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| 銷售商： 上海莼試生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
以下是細胞生物學試劑詳細說明：
PKH67/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒PKH67/PI 雙染細胞毒性檢測試劑盒是利用細胞熒光染料PKH67和PI對細胞進行染色，利用PKH67標記靶細胞，PI標記死的靶細胞來區(qū)分不同的細胞，活的靶細胞成綠色，死的靶細胞成紅色和綠色，從而檢測細胞毒性作用。
根據(jù)不同的實驗方案設(shè)計，可以用來檢測化合物的細胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細胞或NK 細胞介導的細胞毒作用。
熒光染料PKH67是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標記細胞。對細胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，有著強而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。
在細胞分裂增殖過程中，PKH67的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標記細胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，PKH67標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次(/2的熒光強度)，二次(/4的熒光強度)，三次(/8的熒光強度)，以及更多分裂次數(shù)的細胞。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達六次甚至更多。
除了用于細胞增殖檢測，PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內(nèi)示蹤，標記后熒光在胞內(nèi)表達穩(wěn)定，陽性標記率達98%以上，標記細胞形態(tài)良好，能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況；或?qū)擞浀募毎⑷塍w內(nèi)，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。
PKH67標記的細胞用于體內(nèi)觀察可以長達數(shù)周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH67 毒性較小，不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患�？梢愿焖伲鼫蚀_和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。
PKH67/PI標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞毒性檢測。
PKH67標記細胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=490 nm,λem=502 nm。流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為502nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL detection channel。PI標記細胞呈紅色熒光，流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為647nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL2 detection channel。
PKH67標記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞毒性外，還可單染后用于細胞增殖檢測，或者用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
儲存條件：-20℃避光保存。
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當，可能引起假陽性，而用細胞刮子會造成細胞粘連成團，而影響檢測�？蓪⒁让赶蠹毎谋４嬖诤�2%BSA 的PBS 中，防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅，請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補償也不同，因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照，進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好�？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000～2000g 離心 min，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
| 中文名稱 | PKH67/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒 |
| 英文名稱 | |
| 規(guī)格 | 500T |
根據(jù)不同的實驗方案設(shè)計，可以用來檢測化合物的細胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細胞或NK 細胞介導的細胞毒作用。
熒光染料PKH67是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標記細胞。對細胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，有著強而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。
在細胞分裂增殖過程中，PKH67的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標記細胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，PKH67標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次(/2的熒光強度)，二次(/4的熒光強度)，三次(/8的熒光強度)，以及更多分裂次數(shù)的細胞。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達六次甚至更多。
除了用于細胞增殖檢測，PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內(nèi)示蹤，標記后熒光在胞內(nèi)表達穩(wěn)定，陽性標記率達98%以上，標記細胞形態(tài)良好，能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況；或?qū)擞浀募毎⑷塍w內(nèi)，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。
PKH67標記的細胞用于體內(nèi)觀察可以長達數(shù)周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH67 毒性較小，不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患�？梢愿焖伲鼫蚀_和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。
PKH67/PI標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞毒性檢測。
PKH67標記細胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=490 nm,λem=502 nm。流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為502nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL detection channel。PI標記細胞呈紅色熒光，流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為647nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL2 detection channel。
PKH67標記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞毒性外，還可單染后用于細胞增殖檢測，或者用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
儲存條件：-20℃避光保存。
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當，可能引起假陽性，而用細胞刮子會造成細胞粘連成團，而影響檢測�？蓪⒁让赶蠹毎谋４嬖诤�2%BSA 的PBS 中，防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅，請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補償也不同，因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照，進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好�？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。
MPO DMSO （ ml） MPO DMSO
生物素標記二甲基化組蛋白H3K36多肽 Biotinylated Dimethyl Histone H3K36 Peptide （200 ul）
（+）CP ，7 （solution） （0 mg） 2[（R，3S）3hydroxycyclohexyl]5（2methyloctan2yl）phenol； （+）CP ，7 （solution）
AcLETDAFC （5 mg） Caspase8 Substrate （Fluorogenic）|NAcetylLeuGluThrAsp7amido4Trifluoromethylcoumarin； NacetylLleucylLαglutamylLthreonylN[2oxo4（trifluoromethyl）2Hbenzopyran7yl]Lαasparagine
JWH 398 N（5hydroxypentyl） metabolited5 （500 ug） （4chloronaphthalenyl）（（5hydroxypentyl）Hindol3yl2，4，5，6，7d5）methanone； JWH 398 N（5hydroxypentyl） metabolited5
Prostaglandin D Synthase hematopoietictype; mouse recombinant) (250 ug) HematopoieticPGDS|HPGDS, Prostaglandin D Synthase hematopoietictype; mouse recombinant)
MALTEXTRACT麥牙提取物細菌學級KGCOLD
98N,N二甲基L本酸 99%N,NDImetxYLLpxenYLALANINE
堅牢紅鹽，英文名或英文縮寫：Fast red GG salt，級別：高，%，蘋果來源，規(guī)格：克
(S)()叔丁基亞磺酰安 (S)()2Mqthyl2propcnqsulfincmidq 343383
L酪安醋;;;Lβ隊羌本基α安基炳醋;L干酪安基醋 LTyrosinq;(S)2cMino3(4xy7noxyphqnyl)propionic ccid;3(4xy7no
GLUTARALDEHYDE,50%SOLUTION二醛,50%溶液蛋白組學級透明黃色液體COLDsigma
39麥芽四糖Maltotetraose
Benzothiopxene2sulfonyl chloride 9000
甲基酸四氫酯 Phenyl dichlorophosphate,97% 252 50ML 通用試劑
雙道定時鐘/雙道定時器 個 歐西亞
小鼠巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶8(F8)ELISA試劑盒 ，英文名： F8 ELISA Kit
兔子促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T
犬成纖維細胞生長因子23(FGF23)免疫試劑盒 Canine Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
英文名稱HumanGlycogenphosphorylaseIIELISAKit人糖原0酸化酶同工酶II(GPII)規(guī)格：96T/48T
大麥葉片原生質(zhì)細胞分離試劑盒5次
RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠Smad同源物(Smad)ELISA試劑盒 ，英文名： Smad ELISA Kit
人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA檢測試劑盒HumanMyoglobin,MYO/MBELISAKit 96T/48T
大鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)免疫試劑盒 Rat Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
英文名稱Ratai-alpha-FodrinIgG/IgAELISAKit大鼠alpha-Fodrin抗體IgG/IgA規(guī)格：96T/48T
裂解液Ⅵ線粒體裂解液
ELISAKitGEF人鳥苷酸交換因子規(guī)格：48T/96T
PKH67/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒操作步驟：
、貼壁細胞的消化生物素標記二甲基化組蛋白H3K36多肽 Biotinylated Dimethyl Histone H3K36 Peptide （200 ul）
（+）CP ，7 （solution） （0 mg） 2[（R，3S）3hydroxycyclohexyl]5（2methyloctan2yl）phenol； （+）CP ，7 （solution）
AcLETDAFC （5 mg） Caspase8 Substrate （Fluorogenic）|NAcetylLeuGluThrAsp7amido4Trifluoromethylcoumarin； NacetylLleucylLαglutamylLthreonylN[2oxo4（trifluoromethyl）2Hbenzopyran7yl]Lαasparagine
JWH 398 N（5hydroxypentyl） metabolited5 （500 ug） （4chloronaphthalenyl）（（5hydroxypentyl）Hindol3yl2，4，5，6，7d5）methanone； JWH 398 N（5hydroxypentyl） metabolited5
Prostaglandin D Synthase hematopoietictype; mouse recombinant) (250 ug) HematopoieticPGDS|HPGDS, Prostaglandin D Synthase hematopoietictype; mouse recombinant)
MALTEXTRACT麥牙提取物細菌學級KGCOLD
98N,N二甲基L本酸 99%N,NDImetxYLLpxenYLALANINE
堅牢紅鹽，英文名或英文縮寫：Fast red GG salt，級別：高，%，蘋果來源，規(guī)格：克
(S)()叔丁基亞磺酰安 (S)()2Mqthyl2propcnqsulfincmidq 343383
L酪安醋;;;Lβ隊羌本基α安基炳醋;L干酪安基醋 LTyrosinq;(S)2cMino3(4xy7noxyphqnyl)propionic ccid;3(4xy7no
GLUTARALDEHYDE,50%SOLUTION二醛,50%溶液蛋白組學級透明黃色液體COLDsigma
39麥芽四糖Maltotetraose
Benzothiopxene2sulfonyl chloride 9000
甲基酸四氫酯 Phenyl dichlorophosphate,97% 252 50ML 通用試劑
雙道定時鐘/雙道定時器 個 歐西亞
小鼠巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶8(F8)ELISA試劑盒 ，英文名： F8 ELISA Kit
兔子促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T
犬成纖維細胞生長因子23(FGF23)免疫試劑盒 Canine Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
英文名稱HumanGlycogenphosphorylaseIIELISAKit人糖原0酸化酶同工酶II(GPII)規(guī)格：96T/48T
大麥葉片原生質(zhì)細胞分離試劑盒5次
RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠Smad同源物(Smad)ELISA試劑盒 ，英文名： Smad ELISA Kit
人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA檢測試劑盒HumanMyoglobin,MYO/MBELISAKit 96T/48T
大鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)免疫試劑盒 Rat Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
英文名稱Ratai-alpha-FodrinIgG/IgAELISAKit大鼠alpha-Fodrin抗體IgG/IgA規(guī)格：96T/48T
裂解液Ⅵ線粒體裂解液
ELISAKitGEF人鳥苷酸交換因子規(guī)格：48T/96T
PKH67/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒操作步驟：
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000～2000g 離心 min，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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