細胞凋亡檢測試劑盒Ⅱ(AP)保存條件:-20℃冰凍保存。
保存期:一年
工作原理:
在機體內(nèi)部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活,細胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生與DNA斷點數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地高辛標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至3’-OH 末端,DIG-dUTP 結(jié)合在DNA斷點部位,可以通過生物素化抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)和 SABC-AP反應后,加入顯色底物 BCIP/NBT予以顯示。凋亡的細胞核呈紫藍色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。
試劑盒內(nèi)容:
.標記緩沖液(Labeling Buffer)ml
2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封閉液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗地高辛抗體(×00)20μl
6..SABC-AP(×00)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.BCIP/NBT 顯色劑(×20)0.2ml
9.抗體稀釋液4ml
以下是細胞生物學試劑詳細說明:
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測?蓪⒁让赶蠹毎谋4嬖诤2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導處理的細胞作為對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點:
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好?朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Nervonic Ceramide (25 mg) N[(S,2R,3E)2hydroxy(hydroxymethyl)3heptadecenyl]Ztetracosenamide; NZtetracosenoylsphingosine|C24 Ceramide; Nervonic Ceramide
Acetyl fentanyld5 (hydrochloride) RM ( mg) Desmethyl fentanyld5|MCV d5|NIH 05d5; Nphenyl2,3,4,5,6d5N[(2phenylethyl)4piperidinyl]acetamide, monohydrochloride
VER009 (0 mg) 3(5chloro2,4dihydroxyphenyl)Nethyl4(4methoxyphenyl)Hpyrazole5carboxamide; VER009
Amifostine (hydrate) (00 mg) Ethyol|WR 2;
αEthylaminopentiophenone (hydrochloride) (0 mg) 2(ethylamino)phenylpentanone, monohydrochloride; αEthylaminopentiophenone (hydrochloride)
NTosylPhechloromethylketone NTosylPhechloromethylketone
血紅蛋白(豬血),英文名或英文縮寫:Hb,級別:BR,200u/g,規(guī)格:250克
0BocL本甘醇BOCLpxenylglycinol
GPDA甘酰脯酰對磺酸鹽克BR,99%
,4二同單二醇縮同 ,4Cyclohqxcnqdion Monoqthylqnq ccqtcl 9
2加醋酯 97% MqTHYL 2NcPHTHOcTq 8
FCA弗氏完全佐劑5克CP,99%
去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基NA
Mesityloxide甲基異丁希甲酮00毫升BR,98%
32甲基 3Fluoro2methyl,98% 243 G 通用試劑
鋯/鋯四水合物/Zirconium sulfate tetrahydrate SP,98% 5克 國產(chǎn)/進口
小鼠胰淀素(IAPP)ELISA試劑盒 ,英文名: IAPP ELISA Kit
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測試劑盒rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T
犬睪酮(T)免疫試劑盒 Canine Testoterone ELISA Kit
英文名稱HumanCyclinDELISAKit人細胞周期素D(CyclinD)規(guī)格:96T/48T
大量Lipofusin脂質(zhì)體細胞轉(zhuǎn)染試劑盒0次/00次
RatIerleukin23,IL-23ELISA試劑盒大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 ,英文名: α2-AP ELISA Kit
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA檢測試劑盒RatPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T
細胞凋亡檢測試劑盒Ⅱ(AP)人IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)免疫試劑盒 Human COL4A3 ELISA kit
英文名稱MouseAmphiregulinELISAKit小鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(AR)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片半胱氨酸蛋白酶2(CASPASE-2)活性原位熒光染色檢測試劑盒50次
Rat26Sproteasome,26SPSMELISA試劑盒大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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上海莼試生物技術有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology Co. Ltd. 專業(yè)服務于生命科學領域,擁有分子生物學、醫(yī)學、藥學、化學等方面的科研技術團隊,經(jīng)營科研生化試劑、分析試劑、實驗耗材,推出技術先進、質(zhì)量穩(wěn)定的科研產(chǎn)品。為全國乃至于世界各地科研機構(gòu)、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領域的客戶,提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術服務。推出十幾個種類產(chǎn)品線,部分產(chǎn)品接受定制服務!
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