DAPI雙鏈DNA染料DAPI,也稱DAPI dihydrochloride,是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比,對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。因為DAPI是含有特定AT序列DNA的一種嵌入劑,它能像Hoechst染料一樣粘附在DNA雙螺旋的小溝區(qū)。盡管DAPI不能通過活細(xì)胞膜,但卻能穿透擾亂的細(xì)胞膜而對核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來檢測酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為360nm和460nm。
DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。推薦工作濃度為0.5-0μg/ml。
CAS:2878-90-3
分子式:C6H7Cl2N5
分子量:350.25
純度:>90% (from N)
注意事項
)DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當(dāng)防護。
2)熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑詳細(xì)說明:
注意事項
. 微量試劑取用前請離心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿防護服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于×05,,不推薦用于檢測組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細(xì)胞刮子會造成細(xì)胞粘連成團,而影響檢測?蓪⒁让赶蠹(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請不要固定樣品。
7. 因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。
產(chǎn)品特點:
.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好?朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.使用了優(yōu)質(zhì)溶膠液,不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽,不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨特的溶膠液/結(jié)合液配方,將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一,因此一個試劑盒可以運用于瓊脂糖DNA回收、PCR產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況,節(jié)省了需購買多種試劑盒的費用,
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色,便于觀察溶膠效果和監(jiān)測pH值變化從而達(dá)到最佳結(jié)合效果,大大提高回收效率。
5.改進的溶膠液配方,大大提高了緩沖能力和穩(wěn)定性,即使樣品變化很大也能將PH緩沖在最佳結(jié)合范圍內(nèi)。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
操作步驟:
、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
PAF C (5 mg) Ooctadecyl2Oacetylsnglyceryl3phosphorylcholine; PAF C
MCHB (0 mg) NMethylcyclohexyl benzimidazole analog ; (cyclohexylmethyl)2[(4ethoxyphenyl)methyl]N,NdiethylHbenzimidazole5carboxamide
2amino5methyl4phenyl Thiazole (500 mg) 5methyl4phenyl2thiazolamine; NSC ; 2amino5methyl4phenyl Thiazole
MK 07 (25 mg) Tozasertib|VX 0; N[4[[4(4methylpiperazinyl)6[(5methylHpyrazol3yl)amino]2pyrimidinyl]thio]phenyl]cyclopropanecarboxamide
Memantine (hydrochloride) (50 mg) 3,5dimethyltricyclo[3。3。。,7]decanamine, monohydrochloride; Akatinol|Axura|Ebix|NSC 02|Namenda|SUN Y70; Memantine (hydrochloride)
Bafilomycin A ( mg) (methylethyl)2Hpyran2yl]butyl]3,dimethoxy5,7,9,tetramethyloxacyclohexadeca3,5,,tetraen2one; NSC 66; Bafilomycin A
wo7ium7ichloroisocyanurate優(yōu)錄凈25克AR,99.5%
4甲基傘形酰2D甘露糖苷NA
LASCORBICACID,FREEACID抗壞血酸(維生素C)ACS級白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma
安基典 97% cminopyridinium iodidq 2870
wo7iumCHLORIDE錄生物技術(shù)級白色精細(xì)顆粒粉末RTsigma
D天冬酰胺一水物shēng huà shì jì容量:00克
腺苷5’鈉鹽NA
檸檬酸氫二shēng huà shì jì容量:克
DAPI雙鏈DNA染料羥基,4醌 2Hydroxy,4naphthoquinone,97% 837 0G 通用試劑
羅勒 Ocimene,≥90% 87 00G 通用試劑
小鼠粘蛋白5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC5B ELISA Kit
血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA檢測試劑盒MonkeyPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T
犬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒 Canine Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
英文名稱HumanNOELISAKit人(NO)ELISA規(guī)格:96T/48T
化微粒體0脂酶D(PhospholipaseD)活性比色法定量檢測試劑盒20次
RatImmunoglobulinG,IgGELISA試劑盒大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素7C(IL7C)ELISA試劑盒 ,英文名: IL7C ELISA Kit
人去甲(NA)ELISA檢測試劑盒humanNoradrenaline,NAELISAKit 96T/48T
大鼠緊密連接蛋白(ZO)免疫試劑盒 Rat tight junction protein ,ZO ELISA Kit
英文名稱RatAmyloid-β-Protein(-40)ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白-40(Aβ-40)規(guī)格:96T/48T
蕨類(fern)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
ELISAKitIMA人缺血修飾白蛋白規(guī)格:48T/96T
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