中文名稱：MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
英文名稱：MTT Cell Proliferation Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格：500T
發(fā)貨周期：～3天
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒本試劑盒以MTT（高純度）作為指示劑，在經(jīng)典操作步驟的基礎(chǔ)上，采用獨特的甲臜溶解液配方，可以直接溶解甲臜沉淀，無需去除原有的培養(yǎng)液。從而避免因去除培養(yǎng)液時甲臜被部分去除而引起的操作誤差。具有本底低，靈敏度高，線性范圍寬，操作簡單等特點。，本試劑盒還提供配套的一次性針頭過濾器和注射器，為實驗帶來更多的便利。
噻唑蘭（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT），也稱作溴化噻唑藍(lán)四氮唑，是一種黃色染料，已經(jīng)普遍替代傳統(tǒng)的臺盼藍(lán)染色法或者放射性同位素插入法，用來檢測細(xì)胞的活力，細(xì)胞增殖以及細(xì)胞毒性分析。檢測原理在于：MTT是一種可接受氫離子的化合物染料，帶正電荷，具有細(xì)胞膜滲透性�；罴�(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M(jìn)入的MTT還原成為水不溶性的深藍(lán)色MTT-甲臜結(jié)晶，而死細(xì)胞不具有此功能。甲臜結(jié)晶是不能穿透細(xì)胞膜，因此沉積在處于增殖且未受損傷的細(xì)胞內(nèi)。甲臜結(jié)晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來，酶標(biāo)儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細(xì)胞數(shù)目成正比，用以評估細(xì)胞存活狀況。
產(chǎn)品組份：
MTT粉末——————25mg
MTT溶劑——————5ml
甲臜溶解液————50ml
除菌套裝—————包
注意事項
)甲臜溶解液具有腐蝕性和毒性，使用時注意防護。
2)MTT有致癌性，應(yīng)小心操作；MTT溶液需要無菌，因其對菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超過周，因其可能發(fā)生降解，導(dǎo)致檢測結(jié)果錯誤。
3)MTT法只能用來檢測細(xì)胞相對數(shù)和相對活力，但不能測定細(xì)胞絕對數(shù)。在用酶標(biāo)儀檢測結(jié)果的時候，為了保證實驗結(jié)果的線性，MTT吸光度最好在0-0.7范圍內(nèi)。
4)使用微孔板進(jìn)行檢測，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間比較長，需要注意蒸發(fā)的問題。一般情況，由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā)，建議棄用周圍一圈的方法，改加PBS，水或者細(xì)胞培養(yǎng)液等。也可通過將96孔板放在靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的位置，以減緩蒸發(fā)現(xiàn)象。
5)甲臜溶解液低溫或者常溫保存可能會產(chǎn)生沉淀，只需37℃水浴使其充分溶解，混勻后即可使用。
6)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
儲存條件：4℃，有效期年

注意事項：
、懸浮細(xì)胞用此法時必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時間的影響，因此當(dāng)樣品較多時測定的OD 值可能隨時間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長時間光照會導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Niflumic Acid （50 g）     2[[3（trifluoromethyl）phenyl]amino]3pyridinecarboxylic acid； Actol|Donalgin|Nifluril|UP83； Niflumic Acid
Mevinolin； Mevacor； Monacolin K； 6αMethylcompactin； MK804     Lovastatin
Phosphinebiotin （ mg）     methyl 2（diphenylphosphino）4（oxo（2oxohexahydroHthieno[3，4d]imidazol4yl）4，7，0trioxaazanonadecylcarbamoyl）benzoate； Phosphinebiotin
JWH 0 N（5fluorohexyl） isomer （00 ug）     JWH 0 N（5fluorohexyl） analog； （（5fluorohexyl）Hindol3yl）（naphthalenyl）methanone
Deferoxamine （mesylate） （ g）     N4[5[[4[[5（acetylhydroxyamino）pentyl]amino]，4dioxobutyl]hydroxyamino]pentyl]N（5aminopentyl）Nhydroxybutanediamide， monomethanesulfonate； Ba 33|DFOM|DFX|NSC 64； Deferoxamine （mesylate）
Leukotriene B4d4 (500 ug)     LTB4d4, Leukotriene B4d4, 5S,Rdihydroxy6Z,8E,E,Zeicosatetraenoic6,7,,d4 acid
nOctanol正辛醇00克BR，40%
二本并99%NA
DEAE葡聚糖凝膠A50shēng huà shì jì容量：5KU
亞油酸 Methyl linoleate,≥99% 630 G 通用試劑
肝速酶I(20°C) HqPcRINcSq 90239
LSERINEL絲酸美國藥典級5KG
三拂磺醋釤 ScMcRIUM(III) TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 20/8/4
3(N,ODimetxylxy7noxylaminocarbonyl)pxenylboronic acid 32870
(S)()(4苯)... (S)()(4Bromophenyl)ethylamine,99% 2989 G 通用試劑
CBZL苯酸/N羰芐氧基L苯酸/N芐氧羰�；鵏苯酸/CBZLPhe 特，99% 25克 國產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠胰激肽原酶(PK)ELISA試劑盒 ，英文名： PK ELISA Kit
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MouseAi-myocardialaibody,AMAELISA試劑盒小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)ELISA檢測試劑盒RatansformingGrowthfactorβ,TGF-βELISAkit 96T/48T
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TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP完全間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗)0次
Rabbitlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)

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