細胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)保存條件:-20℃冰凍保存一年。
工作原理:
在機體內(nèi)部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi) 源性核酸內(nèi)切酶被激活,細胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生 與 DNA 斷點數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地高辛標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結(jié) 合在 DNA 斷點部位,可以通過生物標(biāo)記的抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后,再結(jié)合 鏈酶親和素-熒光素 CY3(SABC-CY3)。Cy3 在 554nm 激化,在 568-574nm 發(fā)射熒光,呈鮮紅色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。
試劑盒內(nèi)容:
.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)ml
2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封閉液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗地高辛抗體(× 00)20μl
6.SABC-CY3(× 00)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8 抗體稀釋液 4ml
以下是細胞生物學(xué)試劑詳細說明:
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測?蓪⒁让赶蠹毎谋4嬖诤2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細胞作為對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點:
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好?朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
PA Assay Buffer (0X) ( ea) PA Assay Buffer (0X)
去乙;敢种苿 APHA Compound 8 APHA Compound 8 ( mg)
thiopToluamide (5 g) 4methylbenzenecarbothioamide; 4Methylbenzenethioamide; thiopToluamide
,2DipalmitoylsnglyceroOethyl3PC (chloride) (250 mg) ,2DipalmitoylsnglyceroOethyl3Phosphocholine|,2EDPPC|DPePC; 4ethoxyN,N,Ntrimethyl0oxo7R[(oxohexadecyl)oxy]4oxide3,5,9trioxa4phosphapentacosanaminium, monochloride
PB22 N(5hydroxypentyl) metabolite (0 mg) quinolin8yl (5hydroxypentyl)Hindole3carboxylate; PB22 N(5hydroxypentyl) metabolite
5,6,7,8tetrahydro2Naphthoic Acid (50 mg) NSC 2, 5,6,7,8tetrahydro2Naphthoic Acid, 5,6,7,8tetrahydro2naphthalenecarboxylic acid
4甲基H咪唑,英文名或英文縮寫:4metxylimidazole,級別:LR,規(guī)格:500克
23063N芐氧羰基L天冬堿NBenzyloxycarbonylLasparagine
0.XSSPEW/0.2%SDS 0.X SSPE 緩沖液,含 0.2% SDS超級LRT
D酒石醋二酯 (2S,3S)()Dixy7noxybutcnq,4dioic ccid diqthyl qstqr 8
醋順式3酯 ≥98% Lqcf ccqtctq 3
GlycylLTryosine甘酰L酪酸25克BR,99%
7基清化Trimetxylsilyl cyanide
NEM乙基H2,5二酮25克高,99%
4 4carboxaldehyde,97% 43633 G 通用試劑
鋁/十八水合鋁/Aluminum sulfate octadecahydrate AR,99%, 500克 國產(chǎn)/進口
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo-E ELISA Kit
小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒MouseIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
人精氨酰-NA合成酶(RARS)免疫試劑盒 Human Arginyl-NA Syhetase,RARS ELISA Kit
RatAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞線粒體復(fù)合物V蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒0/20次
Mouseadrenomedullin,ADMELISA試劑盒小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)小鼠白介素家族成員9(ILF9)ELISA試劑盒 ,英文名: ILF9 ELISA Kit
人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA檢測試劑盒humanParathyroidhormone,PTHELISAKit 96T/48T
大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA kit
英文名稱RatIerleukin23ELISAKit大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
菊花組織凍存試劑盒50毫升
ELISAKitHSF-人熱休克因子規(guī)格:48T/96T
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上海莼試生物技術(shù)有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology Co. Ltd. 專業(yè)服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,擁有分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)等方面的科研技術(shù)團隊,經(jīng)營科研生化試劑、分析試劑、實驗耗材,推出技術(shù)先進、質(zhì)量穩(wěn)定的科研產(chǎn)品。為全國乃至于世界各地科研機構(gòu)、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領(lǐng)域的客戶,提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術(shù)服務(wù)。推出十幾個種類產(chǎn)品線,部分產(chǎn)品接受定制服務(wù)!
公司著力立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈!