中文名稱：臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)
英文名稱：0.4% Typan Blue Solution
產(chǎn)品規(guī)格：20ml
發(fā)貨周期：～3天
臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue），一種偶氮、親水性酸性藍(lán)色染料，可透過(guò)死亡細(xì)胞和垂死細(xì)胞的細(xì)胞膜，將其染成藍(lán)色，而活細(xì)胞由于其細(xì)胞膜的完整性，可將臺(tái)盼藍(lán)排斥在外，因此，通過(guò)顏色的變化即可將活細(xì)胞（活細(xì)胞呈透明無(wú)色）和死細(xì)胞鑒別開來(lái)，基于此原理，本品廣泛用于細(xì)胞活性水平的常規(guī)評(píng)估。臺(tái)盼藍(lán)還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺(tái)盼藍(lán)與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外，臺(tái)盼藍(lán)（合適濃度）還常用來(lái)淬滅細(xì)胞表面的自熒光或者其他熒光信號(hào)。
本品為溶于生理鹽溶液的0.4%（w/v）臺(tái)盼藍(lán)染色液，以無(wú)菌形式提供，細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別。
使用方法
）對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，充分清洗后，用適當(dāng)緩沖液如PBS，HBSS重懸制成單細(xì)胞懸液；對(duì)于貼壁細(xì)胞，先用胰酶消化細(xì)胞，再按照懸浮細(xì)胞的方法制備單細(xì)胞懸液。
2）取0.5ml單細(xì)胞懸液，按照:比例與0.5ml 0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色液充分混勻，室溫染色3~0min。
【注】：因臺(tái)盼藍(lán)具有細(xì)胞毒性，染色時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致部分死細(xì)胞染色，干擾計(jì)數(shù)。
【注2】：若細(xì)胞密度比較高，可取0.2ml單細(xì)胞懸液，經(jīng)適當(dāng)緩沖液稀釋到0.5ml，之后再用0.5ml 0.4%臺(tái)盼藍(lán)染色液染色。
3）取少量上述染色細(xì)胞加入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，于顯微鏡低倍鏡下計(jì)數(shù)，分別計(jì)算著色細(xì)胞（即損傷細(xì)胞和死細(xì)胞）和總細(xì)胞。
【注】：用移液槍加染色細(xì)胞時(shí)，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個(gè)小室。不可過(guò)量加液或者不足量。
【注2】：mm2方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)通常控制在20-50 cells，當(dāng)細(xì)胞數(shù)超過(guò)200個(gè)，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4）按照以下公式來(lái)計(jì)算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比，
a，計(jì)算每ml細(xì)胞數(shù)目：Cells/ml=mm2大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×04；【注】：此時(shí)的稀釋倍數(shù)為：步驟2所取的單細(xì)胞懸液與臺(tái)盼藍(lán)染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b，總細(xì)胞數(shù)目：Total cells=（Cells/ml）×最初制備單細(xì)胞懸液的總體積
c，細(xì)胞活力值：Viability（%）=（總細(xì)胞數(shù)-總著色細(xì)胞數(shù)）/總細(xì)胞數(shù)×00
【注】：通常情況，健康的對(duì)數(shù)期培養(yǎng)細(xì)胞，活細(xì)胞至少占到95%。
儲(chǔ)存條件：室溫，有效期2年


臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Niflumic Acid （5 g）     2[[3（trifluoromethyl）phenyl]amino]3pyridinecarboxylic acid； Actol|Donalgin|Nifluril|UP83； Niflumic Acid
Mevinolin； Mevacor； Monacolin K； 6αMethylcompactin； MK803     Lovastatin
YM2036 （5 mg）     6aminoN[3[4（4morpholinyl）pyrido[3’，2’:4，5]furo[3，2d]pyrimidin2yl]phenyl]3pyridinecarboxamide； YM2036
JWH 0 N（5fluorohexyl） isomer （ mg）     JWH 0 N（5fluorohexyl） analog； （（5fluorohexyl）Hindol3yl）（naphthalenyl）methanone
2furoylLIGRLO amide （ mg）     N（2furanylcarbonyl）LleucylLisoleucylglycylLarginylLleucylLornithinamide； 2furoylLIGRLO amide
phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amided4 (00 ug)     phenyl trinor PGF2α ethyl amided4|Bimatoprostd4, phenyl trinor Prostaglandin F2α ethyl amided4, Nethyl9α,α,Strihydroxyphenyl,,2trinorprosta5Z,Edienamide3,3,4,4d4
PONCEAUS麗春紅S (猩紅S)高級(jí)深紅色結(jié)晶粉末RTsigma
58二本胺化 98%DIpxenYLAMINE SULFATE
CRESOLRED,wo7iumSALT紅鈉鹽分析級(jí)棕色結(jié)晶粉末RTsigma
反式油酸 Methyl elaidate,≥99.0% 628 ML 通用試劑
N(2羌基)N'(2磺醋)內(nèi)鹽 HqPqS 7
Lpxenylglycinol2本基25克BR，99%
0化鉀potewwium Iodide (AS);Thyroblock;Thyrojod
LpxenYLALANINEL本酸美國(guó)藥典級(jí)白色粉末RTsigma
3肖基本;間肖基;間肖基本 3nitnotoluqnq;MqthylMnitnobqnzol;MNi�瞭rotoluol 998
D木糖測(cè)試盒000支/包RT
小鼠胰高血糖素樣肽2(GLP-2)ELISA試劑盒 ，英文名： GLP-2 ELISA Kit
小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousehiston-H2bELISAKit 96T/48T
人堿性亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白(BATF)免疫試劑盒 Human BATF ELISA Kit
RatapoproteinA,apo-AELISAKit大鼠載脂蛋白A(apo-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H3-K9甲基化免疫共沉淀分析試劑盒5次
MouseAi-nuclearAibody,ANAELISA試劑盒小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒
Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancicaicialPemphigoid,CPELISA試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)組氨酸(leucine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
humanS00calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S00A9ELISAKit人S00鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S00A9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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