,標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好,能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況;或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi),可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化。
PKH67標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長達(dá)數(shù)周之久,它常被用來做活體細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。PKH67 毒性較小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患?梢愿焖伲鼫(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
PKH67標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。
PKH67標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,熒光波長:λex=490 nm,λem=502 nm。
儲存條件:-20℃避光保存。
注意事項(xiàng):
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例,也受作用時(shí)間的影響,因此當(dāng)樣品較多時(shí)測定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色,需避光保存,長時(shí)間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
MPO Assay Buffer ( ea) MPO Assay Buffer
Cambinol Cambinol (5 mg)
(+)CP ,7 (solution) (25 mg) 2[(R,3S)3hydroxycyclohexyl]5(2methyloctan2yl)phenol; (+)CP ,7 (solution)
trans Prostaglandin E3 (25 ug) trans PGE3; 9oxoα,Sdihydroxyprosta5Z,E,Etrienoic acid
JWH 398 Npentanoic acid metabolited5 ( mg) 5(3(4chloronaphthoyl)Hindolyl2,4,5,6,7d5)pentanoic acid; JWH 398 N(5carboxypentyl) metabolited5; JWH 398 Npentanoic acid metabolited5
Prostaglandin D Synthase hematopoietictype; mouse recombinant) (50 ug) HematopoieticPGDS|HPGDS, Prostaglandin D Synthase hematopoietictype; mouse recombinant)
聚氧烷,英文名或英文縮寫:Silicone,級別:基準(zhǔn)試劑,99%,規(guī)格:250毫升
26235N,N二甲基基脲,3Dimetxyl3,4,5,6tetraxy7no2(H)pyrimidinone
HISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封組織學(xué)級0MLRT
(S)() 2錄炳醋 (S)()2Chloropropionic ccid 66
L色安醋;L2安基3吲哚基炳醋;L安基吲哚炳醋 LTryptophcn;Lβ3Indolyl clcninq;(S)2cMino3(3indolyl)
GLUTARALDEHYDE,50%SOLUTION二醛,50%溶液蛋白組學(xué)級透明黃色液體COLDsigma
589錄2酮5Chloro2pentenone
DEPURINATIONSOLUTION去嘌呤溶液生物技術(shù)級透明無色溶液RTsigma
三鹽酸鹽 Triethanolamine hydrochloride 6398 25G 通用試劑
3巰基酸 3Mercaptopropionic acid,≥99% 070 25G 通用試劑
小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)ELISA試劑盒 ,英文名: NADH ELISA Kit
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA檢測試劑盒Mouseglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit 96T/48T
人激肽釋放酶8(KLK 8)免疫試劑盒 Human Kallikrein 8,KLK 8 ELISA Kit
RatBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
0%TWEEN20溶液00毫升
MouseBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒 ,英文名: Slit2 ELISA Kit
人前心肽(Pro-ANP)ELISA檢測試劑盒HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 96T/48T
大鼠環(huán)加氧酶(COX-)免疫試劑盒 Rat Cyclooxygenase-,COX- ELISA Kit
英文名稱Rat8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT大鼠8-異前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)規(guī)格:96T/48T
裂解液Ⅷ細(xì)菌活性化蛋白制備
ELISAKitODC人鳥氨酸脫羧酶規(guī)格:48T/96T
PKH67細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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