中文名稱：細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(FITC+POD)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：20T
發(fā)貨周期：～3天
保存條件：-20℃冰凍保存。
保存期：一年
工作原理：
在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活，細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地高辛標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 結(jié)合在 DNA 斷點(diǎn)部位，可以通過生物標(biāo)記的抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后，再結(jié)合熒光素 FITC或者過氧化物酶 POD 標(biāo)記的鏈酶親和素(SABC-FITC/SABC-POD)。FITC 在 490-495nm 激化，在 520-530nm 發(fā)射熒光，在熒光顯微鏡下呈明亮黃綠色。POD的在加入顯色底物 DAB 顯色后，凋亡的細(xì)胞核呈棕黃色。用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，在不同切片上用兩套不同顯示系統(tǒng)觀察。
試劑盒內(nèi)容：
．標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)ml
2．末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3．DIG-dUTP(×20)20μl
4．封閉液(Blocking Reagent)4ml
5．生物素化抗地高辛抗體(× 00)20μl
6．SABC-FITC(× 00)20μl
7．SABC-POD(× 00)20μl
8．Proteinase K(×200)50μl
9．抗體稀釋液 4ml
0．未染色陽性對(duì)照片 2 張。


細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(FITC+POD)注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
NFAT Inhibitor （ mg）     LmethionylLalanylglycylLprolylLhistidylLprolylLvalylLisoleucylLvalylLisoleucylLthreonylglycylLprolylLhistidylLαLglutamic acid； NFAT Inhibitor
Voriconazole （25 mg）     DRG 030|UK 0|VRC|Vfend； （αR）α（2,4difluorophenyl）5fluoroβSmethylα（H,2,4triazolylmethyl）4pyrimidineethanol
檸檬酸（500GM）     Citric Acid， CAS 9； MW .
25（S）27hydroxy Cholesterol （ mg）     （25S）cholest5ene3β，26diol； （25S）26hydroxy cholesterol； 25（S）27hydroxy Cholesterol
LNNA （50 g）     N5[imino（nitroamino）methyl]Lornithine； LNGNitroarginine|NGnitroLArginine； LNNA
Blasticidine S     Blasticidin S Hydrochloride
SMBUFFERSM 緩沖液超級(jí)500MLRT
D mg/5mg/0mg Fluka 0
綠甲基紅指示劑芬枕，英文名或英文縮寫：metxyl Red mixed indicator powder，級(jí)別：BR，%，規(guī)格：00克
頭孢炳(Z)異構(gòu)體 Cqfprozil (Z)IsoMqr
GUANIDINExy7noCHLORIDE,LOWASH鹽酸胍技術(shù)級(jí)白色至微黃色顆粒結(jié)晶粉末RTsigma
,,3,3Tetraethoxypropane二醛乙縮醛00克AR，99.5%
肖醋鐿五水合物 YTTqRBIUM nitncTq, PqNTcHYDRcTq 323
potewwium trifluoro(2fluorobipxenyl4yl)borate 06235
三乙酰 ,,Trifluoro2,4pentanedione,99.5% 37 5G 通用試劑
三油酸甘油酯/甘油三油酸醋/(Z)9十八酸,2,3三基酯/三油精/三苯基化四唑/油酸三甘酯/三醇三甘油酸酯/油精/Glycerol trioleate CP，98% 00毫升 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 ，英文名： GC ELISA Kit
小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseosteonectin,ONELISAKit 96T/48T
人間皮素(MSLN)免疫試劑盒 Human Mesothelin,MSLN ELISA KIT
Ratapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H3-S280酸化檢測(cè)試劑盒0/20次等
Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISA試劑盒小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(FITC+POD)髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒 ，英文名： α2-PI ELISA Kit
大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISAKit 96T/48T
人Jo抗體/抗組氨酰NA合成酶抗體(Jo/HRS)免疫試劑盒 Human Jo- Aibody,Jo/HRS ELISA Kit
英文名稱MouseDesminELISAKit小鼠結(jié)蛋白(Desmin)規(guī)格：96T/48T
冰凍切片半胱氨酸蛋白酶-0(CASPASE-0)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒50次
Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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