中文名稱：TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)
英文名稱：TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 647)
產(chǎn)品規(guī)格：20 rxn
發(fā)貨周期：～3天
本試劑盒應(yīng)用范圍廣，可以用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。
細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)80-200bp的DNA ladder。
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Alexa Fluor 647）可以用來檢測(cè)組織細(xì)胞在凋亡晚期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因組DNA斷裂時(shí)暴露出的3′-羥基（3′-OH）末端摻入Alexa Fluor 647-2-dUTP，從而可以用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Alexa Fluor 647為紅色熒光染料，具有很高的穩(wěn)定性和很強(qiáng)的亮度。
試劑盒組份：
5×Equilibration Buffer——————————.25 ml
Alexa Fluor 647-2-dUTP Labeling Mix———00 μl
Recombinant TdT Enzyme——————————20 μl
Proteinase K(2 mg/ml)———————————40 μl
儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期一年。


TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)注意事項(xiàng)：
、懸浮細(xì)胞用此法時(shí)必須經(jīng)離心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成比例，也受作用時(shí)間的影響，因此當(dāng)樣品較多時(shí)測(cè)定的OD 值可能隨時(shí)間而變。
3、MTT 溶液為黃色，需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。MTT 溶液在4℃或較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作規(guī)程
、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
 a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00
 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
PAzPC （0 mg）     Ohexadecanoyl2O（9carboxyoctanoyl）snglyceryl3phosphocholine； Palmitoyl2Azelaoyl PC|Azelaoyl PC； PAzPC
PPACKII （trifluoroacetate salt） （5 mg）     HDPhePheArgChloromethyl Ketone； DphenylalanylN[（S）4[（aminoiminomethyl）amino]（chloroacetyl）butyl]Lphenylalaninamide, bis（trifluoroacetate）
（+）Blebbistatin （25 mg）     ，2，3，3atetrahydro3aRhydroxy6methylphenyl4Hpyrrolo[2，3b]quinolin4one； （R）Blebbistatin； （+）Blebbistatin
Zaltoprofen （0 mg）     CN 00|Soleton； 0,dihydroamethyl0oxodibenzo[b,f]thiepin2acetic acid
KY 02 （5 mg）     N
pGB Caspase3 siRNA Vector     pGB Caspase3 siRNA Vector
BocDasparagineN叔丁氧羰基D天冬酰胺克BR，98%
80283D果糖，6二三鈉(28℃)DFructose,6diphosphate triwo7ium salt octahydrate
RAPIDWESTERNBLOTTINGKITRABBITWT快速Western Blotting試劑盒兔(濕轉(zhuǎn))FROZENsigma
，2炳二醇二醋酯 ,2Propylqnqglycol diccqtctq 6
基鈷安速(20℃) Mqcobclcmin 24
FMOCL亮酸公斤
502阿司匹林Aspirin
皮脂酸二，英文名或英文縮寫：Dimetxyl sebacate，級(jí)別：CP，98%，規(guī)格：5克
氧化釔 Yttrium oxide,99.99% 3 0G 通用試劑
無水四硼醋 litxium tqtrcborctq 000
小鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ，英文名： LpPLA2 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeymaixmetalloproteinase,MMPELISAKit 96T/48T
犬凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒 Canine thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit
英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP3ELISAKIT人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)規(guī)格：96T/48T
化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pcDNA-RUNX3)測(cè)序引物對(duì)2OD
RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISA試劑盒大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素3(IL3)ELISA試劑盒 ，英文名： IL3 ELISA Kit
人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測(cè)試劑盒Human50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)免疫試劑盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)英文名稱RatMGαELISAKit大鼠α微球蛋白(MGα)規(guī)格：96T/48T
咖啡環(huán)氨酸(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitFK人趨化因子規(guī)格：48T/96T

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