Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用紅色熒光染料PE（Phycoerythrin）標(biāo)記的Annexin V作為探針，來(lái)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生，可用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。
其檢測(cè)原理為：在正常的活細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine，PS）位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ（膜聯(lián)蛋白-V）是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力結(jié)合�？赏ㄟ^(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。
另外，本試劑盒中提供的7-AAD可用來(lái)區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。7-AAD是一種核酸染料，同PI有著相似的熒光特性，但其發(fā)射光譜較PI窄，對(duì)其他檢測(cè)通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI的最佳替代品，可與Annexin V聯(lián)合使用。該染料不能透過(guò)正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜，但可穿透晚期凋亡細(xì)胞或者壞死細(xì)胞并與其內(nèi)的DNA結(jié)合。因此將Annexin V-PE與7-AAD聯(lián)合使用時(shí)，7-AAD則被排除在活細(xì)胞（Annexin V-/7-AAD-）和早期凋亡細(xì)胞（Annexin V+/7-AAD-）之外，而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被Annexin V-PE和7-AAD結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽(yáng)性（Annexin V+/7-AAD+）。
試劑盒組份：
重組人Annexin V/PE（rh Annexin V/PE）—————00μl
7-AAD Viability Staining Solution（20μg/ml）——200μl
4×Binding Buffer————————————————4ml
儲(chǔ)存條件：4℃，有效期一年。
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說(shuō)明：

中文名稱	Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱	Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
規(guī)格	20T

注意事項(xiàng)
. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05，，不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞，建議適用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不當(dāng)，可能引起假陽(yáng)性，而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán)，而影響檢測(cè)�？蓪⒁让赶�化后細(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅，請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同，因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好�？朔�了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購(gòu)買多種試劑盒的費(fèi)用，
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測(cè)pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.改進(jìn)的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性，即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。 、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的  完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。000～2000g 離心 min，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Oleoyl Oxazolopyridine （5 mg）     oxazolo[4，5b]pyridin2yloctadec9Zenone； CAY040Oleoyl Oxazolopyridine
酶抑制劑套裝II， EZBlock     EZBlock Phosphatase Inhibitor Cocktail II
Adapalene （250 mg）     6（4methoxy3tricyclo[3。3。。，7]decylphenyl）2naphthalenecarboxylic acid； CD 2|Differin； Adapalene
UCF 0 （0 mg）     dihydro5[[5（2nitrophenyl）2furanyl]methylene],3diphenyl2thioxo4,6（H,5H）pyrimidinedione
DLuciferin （potassium salt） （ g）     4，5dihydro2（6hydroxy2benzothiazolyl）4Sthiazolecarboxylic acid， monopotassium salt； DLuciferin （potassium salt）
Phenazepam (00 mg)     Fenazepam|BD 98, Phenazepam, 7bromo5(2chlorophenyl),3dihydro2H,4benzodiazepin2one
NFmocN'三本甲基D半胱酸，英文名或英文縮寫：FmocDCys(Trt)OH，級(jí)別：特，98%，規(guī)格：25克
89高錄酸銨(*)(易)AMMONIUM PERCHLORATE
FLUORESCENTNEXTGEL.5%熒光 NEXT 膠, .5%蛋白組學(xué)級(jí)RTsigma
間羥基 3Hydroxy,≥99% 4 G 通用試劑
;麩醇;呋醇 Furfuryl clcohol;2xy7noxyMqthylfurcn;2Furcnccrbinol;Furfurcl clcohol;2FurcnMqthcno
L鳥酸L天冬酸鹽00克
92異乙酯 ≥98%etxyl isobutyrate
metxyl 3(2,5dioxo2,5dixy7noHpyrrolyl)thiopxene2carbo 55232
膦�；�乙酸三乙酯 Triethyl phosphonoacetate,98% 80 25G 通用試劑
六(青氧基) Nc
小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 ，英文名： FT4 ELISA Kit
小鼠(EPI)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 96T/48T
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)免疫試劑盒 Human ureaplasma urealyticum(UU)aibody ELISA kit
Ratai-doublesandedDNA,dsDNAELISAKit大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白H2B-K46乙�；瘷z測(cè)試劑盒0/20次等
MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISA試劑盒小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素23(IL23)ELISA試劑盒 ，英文名： IL23 ELISA Kit
人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA檢測(cè)試劑盒humanadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 96T/48T
Annexin V-PE/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)免疫試劑盒 Rat thyroid stimulating hormone receptor aidoby,Ab ELISA Kit
英文名稱RatPyruvateKinaseM2ELISAKit大鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)規(guī)格：96T/48T
酒類精氨酸(arginine)含量化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitLF/LTF人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白規(guī)格：48T/96T

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